| 摘要 | 第1-4页 |
| SUMMARY | 第4-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1. 整联蛋白研究概况 | 第11-16页 |
| ·整联蛋白的结构 | 第11-12页 |
| ·整联蛋白介导的信号转导机理 | 第12-15页 |
| ·整联蛋白构象变化介导的信号转导 | 第12-14页 |
| ·αI 结构域缺失型整联蛋白 | 第12-13页 |
| ·αI 结构域型整联蛋白 | 第13-14页 |
| ·整联蛋白胞质区和跨膜区的构象变化 | 第14页 |
| ·整联蛋白介导的其他信号转导途径 | 第14-15页 |
| ·整联蛋白与病毒感染 | 第15页 |
| ·小结与展望 | 第15-16页 |
| 2. 口蹄疫病毒细胞受体研究进展 | 第16-20页 |
| ·整联蛋白受体 | 第16-19页 |
| ·整联蛋白αvβ3 | 第16-17页 |
| ·整联蛋白αvβ6 | 第17-18页 |
| ·整联蛋白αvβ1 | 第18页 |
| ·整联蛋白αvβ8 | 第18-19页 |
| ·硫酸乙酰肝素受体 | 第19-20页 |
| ·其他细胞受体 | 第20页 |
| 3. 展望 | 第20-22页 |
| 第二章 绵羊FMDV 受体整联蛋白β6 亚基配体结合域的原核表达 | 第22-34页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| ·感受态细胞、原核表达载体 | 第22页 |
| ·酶和试剂 | 第22-23页 |
| ·仪器和设备 | 第23页 |
| 2 研究方法 | 第23-30页 |
| ·重组原核表达质粒pP_(RO)/β6LBD 的构建 | 第23-26页 |
| ·目的基因的扩增 | 第23页 |
| ·PCR 产物回收 | 第23-24页 |
| ·目的基因与载体的双酶切 | 第24-25页 |
| ·目的基因与表达载体的连接转化 | 第25页 |
| ·目的基因与表达载体的连接 | 第25页 |
| ·连接产物的转化 | 第25页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的提取 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第27-28页 |
| ·蛋白凝胶的配制 | 第27页 |
| ·上样与电泳 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析 | 第28页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·重组蛋白的鉴定 | 第28-30页 |
| ·间接ELISA 分析 | 第28-29页 |
| ·Western-Blot 分析 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-32页 |
| ·重组原核表达质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和纯化 | 第30-31页 |
| ·表达产物的鉴定 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 表达绵羊FMDV 受体整联蛋白β6 亚基的SW480 细胞系的构建 | 第34-42页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·细胞与载体 | 第34页 |
| ·酶和试剂 | 第34页 |
| ·细胞培养试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| 2 实验方法 | 第35-37页 |
| ·重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/β65 的构建 | 第35页 |
| ·目的基因的扩增 | 第35页 |
| ·重组真核表达质粒的构建与鉴定 | 第35页 |
| ·重组真核表达质粒的提取 | 第35-36页 |
| ·重组质粒转染SW480 细胞 | 第36页 |
| ·稳定表达细胞株的筛选 | 第36-37页 |
| ·重组质粒在转染细胞中表达的检测 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光（IFA）检测 | 第37页 |
| ·Western-Blot 检测 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-40页 |
| ·重组真核表达质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组真核表达质粒的提取与浓度测定 | 第38页 |
| ·稳定表达细胞株的筛选及检测 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 免疫组化和免疫荧光法检测整联蛋白ΑVβ6 在绵羊体内组织的表达分布 | 第42-56页 |
| 1 材料 | 第42-43页 |
| ·动物组织 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 2 实验方法 | 第43-46页 |
| ·组织冰冻切片的制备 | 第43页 |
| ·检测方法 | 第43-46页 |
| ·间接免疫组化法 | 第43-45页 |
| ·反应条件的优化 | 第43-44页 |
| ·间接免疫组织化学显色 | 第44-45页 |
| ·间接免疫荧光法 | 第45-46页 |
| 3 结果观察 | 第46-54页 |
| ·间接免疫组化法检测整联蛋白αvβ6 的组织分布 | 第46-49页 |
| ·间接免疫组化法的建立及优化 | 第46页 |
| ·整联蛋白αvβ6 的组织分布 | 第46-49页 |
| ·间接免疫荧光双标记法检测整联蛋白αvβ6 的组织分布 | 第49-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 FMDV 整联蛋白受体基因在绵羊体内组织转录水平的相对定量研究 | 第56-68页 |
| 1 材料 | 第56-57页 |
| ·动物组织 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器设备 | 第56-57页 |
| 2 实验方法 | 第57-59页 |
| ·样品采集 | 第57页 |
| ·引物设计 | 第57页 |
| ·组织RNA 的提取和纯化 | 第57-58页 |
| ·反转录 | 第58页 |
| ·实时荧光定量PCR 体系的建立 | 第58-59页 |
| ·相对定量标准曲线的制作 | 第59页 |
| ·实验数据分析 | 第59页 |
| 3 结果 | 第59-66页 |
| ·实时定量PCR 产物特异性分析 | 第59-62页 |
| ·相对定量标准曲线 | 第62-65页 |
| ·不同组织中目的基因m RNA 的转录水平 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 研究结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 附录 溶液的配制 | 第75-79页 |
| 作者简介 | 第79-80页 |
| 导师简介 | 第80-81页 |
