| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 第1章 文章综述 | 第11-29页 |
| 1 植物干旱胁迫与耐旱机理 | 第11-20页 |
| ·干旱胁迫对植物生长的影响 | 第11-12页 |
| ·植物抗旱生理机理研究进展 | 第12-15页 |
| ·渗透调节 | 第12-13页 |
| ·气孔调节 | 第13-14页 |
| ·激素调节 | 第14页 |
| ·抗氧化防御系统 | 第14-15页 |
| ·干旱诱导蛋白 | 第15页 |
| ·植物抗旱的分子生物学机制 | 第15-20页 |
| ·水分胁迫信号的感知与识别 | 第16页 |
| ·干旱胁迫下胞间信使的产生及运输 | 第16-17页 |
| ·干旱信号的胞内转导 | 第17-18页 |
| ·干旱胁迫诱导基因的表达及其调控 | 第18-20页 |
| 2 植物的盐害与耐盐机理 | 第20-23页 |
| ·原初盐害 | 第20页 |
| ·次级盐害(离子胁迫) | 第20-22页 |
| ·植物的盐适应及其调控机制 | 第22-23页 |
| 3 RACK1 蛋白与植物干旱及盐胁迫 | 第23-27页 |
| ·RACK1 蛋白 | 第23-24页 |
| ·RACK1 蛋白的功能 | 第24-26页 |
| ·RACK1 蛋白作为信号分子的调节作用 | 第26-27页 |
| 4 本实验研究的目的及意义 | 第27-29页 |
| 第2章 转OsRACK1 基因水稻系的构建及OsRACK1 表达分析 | 第29-36页 |
| 1 材料与方法 | 第30-32页 |
| ·酶与试剂 | 第30页 |
| ·相关溶液的配制 | 第30页 |
| ·X-Gluc 染液的配制 | 第30页 |
| ·Southern blot 所需试剂配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·转基因水稻的GUS 组织化学活性检测 | 第30-31页 |
| ·Southern blotting 检测 | 第31页 |
| ·OsRACK1 表达的定量分析（RQ-PCR） | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-34页 |
| ·转基因水稻的GUS 组织化学活性检测 | 第32页 |
| ·转基因水稻的Southern blotting 检测 | 第32-33页 |
| ·RNA 完整性检测 | 第33页 |
| ·PCR 扩增水稻OsRACK1 基因的cDNA | 第33-34页 |
| ·RQ-PCR 检测OsRACK1 的表达 | 第34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| 第3章 转基因水稻种子萌发期间响应干旱及盐胁迫的机理研究 | 第36-51页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·种子萌发测定项目及方法 | 第37-39页 |
| ·培养皿发芽试验 | 第37页 |
| ·可溶性糖含量的测定 | 第37页 |
| ·可溶性蛋白含量的测定 | 第37-38页 |
| ·MDA 含量的测定 | 第38页 |
| ·SOD 含量的测定 | 第38页 |
| ·抗旱相关基因MYC，P5CS 的表达测定（RQ-PCR） | 第38页 |
| ·数据处理 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·干旱胁迫对水稻种子萌发的影响 | 第39页 |
| ·干旱胁迫下水稻种子中可溶性糖含量变化 | 第39-40页 |
| ·干旱胁迫下水稻种子中可溶性蛋白含量变化 | 第40-41页 |
| ·干旱胁迫下水稻种子中MDA 含量变化 | 第41-42页 |
| ·干旱胁迫下水稻种子中SOD 活性变化 | 第42-43页 |
| ·干旱胁迫下MYC，P5CS 表达变化 | 第43-44页 |
| ·盐胁迫下水稻种子中可溶性糖含量变化 | 第44-45页 |
| ·盐胁迫下水稻种子中可溶性蛋白含量变化 | 第45-46页 |
| ·盐胁迫下水稻种子中MDA 含量变化 | 第46-47页 |
| ·盐胁迫下水稻种子中SOD 活性变化 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第4章 水稻OsRACK1 蛋白的表达纯化 | 第51-69页 |
| 1 材料与方法 | 第52-58页 |
| ·菌株与质粒 | 第52页 |
| ·酶与试剂 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52页 |
| ·相关溶液的配制 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-58页 |
| ·目的基因AtRACK1 的克隆 | 第52-53页 |
| ·凝胶回收PCR 产物 | 第53页 |
| ·目的基因连接到pMD 18-T simple vector | 第53页 |
| ·大肠杆菌（E.coli）DH5α感受态细胞的制备 | 第53-54页 |
| ·大肠杆菌（E.coli）DH5α的转化 | 第54页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第54-55页 |
| ·DNA 序列分析 | 第55页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1/OsRACK1 的构建 | 第55-56页 |
| ·pMD 18-T simple-OsRACK1 和pGEX-6P-1 双酶切及纯化回收 | 第55页 |
| ·表达载体pGEX-6P-1/OsRACK1 的构建 | 第55-56页 |
| ·连接重组子转化大肠杆菌BL21 | 第56页 |
| ·大肠杆菌BL21 感受态的制备（方法见1.6.4） | 第56页 |
| ·连接重组子的转化 | 第56页 |
| ·大肠杆菌BL21 中重组子的PCR 鉴定 | 第56页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第56-58页 |
| ·目的蛋白的初步诱导表达 | 第56页 |
| ·最适表达条件优化 | 第56-57页 |
| ·最适诱导剂浓度分析 | 第56-57页 |
| ·最适诱导剂时间分析 | 第57页 |
| ·最佳诱导温度分析 | 第57页 |
| ·目的蛋白的大量表达 | 第57-58页 |
| ·OsRACK1 蛋白的分离纯化 | 第58页 |
| ·GST 琼脂糖亲和层析 | 第58页 |
| ·Sephadex G-100 凝胶过滤 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-66页 |
| ·PCR 扩增目的基因OsRACK1 | 第58-59页 |
| ·TA 克隆产物鉴定 | 第59页 |
| ·序列比对结果 | 第59-60页 |
| ·目的基因与表达载体连接产物鉴定 | 第60-61页 |
| ·大肠杆菌BL21 重组子的鉴定 | 第61-62页 |
| ·目的蛋白的检测 | 第62-66页 |
| ·目的蛋白的小量表达 | 第62-63页 |
| ·目的蛋白的表达条件的优化 | 第63-65页 |
| ·IPTG 浓度的优化 | 第63页 |
| ·诱导时间的优化 | 第63-64页 |
| ·诱导温度的优化 | 第64-65页 |
| ·目的蛋白在宿主菌中的分布 | 第65页 |
| ·OsRACK1/GST 蛋白的纯化 | 第65-66页 |
| ·OsRACK1/GST 蛋白过谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和柱 | 第65-66页 |
| ·OsRACK1/GST 融合蛋白过Sephadex G-100 | 第66页 |
| 3. 讨论 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
