摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-53页 |
第一节 慢病毒概况 | 第13-18页 |
·慢病毒的分类学地位 | 第13-14页 |
·慢病毒家族 | 第14页 |
·慢病毒致病性 | 第14-16页 |
·慢病毒分子生物学 | 第16-18页 |
第二节 牛免疫缺陷病毒 | 第18-28页 |
·BIV简介及研究意义 | 第18-19页 |
·BIV编码的蛋白及其功能 | 第19-21页 |
·BIV病毒颗粒 | 第21-22页 |
·BIV转录水平的调节 | 第22-24页 |
·BIV转录本的生成 | 第24页 |
·翻译后的调节 | 第24-26页 |
·BIV生活周期 | 第26-28页 |
第三节 微管 | 第28-41页 |
·细胞骨架概述 | 第28-29页 |
·微管的结构 | 第29-30页 |
·微管组织中心 | 第30-31页 |
·微管的极性 | 第31-32页 |
·微管动力学 | 第32-34页 |
·微管相关蛋白 | 第34-35页 |
·微管马达蛋白 | 第35-39页 |
·病毒与微管的相互作用 | 第39-41页 |
第四节 病毒的运输 | 第41-50页 |
·病毒运输概述 | 第41-42页 |
·牛痘病毒 | 第42-43页 |
·腺病毒Ⅱ型 | 第43页 |
·单纯疱疹病毒Ⅰ型 | 第43-45页 |
·人泡沫病毒 | 第45-46页 |
·HIV-1 | 第46-50页 |
第五节 本研究的前期基础 | 第50-51页 |
第六节 本研究的目的和意义 | 第51-53页 |
第二章 材料与方法 | 第53-74页 |
第一节 实验材料 | 第53-58页 |
·细胞 | 第53页 |
·菌株 | 第53-54页 |
·质粒 | 第54-57页 |
·主要试剂 | 第57-58页 |
第二节 实验方法 | 第58-74页 |
·基因操作 | 第58-61页 |
·蛋白的表达与纯化 | 第61-62页 |
·抗体制备和效价检测 | 第62-63页 |
·细胞相关试验 | 第63-64页 |
·病毒相关试验 | 第64-65页 |
·蛋白检测 | 第65-67页 |
·蛋白相互作用检测 | 第67-69页 |
·RNA干扰试验(RNAi) | 第69-71页 |
·感染细胞中微管组分的制备 | 第71页 |
·透射电镜(TEM) | 第71-73页 |
·统计学分析 | 第73-74页 |
第三章 结果与分析 | 第74-108页 |
第一节 微管对BIV的感染具有重要作用 | 第74-80页 |
·BIV指示细胞系的工作原理 | 第74-75页 |
·BIV完成生活周期需要微管的参与 | 第75-77页 |
·BIV感染的早期事件需要微管的参与 | 第77-79页 |
·微管药物对BIV指示细胞系无影响 | 第79-80页 |
第二节 BIV对微管动力学的调节 | 第80-82页 |
·BIV感染保护微管不被解聚 | 第80-81页 |
·BIV促进微管的稳定性 | 第81-82页 |
第三节 BIV反向运输依赖于微管 | 第82-86页 |
·BIV感染早期病毒颗粒的亚细胞定位 | 第82-83页 |
·BIV的反向运输需要微管参与 | 第83-86页 |
·微管是BIV反向运输的通道 | 第86页 |
第四节 BIV反向运输依赖于DYNEIN | 第86-89页 |
·BIV的感染需要dynein的功能 | 第86-88页 |
·BIV的反向运输是由dynein介导的 | 第88-89页 |
第五节 BIV CA与DYNEIN轻链亚基LC8存在相互作用 | 第89-95页 |
·筛选病毒蛋白与dynein亚基的相互作用 | 第89-91页 |
·CA与LC8在体内、体外和病毒感染中都存在相互作用 | 第91-94页 |
·CA蛋白中LC8结合区域的界定 | 第94-95页 |
第六节 LC8是介导BIV反向运输的关键 | 第95-101页 |
·BIV的感染不能缺少LC8 | 第95-97页 |
·BIV的反向运输需要LC8 | 第97-98页 |
·LC8是连接病毒颗粒与微管和dynein的纽带 | 第98-101页 |
第七节 病毒早期运输受阻会推迟病毒复制 | 第101-104页 |
·微管药物可以使病毒复制推迟 | 第101-102页 |
·LC8基因沉默使病毒复制严重推迟 | 第102-104页 |
第八节 CA过剩可以抑制BIV的感染性 | 第104-108页 |
·寻找抗病毒的病毒蛋白 | 第104-105页 |
·CA不影响病毒的转录 | 第105-106页 |
·CA对病毒的抑制可能与LC8有关 | 第106-108页 |
第四章 讨论 | 第108-116页 |
第一节 BIV感染早期事件揭秘 | 第108-109页 |
第二节 BIV反向运输的独特性 | 第109-112页 |
·BIV感染早期对微管依赖性更强 | 第109页 |
·BIV微管运输的效率不如HIV-1 | 第109-110页 |
·BIV对微管具有独特的调节作用 | 第110-111页 |
·不依赖于微管的病毒运输 | 第111-112页 |
第三节 病毒蛋白与马达蛋白的相互作用 | 第112-114页 |
·dynein是病毒反向运输的通用马达 | 第112页 |
·病毒货物的多样性 | 第112-113页 |
·结合LC8是偶然还是必然 | 第113-114页 |
第四节 "以毒攻毒"的策略 | 第114-116页 |
第五章 结论与展望 | 第116-119页 |
第一节 结论 | 第116-118页 |
第二节 展望 | 第118-119页 |
参考文献 | 第119-134页 |
致谢 | 第134-136页 |
附录A:个人履历 | 第136-137页 |
附录B:在学期间完成论文 | 第137-139页 |
附录C:英文缩写 | 第139-140页 |