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羊痘病毒P32基因与羊CD58基因共表达质粒的构建及其表达产物免疫活性分析

摘要第1-4页
Summary第4-9页
第一章 文献综述第9-29页
   ·羊痘的研究进展第9-18页
     ·羊痘的流行概况第9页
     ·羊痘病毒的基本特征第9-10页
     ·羊痘病毒基因组结构第10-11页
     ·羊痘病毒的P32 结构蛋白第11-12页
     ·羊痘诊断技术研究第12-14页
     ·羊痘免疫技术研究第14-18页
   ·DNA疫苗免疫佐剂的研究进展第18-29页
     ·共刺激分子第18-21页
     ·细胞因子第21-25页
     ·CpG DNA 基序第25-26页
     ·脂质体第26-27页
     ·研究目的和意义第27-29页
第二章 羊 CD58 的克隆与表达第29-45页
   ·材料第29-32页
     ·菌种和载体第29页
     ·主要试剂第29页
     ·采样动物第29页
     ·引物第29页
     ·溶液和试剂第29-31页
     ·仪器与设备第31-32页
   ·方法第32-40页
     ·淋巴细胞的分离第32页
     ·细胞总RNA 抽提第32-33页
     ·RT-PCR 扩增CD58 基因第33-34页
     ·CD58 基因的纯化回收第34-35页
     ·目的基因的克隆第35-37页
     ·重组表达载体的构建第37-38页
     ·重组表达质粒的诱导表达第38页
     ·表达产物的检测第38-40页
   ·结果第40-43页
     ·绵羊CD58 基因克隆第40页
     ·重组表达载体pGEX-CD58 的PCR 及酶切鉴定第40-42页
     ·羊CD58 表达产物的SDS-PAGE第42-43页
     ·羊CD58 表达产物的Western-bloting 检测第43页
   ·讨论第43-45页
第三章 羊痘 P32基因与羊 CD58基因共表达质粒的构建第45-63页
   ·材料第45-47页
     ·菌种和载体第45页
     ·主要试剂第45页
     ·实验毒株第45页
     ·引物第45-46页
     ·溶液与试剂第46-47页
     ·仪器与设备第47页
   ·方法第47-57页
     ·羊痘病毒P32 基因的克隆第47-52页
     ·共表达载体的构建第52-54页
     ·共表达载体在BHK 细胞中的表达第54-55页
     ·共表达载体的动物试验第55页
     ·间接ELISA 试验检测体液免疫第55-56页
     ·MTT 试验检测细胞免疫第56-57页
   ·结果第57-61页
     ·羊痘病毒P32 基因的克隆第57页
     ·pBudCE4.1/CD58/P32 重组质粒的酶切鉴定第57-58页
     ·共表达载体质粒的大量提取第58页
     ·共表达载体在BHK 细胞中的表达第58-59页
     ·共表达载体的动物实验第59-61页
   ·讨论第61-63页
     ·关于共表达载体构建的问题第61页
     ·关于动物实验的问题第61-63页
第四章 全文结论第63-64页
参考文献第64-72页
致谢第72-73页
作者简介第73-74页
导师简介第74-75页

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