| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| ·课题的提出 | 第12-13页 |
| ·番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)研究进展 | 第13-15页 |
| ·株系及寄主范围 | 第13-14页 |
| ·典型症状和危害 | 第14页 |
| ·番木瓜环斑病毒的分子生物学特征 | 第14-15页 |
| ·外壳蛋白(CP)基因介导的抗病毒基因工程研究进展 | 第15-16页 |
| ·外壳蛋白基因的作用机理 | 第15页 |
| ·国内外研究的现状及存在的问题 | 第15-16页 |
| ·番木瓜抗病毒基因工程研究进展 | 第16页 |
| ·RNAi(RNA interference)技术介导的抗病毒基因工程 | 第16-20页 |
| ·RNAi的机制 | 第17-18页 |
| ·RNAi技术的特点 | 第18-19页 |
| ·RNAi介导的抗病毒方法 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-30页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·菌株、质粒与毒源 | 第21页 |
| ·试剂与仪器 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·PCR使用的引物 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第23页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA提取 | 第23-24页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| ·质粒转化农杆菌 | 第24-25页 |
| ·烟草植株的扩繁与移栽 | 第25页 |
| ·烟草接种番木瓜环斑病毒 | 第25页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·RNA琼脂糖变性凝胶电泳 | 第26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·番木瓜苗的种植 | 第27页 |
| ·农杆菌渗入试验 | 第27-28页 |
| ·番木瓜接种番木瓜环斑病毒 | 第28页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第28页 |
| ·拟南芥转化子的筛选 | 第28-29页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第29页 |
| ·拟南芥T2代转化子阳性率计算 | 第29页 |
| ·拟南芥接种番木瓜环斑病毒 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-40页 |
| ·pHG12-CP_(IR)转基因烟草的抗病毒分析 | 第30-32页 |
| ·番木瓜环斑病毒接种烟草 | 第30页 |
| ·转基因烟草的抗病分子检测 | 第30-32页 |
| ·RNA的提取与检测 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR检测 | 第31-32页 |
| ·农杆菌介导的番木瓜瞬时表达体系的抗病毒分析 | 第32-34页 |
| ·番木瓜环斑病毒接种番木瓜 | 第32-33页 |
| ·农杆菌渗入试验 | 第32页 |
| ·病毒接种 | 第32-33页 |
| ·RNA提取与RT-PCR检测 | 第33-34页 |
| ·pHG12-CP_(IR)转化拟南芥与抗病毒分析 | 第34-40页 |
| ·pHG12-CP_(IR)转化拟南芥 | 第34-38页 |
| ·转pHG12-CP_(IR)基因拟南芥T1代种子筛选与PCR检测 | 第34-36页 |
| ·转pHG12-CP_(IR)基因拟南芥T2代种子筛选与PCR检测 | 第36-38页 |
| ·pHG12-CP_(IR)转基因拟南芥的抗病毒分析 | 第38-40页 |
| ·番木瓜环斑病毒接种拟南芥 | 第38-39页 |
| ·RNA提取与RT-PCR检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| ·转基因植株的抗病性检测 | 第40-41页 |
| ·农杆菌介导的基因瞬时表达体系的研究 | 第41-42页 |
| ·拟南芥遗传转化与检测 | 第42-43页 |
| ·下一步工作及展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录一 图版与说明 | 第52-56页 |
| 附录二 相关药品的配制 | 第56页 |
