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基于构象转换和聚合酶反应的核酸适配体传感分析方法及应用研究

摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第1章 绪论第14-34页
   ·核酸适配体及指数级富集系统进化技术概述第14-17页
     ·SELEX 技术的基本原理与技术流程第14-15页
     ·核酸适配体的空间结构及其与靶分子的结合方式第15-16页
     ·核酸适配体用于构建生物传感体系的优点第16-17页
   ·核酸适配体在生物分析方面的应用第17-29页
     ·荧光适配体传感探针第17-22页
     ·比色适配体传感探针第22-23页
     ·表面增强拉曼散射适配体传感器第23-24页
     ·电化学适配体传感器第24-28页
     ·压电适配体传感器第28-29页
   ·核酸适配体在提高灵敏度方面的研究第29-33页
     ·基于聚合酶的扩增放大作用第29-31页
     ·基于核酸酶切作用第31-32页
     ·基于标记纳米粒子的信号增强第32-33页
   ·本论文的研究构想第33-34页
第2章 荧光适配体传感探针用于链置换放大检测可卡因第34-45页
   ·引言第34-35页
   ·实验部分第35-36页
     ·试剂第35页
     ·传感过程第35-36页
     ·凝胶电泳第36页
     ·荧光测定第36页
   ·结果与讨论第36-44页
     ·适配体传感探针的设计第36-37页
     ·结合可卡因后的信号放大第37-38页
     ·电泳现象描述第38-39页
     ·探针优化第39页
     ·引物优化第39-40页
     ·复制反应时间对检测探针的影响第40-42页
     ·适配体传感探针分析性能第42页
     ·适配体传感探针的选择性第42-43页
     ·适配体传感探针检测真实样品中的可卡因第43-44页
   ·小结第44-45页
第3章 基于聚合酶延长反应的电化学适配体传感器检测可卡因第45-54页
   ·引言第45-46页
   ·实验部分第46-47页
     ·探针及试剂.第46-47页
     ·标记二茂铁.第47页
     ·实验方法.第47页
   ·结果与讨论第47-53页
     ·实验设计第47-48页
     ·传感器表征第48-49页
     ·优化长链探针第49-50页
     ·优化聚合酶反应时间第50-51页
     ·适配体传感器的分析性能第51-52页
     ·适配体传感器的选择性第52-53页
   ·小结第53-54页
第4章 使用核酸双链嵌入剂的荧光适配体传感探针检测腺苷第54-61页
   ·引言第54-55页
   ·实验部分第55-56页
     ·实验试剂和仪器第55页
     ·实验方法.第55-56页
   ·结果与讨论第56-60页
     ·适配体传感探针的设计原理第56页
     ·适配体结合腺苷引起体系荧光改变第56-57页
     ·优化核酸序列第57-58页
     ·优化适配体浓度及比例第58-59页
     ·适配体传感探针分析性能第59页
     ·适配体传感探针的选择性考察第59-60页
   ·小结第60-61页
第5章 基于DNA 核酸适配体的新型荧光增强方法检测免疫球蛋白 E第61-69页
   ·引言第61-62页
   ·实验部分第62-63页
   ·结果与讨论第63-68页
     ·实验原理第63页
     ·结合IgE 致荧光增强.第63-65页
     ·目标检测的实验条件优化第65-66页
     ·核酸适配体体系的分析性能第66-67页
     ·IgE 检测的特异性和回收率第67-68页
   ·小结第68-69页
第6章 基于竞争结合机理的核酸适配体荧光传感探针检测人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶第69-77页
   ·引言第69-70页
   ·实验部分第70-71页
     ·原料与试剂.第70页
     ·荧光测定第70-71页
   ·结果与讨论第71-76页
     ·实验原理第71页
     ·结合HNE 后体系荧光增强现象第71-72页
     ·实验条件优化第72-74页
     ·基于核酸适配体传感探针的分析性能第74-75页
     ·HNE 荧光传感探针的特异性第75-76页
   ·小结第76-77页
第7章 金电极上金团生物催化沉积构建适配体电化学检测界面第77-87页
   ·引言第77-78页
   ·材料与方法第78-79页
     ·试剂第78页
     ·合成金纳米粒子第78页
     ·表面增强生物催化沉积以及传感器制备第78-79页
     ·电化学检测第79页
     ·表面增强共振拉曼(SERRS)检测第79页
   ·结果与讨论第79-86页
     ·实验原理第80页
     ·扫描电子显微镜(SEM)分析第80-81页
     ·传感器制备第81-82页
     ·表面增强共振拉曼散射(SERRS)分析第82-83页
     ·优化生物催化沉积时间第83-84页
     ·适配体传感器的分析性能第84页
     ·腺苷适配体传感器的选择性第84-85页
     ·应用适配体传感器检测尿液样品中的腺苷第85-86页
   ·小结第86-87页
结论第87-88页
参考文献第88-107页
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录第107-108页
致谢第108页

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