| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| 1.1 循环排列 | 第8-9页 |
| 1.2 铜蛋白简介 | 第9页 |
| 1.3 铜蛋白的分类 | 第9-10页 |
| 1.3.1 Ⅰ型铜蛋白 | 第9-10页 |
| 1.3.2 Ⅱ型铜蛋白 | 第10页 |
| 1.3.3 Ⅲ型铜蛋白 | 第10页 |
| 1.4 铜蛋白的作用 | 第10-15页 |
| 1.4.1 电子传递 | 第11-12页 |
| 1.4.2 氧的输送 | 第12-13页 |
| 1.4.3 氧化还原 | 第13-15页 |
| 1.4.4 加氧反应 | 第15页 |
| 1.5 铜蓝蛋白 | 第15-17页 |
| 1.5.1 铜蓝蛋白结构 | 第15-17页 |
| 1.5.2 铜蓝蛋白研究 | 第17页 |
| 1.6 铜元素与健康 | 第17-20页 |
| 1.6.1 铜的生理功能 | 第17-18页 |
| 1.6.2 铜与疾病的关系 | 第18-19页 |
| 1.6.3 铜中毒 | 第19-20页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器和设备 | 第23-24页 |
| 2.1.4 常用溶液及培养基 | 第24-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 感受态的制备 | 第26页 |
| 2.2.2 质粒DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.3 通过循环排列设计蛋白 | 第27-28页 |
| 2.4 蛋白表达纯化 | 第28-33页 |
| 2.4.1 质粒扩增 | 第28-29页 |
| 2.4.2 质粒转化 | 第29页 |
| 2.4.3 蛋白表达 | 第29页 |
| 2.4.4 蛋白纯化 | 第29-33页 |
| 2.5 蛋白性质表征 | 第33-42页 |
| 2.5.1 蛋白谱学性质研究 | 第33-36页 |
| 2.5.2 蛋白晶体学研究 | 第36-38页 |
| 2.5.3 蛋白电化学研究 | 第38-42页 |
| 3 结果与讨论 | 第42-62页 |
| 3.1 cpAz3生物学信息 | 第42-43页 |
| 3.1.1 cpAz3氨基端序列 | 第42-43页 |
| 3.1.2 cpAz3质粒扩增 | 第43页 |
| 3.2 蛋白表达 | 第43-44页 |
| 3.3 蛋白纯化 | 第44-51页 |
| 3.3.1 强阳离子交换柱纯化 | 第44-46页 |
| 3.3.2 HiTrap Q HP离子交换柱纯化 | 第46-49页 |
| 3.3.3 Superdex 75凝胶过滤层析纯化 | 第49-51页 |
| 3.4 蛋白性质的表征 | 第51-59页 |
| 3.4.1 蛋白光谱性质研究 | 第51-53页 |
| 3.4.2 蛋白结晶及结构解析 | 第53-58页 |
| 3.4.3 循环伏安法测电势 | 第58-59页 |
| 3.5 讨论 | 第59-62页 |
| 4 结论 | 第62-64页 |
| 4.1 论文总结 | 第62页 |
| 4.2 论文创新点 | 第62-63页 |
| 4.3 论文不足之处 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-74页 |
| 7 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第74-75页 |
| 8 致谢 | 第75页 |