| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语 | 第8-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-32页 |
| ·真核生物转录过程概述 | 第12-15页 |
| ·依赖于RNA 聚合酶II 的基因转录 | 第12-14页 |
| ·RNA 聚合酶II 转录时的瞬间休止与停滞 | 第14页 |
| ·真核生物RNA 聚合酶II 控制的转录过程需要多种转录因子参与 | 第14-15页 |
| ·Elongator 复合物 | 第15-23页 |
| ·Elongator 复合物的发现 | 第15-16页 |
| ·Elongator 复合物的结构、定位及作用机制 | 第16页 |
| ·Elongator 复合物的功能 | 第16-18页 |
| ·Elp3 亚基及其的第二结构域 | 第18-21页 |
| ·Elongator 复合物与疾病 | 第21-23页 |
| ·蛋白质之间相互作用研究方法概述 | 第23-26页 |
| ·CTK1 的功能研究 | 第26-29页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第29-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-54页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·主要试剂及常用溶液配方 | 第32-37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-54页 |
| ·基因的扩增 | 第37-38页 |
| ·PCR 产物的检测 | 第38页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第38页 |
| ·真核穿梭载体的构建 | 第38-44页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第44-47页 |
| ·“诱饵”和“猎物”融合质粒的自激活测定 | 第47-49页 |
| ·诱饵蛋白在酵母中的毒性作用检测 | 第49页 |
| ·酵母双杂交验证蛋白间的相互作用 | 第49页 |
| ·原核表达载体转化入BL21（DE3） | 第49-50页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| ·SDS-PAGE 分析表达产物 | 第50页 |
| ·检测“诱饵”和“猎物”是否是可溶性蛋白 | 第50-51页 |
| ·pull down 验证yElp3 与CTK1，hELP4，yELP4 的互作关系 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE 和western-blot 检测pull down 结果 | 第52-54页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第54-68页 |
| ·yElp3、y3D 与CTK1、yElp4、hELP4 相互作用的酵母双杂交分析 | 第54-59页 |
| ·AD、BD 融合质粒的构建 | 第54-58页 |
| ·AD、BD 融合质粒的自激活检测 | 第58页 |
| ·诱饵质粒的毒性作用检测 | 第58-59页 |
| ·AD 融合质粒与BD 共转化株的MEL1 表达检测 | 第59页 |
| ·GST 融合的yElp3，y3D 与CTK1、hElp4、yElp4 相互作用的GST pull down 验证 | 第59-68页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·诱饵和猎物蛋白的诱导与SDS-PAGE 检测 | 第61-63页 |
| ·诱饵、猎物蛋白的可溶性检测结果 | 第63-64页 |
| ·yElp3、y3D 与CTK1、hElp4、yElp4 的pull down 检测结果 | 第64-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-74页 |
| ·酵母双杂交假阳性的控制 | 第68页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第68-69页 |
| ·蛋白诱导表达条件优化 | 第69-70页 |
| ·Pull down 验证蛋白互作与问题解决 | 第70页 |
| ·Elp3 第二结构域的功能地位 | 第70-74页 |
| 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第86-87页 |
