| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·水稻黄单胞菌及其危害 | 第12页 |
| ·新型抗菌物质的生物合理设计与作用靶标的选择 | 第12-13页 |
| ·脂肪酸合成途径简介 | 第13-16页 |
| ·烯酞-ACP还原酶的结构差异 | 第16-17页 |
| ·水稻黄单胞菌中的烯酞-ACP还原酶 | 第17-19页 |
| ·以细菌FASⅡ途径为靶标的抗菌物质研究现状 | 第19页 |
| ·蛋白质晶体学原理 | 第19-22页 |
| ·蛋白质结晶的方法 | 第20页 |
| ·蛋白质结晶条件的筛选和优化 | 第20-21页 |
| ·晶体结构解析方法 | 第21-22页 |
| ·研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-31页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·细菌菌株与质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-31页 |
| ·Xoo fabV基因的克隆 | 第25-27页 |
| ·小量制备质粒DNA | 第25页 |
| ·菌落PCR扩增Xoo fabV基因 | 第25-26页 |
| ·E.coli BL21(DE3)感受态的制备 | 第26页 |
| ·pET28b(+)/fabV载体构建 | 第26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第26页 |
| ·阳性克隆子的验证 | 第26-27页 |
| ·重组质粒表达的小量检测 | 第27页 |
| ·重组XoFabV的表达及纯化 | 第27-29页 |
| ·重组蛋白XoFabV的可溶性检测 | 第27页 |
| ·Ni~(2+)-NTA亲和纯化 | 第27-28页 |
| ·蛋白质浓缩 | 第28页 |
| ·分子排阻色谱纯化 | 第28页 |
| ·A_(280)/A_(260)法测定蛋白溶液的浓度 | 第28-29页 |
| ·重组XoFabV蛋白的体外酶活性检测 | 第29页 |
| ·圆二色谱分析法分析重组XoFabV蛋白的二级结构 | 第29页 |
| ·重组XoFabV蛋白的超速离心分析 | 第29-30页 |
| ·重组XoFabV蛋白质晶体的培养 | 第30-31页 |
| ·晶体生长的准备 | 第30页 |
| ·悬滴法培养晶体 | 第30页 |
| ·硒代XoFabV蛋白质样品的准备 | 第30-31页 |
| ·浸泡重原子法制备同晶置换晶体 | 第31页 |
| ·重组XoFabV蛋白质晶体的结构解析及结构模型 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-46页 |
| ·Xoo fabV基因的克隆 | 第31页 |
| ·重组XoFabV蛋白的表达及纯化 | 第31-34页 |
| ·重组XoFabV蛋白的体外酶活性检测 | 第34-35页 |
| ·XoFabV超速离心的分析结果 | 第35-36页 |
| ·XoFabV二级结构分析 | 第36-37页 |
| ·重组XoFabV蛋白质晶体的培养 | 第37-39页 |
| ·硒代XoFabV蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·硒代XoFabV蛋白质结构的解析 | 第40-43页 |
| ·XoFabV/NAD+复合体晶体的生长 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-52页 |
| 5 总结与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61页 |