| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1 前言 | 第12页 |
| 2 猪基因组计划研究进展 | 第12-13页 |
| 3 参与脂肪代谢的重要基因 | 第13-17页 |
| 4 脂滴 | 第17-19页 |
| ·胞内脂滴的结构 | 第18页 |
| ·参与脂滴代谢的调控网络 | 第18-19页 |
| 5 猪FIT基因的研究进展 | 第19-21页 |
| 第二章 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第三章 材料与方法 | 第22-34页 |
| 1 引言 | 第22页 |
| 2 试验材料 | 第22-25页 |
| ·试验样品和性状测定 | 第22页 |
| ·DNA样品 | 第22页 |
| ·组织样品 | 第22页 |
| ·性状测定 | 第22页 |
| ·主要仪器和设备 | 第22-23页 |
| ·载体和菌株 | 第23-24页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第24页 |
| ·主要药品及试剂 | 第24-25页 |
| 3 试验方法 | 第25-34页 |
| ·猪血液基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·基因组DNA的浓度测定和质量检测 | 第25页 |
| ·猪组织总RNA的提取及cDNA的制备 | 第25-26页 |
| ·总RNA的提取 | 第25-26页 |
| ·RNA的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26页 |
| ·反转录反应 | 第26页 |
| ·猪FIT基因基因组序列的克隆、测序及SNPs研究 | 第26-31页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26-27页 |
| ·PCR产物的回收、纯化和克隆测序 | 第27-28页 |
| ·DNA序列的生物信息学分析及相应的软件 | 第28页 |
| ·猪FIT基因部分SNP位点的PCR-RFLP,PCR-SSCP检测 | 第28-30页 |
| ·SNP的统计分析 | 第30-31页 |
| ·猪FIT1基因转录水平组织表达谱分析 | 第31页 |
| ·总RNA的提取及RNA质量的检测 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增体系 | 第31页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·目的片段的获得 | 第31-32页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第32页 |
| ·重组质粒的转化和鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·细胞培养和瞬时转染 | 第33-34页 |
| ·细胞培养与传代 | 第33页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第33-34页 |
| 第四章 实验结果 | 第34-55页 |
| 1 总RNA的提取 | 第34页 |
| 2 猪FIT2基因 | 第34-37页 |
| ·猪FIT2基因的基因组序列的克隆、测序及序列分析 | 第34-35页 |
| ·猪FIT2基因编码区序列及其推导的氨基酸序列分析 | 第35页 |
| ·猪FIT2基因的SNP分析 | 第35-37页 |
| ·猪FIT2基因的SNP检测 | 第35页 |
| ·不同猪种中T559C多态性分布的检测结果 | 第35-36页 |
| ·猪FIT2基因的PCR-BcnⅠ-RFLP基因型与性状的关联分析 | 第36-37页 |
| ·利用半定量RT-PCR对猪FIT2基因进行组织表达谱分析 | 第37页 |
| 3 猪FIT1基因 | 第37-55页 |
| ·猪FIT1基因的基因组序列克隆、测序及序列分析 | 第37页 |
| ·猪FIT1基因编码区序列及其推导的氨基酸的序列分析 | 第37-38页 |
| ·猪FIT1基因的SNP分析 | 第38-48页 |
| ·猪FIT1基因的SNP检测 | 第38-40页 |
| ·猪FIT1基因生物信息学分析 | 第40-44页 |
| ·第一外显子G72A位点分析 | 第44-46页 |
| ·猪FIT1基因外显子2插入/缺失和C581A位点分析 | 第46-48页 |
| ·单倍型分析 | 第48-49页 |
| ·利用半定量RT-PCR对猪FIT1基因进行组织表达谱分析 | 第49-50页 |
| ·猪FIT1蛋白进化树分析 | 第50-52页 |
| ·猪FIT1基因启动子的生物信息学预测 | 第52-53页 |
| ·启动子顺式元件的预测 | 第52页 |
| ·转录因子结合位点的预测 | 第52-53页 |
| ·猪FIT1基因融合蛋白的体外表达 | 第53-55页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·融合蛋白的体外表达 | 第54-55页 |
| 第五章 讨论 | 第55-59页 |
| 1 关于猪7号染色体 | 第55-56页 |
| 2 关于SNPs的检测 | 第56-57页 |
| 3 关于基因与部分经济性状的关联分析 | 第57页 |
| 4 关于单倍型分析 | 第57-58页 |
| 5 关于融合表达载体选择及引物设计 | 第58-59页 |
| 第六章 小结 | 第59-61页 |
| 1 本研究获得的结果及创新点 | 第59页 |
| 2 本研究的不足之处 | 第59-60页 |
| 3 下一步研究计划 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
