摘要 | 第1-4页 |
Summary | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-29页 |
·羊痘的研究进展 | 第9-18页 |
·羊痘的流行概况 | 第9页 |
·羊痘病毒的基本特征 | 第9-10页 |
·羊痘病毒基因组结构 | 第10-11页 |
·羊痘病毒的P32 结构蛋白 | 第11-12页 |
·羊痘诊断技术研究 | 第12-14页 |
·羊痘免疫技术研究 | 第14-18页 |
·DNA疫苗免疫佐剂的研究进展 | 第18-29页 |
·共刺激分子 | 第18-21页 |
·细胞因子 | 第21-25页 |
·CpG DNA 基序 | 第25-26页 |
·脂质体 | 第26-27页 |
·研究目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 羊 CD58 的克隆与表达 | 第29-45页 |
·材料 | 第29-32页 |
·菌种和载体 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·采样动物 | 第29页 |
·引物 | 第29页 |
·溶液和试剂 | 第29-31页 |
·仪器与设备 | 第31-32页 |
·方法 | 第32-40页 |
·淋巴细胞的分离 | 第32页 |
·细胞总RNA 抽提 | 第32-33页 |
·RT-PCR 扩增CD58 基因 | 第33-34页 |
·CD58 基因的纯化回收 | 第34-35页 |
·目的基因的克隆 | 第35-37页 |
·重组表达载体的构建 | 第37-38页 |
·重组表达质粒的诱导表达 | 第38页 |
·表达产物的检测 | 第38-40页 |
·结果 | 第40-43页 |
·绵羊CD58 基因克隆 | 第40页 |
·重组表达载体pGEX-CD58 的PCR 及酶切鉴定 | 第40-42页 |
·羊CD58 表达产物的SDS-PAGE | 第42-43页 |
·羊CD58 表达产物的Western-bloting 检测 | 第43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第三章 羊痘 P32基因与羊 CD58基因共表达质粒的构建 | 第45-63页 |
·材料 | 第45-47页 |
·菌种和载体 | 第45页 |
·主要试剂 | 第45页 |
·实验毒株 | 第45页 |
·引物 | 第45-46页 |
·溶液与试剂 | 第46-47页 |
·仪器与设备 | 第47页 |
·方法 | 第47-57页 |
·羊痘病毒P32 基因的克隆 | 第47-52页 |
·共表达载体的构建 | 第52-54页 |
·共表达载体在BHK 细胞中的表达 | 第54-55页 |
·共表达载体的动物试验 | 第55页 |
·间接ELISA 试验检测体液免疫 | 第55-56页 |
·MTT 试验检测细胞免疫 | 第56-57页 |
·结果 | 第57-61页 |
·羊痘病毒P32 基因的克隆 | 第57页 |
·pBudCE4.1/CD58/P32 重组质粒的酶切鉴定 | 第57-58页 |
·共表达载体质粒的大量提取 | 第58页 |
·共表达载体在BHK 细胞中的表达 | 第58-59页 |
·共表达载体的动物实验 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-63页 |
·关于共表达载体构建的问题 | 第61页 |
·关于动物实验的问题 | 第61-63页 |
第四章 全文结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简介 | 第73-74页 |
导师简介 | 第74-75页 |