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牛免疫缺陷病毒微管依赖性运输的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-53页
 第一节 慢病毒概况第13-18页
     ·慢病毒的分类学地位第13-14页
     ·慢病毒家族第14页
     ·慢病毒致病性第14-16页
     ·慢病毒分子生物学第16-18页
 第二节 牛免疫缺陷病毒第18-28页
     ·BIV简介及研究意义第18-19页
     ·BIV编码的蛋白及其功能第19-21页
     ·BIV病毒颗粒第21-22页
     ·BIV转录水平的调节第22-24页
     ·BIV转录本的生成第24页
     ·翻译后的调节第24-26页
     ·BIV生活周期第26-28页
 第三节 微管第28-41页
     ·细胞骨架概述第28-29页
     ·微管的结构第29-30页
     ·微管组织中心第30-31页
     ·微管的极性第31-32页
     ·微管动力学第32-34页
     ·微管相关蛋白第34-35页
     ·微管马达蛋白第35-39页
     ·病毒与微管的相互作用第39-41页
 第四节 病毒的运输第41-50页
     ·病毒运输概述第41-42页
     ·牛痘病毒第42-43页
     ·腺病毒Ⅱ型第43页
     ·单纯疱疹病毒Ⅰ型第43-45页
     ·人泡沫病毒第45-46页
     ·HIV-1第46-50页
 第五节 本研究的前期基础第50-51页
 第六节 本研究的目的和意义第51-53页
第二章 材料与方法第53-74页
 第一节 实验材料第53-58页
     ·细胞第53页
     ·菌株第53-54页
     ·质粒第54-57页
     ·主要试剂第57-58页
 第二节 实验方法第58-74页
     ·基因操作第58-61页
     ·蛋白的表达与纯化第61-62页
     ·抗体制备和效价检测第62-63页
     ·细胞相关试验第63-64页
     ·病毒相关试验第64-65页
     ·蛋白检测第65-67页
     ·蛋白相互作用检测第67-69页
     ·RNA干扰试验(RNAi)第69-71页
     ·感染细胞中微管组分的制备第71页
     ·透射电镜(TEM)第71-73页
     ·统计学分析第73-74页
第三章 结果与分析第74-108页
 第一节 微管对BIV的感染具有重要作用第74-80页
     ·BIV指示细胞系的工作原理第74-75页
     ·BIV完成生活周期需要微管的参与第75-77页
     ·BIV感染的早期事件需要微管的参与第77-79页
     ·微管药物对BIV指示细胞系无影响第79-80页
 第二节 BIV对微管动力学的调节第80-82页
     ·BIV感染保护微管不被解聚第80-81页
     ·BIV促进微管的稳定性第81-82页
 第三节 BIV反向运输依赖于微管第82-86页
     ·BIV感染早期病毒颗粒的亚细胞定位第82-83页
     ·BIV的反向运输需要微管参与第83-86页
     ·微管是BIV反向运输的通道第86页
 第四节 BIV反向运输依赖于DYNEIN第86-89页
     ·BIV的感染需要dynein的功能第86-88页
     ·BIV的反向运输是由dynein介导的第88-89页
 第五节 BIV CA与DYNEIN轻链亚基LC8存在相互作用第89-95页
     ·筛选病毒蛋白与dynein亚基的相互作用第89-91页
     ·CA与LC8在体内、体外和病毒感染中都存在相互作用第91-94页
     ·CA蛋白中LC8结合区域的界定第94-95页
 第六节 LC8是介导BIV反向运输的关键第95-101页
     ·BIV的感染不能缺少LC8第95-97页
     ·BIV的反向运输需要LC8第97-98页
     ·LC8是连接病毒颗粒与微管和dynein的纽带第98-101页
 第七节 病毒早期运输受阻会推迟病毒复制第101-104页
     ·微管药物可以使病毒复制推迟第101-102页
     ·LC8基因沉默使病毒复制严重推迟第102-104页
 第八节 CA过剩可以抑制BIV的感染性第104-108页
     ·寻找抗病毒的病毒蛋白第104-105页
     ·CA不影响病毒的转录第105-106页
     ·CA对病毒的抑制可能与LC8有关第106-108页
第四章 讨论第108-116页
 第一节 BIV感染早期事件揭秘第108-109页
 第二节 BIV反向运输的独特性第109-112页
     ·BIV感染早期对微管依赖性更强第109页
     ·BIV微管运输的效率不如HIV-1第109-110页
     ·BIV对微管具有独特的调节作用第110-111页
     ·不依赖于微管的病毒运输第111-112页
 第三节 病毒蛋白与马达蛋白的相互作用第112-114页
     ·dynein是病毒反向运输的通用马达第112页
     ·病毒货物的多样性第112-113页
     ·结合LC8是偶然还是必然第113-114页
 第四节 "以毒攻毒"的策略第114-116页
第五章 结论与展望第116-119页
 第一节 结论第116-118页
 第二节 展望第118-119页
参考文献第119-134页
致谢第134-136页
附录A:个人履历第136-137页
附录B:在学期间完成论文第137-139页
附录C:英文缩写第139-140页

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