摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第14-22页 |
1.1 微孢子虫研究背景及意义 | 第14-15页 |
1.1.1 研究背景 | 第14页 |
1.1.2 研究意义 | 第14-15页 |
1.2 微孢子虫研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 微孢子虫形态结构和生活史 | 第15-16页 |
1.2.2 微孢子虫孢子发芽及侵染模式 | 第16-18页 |
1.3 水通道蛋白研究进展 | 第18-19页 |
1.3.1 水通道蛋白的发现与分类 | 第18页 |
1.3.2 家蚕微孢子虫水通道蛋白的结构及生物学功能 | 第18-19页 |
1.4 非洲爪蟾卵母细胞在通道类蛋白研究中的应用 | 第19页 |
1.5 研究内容 | 第19-22页 |
第2章 家蚕微孢子虫水通道蛋白NbAQP的渗透水功能研究 | 第22-42页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 材料与主要试剂 | 第22-24页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第22页 |
2.2.2 伦理学证明 | 第22页 |
2.2.3 主要实验仪器和设备 | 第22-23页 |
2.2.4 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
2.3 实验方法 | 第24-32页 |
2.3.1 家蚕微孢子虫NbAQP系统发育分析 | 第24-25页 |
2.3.2 非洲爪蟾卵母细胞的制备 | 第25-26页 |
2.3.3 家蚕微孢子虫纯化 | 第26页 |
2.3.4 家蚕微孢子虫基因组DNA提取 | 第26-27页 |
2.3.5 间接免疫荧光实验 | 第27-28页 |
2.3.6 家蚕微孢子虫水通道蛋白NbAQP基因的PCR扩增 | 第28-29页 |
2.3.7 构建重组质粒PMD-19T-NbAQP和PMD-19T-EGFP | 第29-30页 |
2.3.8 重组表达载体的构建和体外转录 | 第30-31页 |
2.3.9 cRNA显微注射非洲爪蟾卵母细胞 | 第31-32页 |
2.3.10 数据分析 | 第32页 |
2.4 结果与分析 | 第32-40页 |
2.4.1 家蚕微孢子虫NbAQP系统发育分析 | 第32-33页 |
2.4.2 间接免疫荧光结果 | 第33-35页 |
2.4.3 重组表达载体的构建和体外转录 | 第35-38页 |
2.4.4 NbAQP水通道功能鉴定 | 第38-40页 |
2.5 讨论 | 第40-42页 |
第3章 家蚕微孢子虫水通道蛋白NPA基序的功能特征研究 | 第42-68页 |
3.1 前言 | 第42页 |
3.2 材料与主要试剂 | 第42-43页 |
3.2.1 材料和试剂 | 第42页 |
3.2.2 主要实验仪器和设备 | 第42页 |
3.2.3 主要试剂及配制 | 第42-43页 |
3.3 实验方法 | 第43-50页 |
3.3.1 NbAQP突变体NbAQP_NPAs的克隆 | 第43-45页 |
3.3.2 重组转移载体的构建与鉴定 | 第45-46页 |
3.3.3 家蚕杆状病毒重组病毒质粒的构建及鉴定 | 第46页 |
3.3.4 转染家蚕BmN细胞 | 第46-47页 |
3.3.5 重组蛋白在BmN细胞中的表达及鉴定 | 第47-48页 |
3.3.6 NbAQP_NPAs在家蚕BmN细胞中的定位 | 第48-49页 |
3.3.7 NbAQP_NPAs水通道蛋白功能 | 第49-50页 |
3.3.8 数据分析 | 第50页 |
3.4 结果与分析 | 第50-65页 |
3.4.1 突变体NbAQP_NPAs的克隆 | 第50-52页 |
3.4.2 重组转移载体的构建与鉴定 | 第52-54页 |
3.4.3 家蚕杆状病毒重组病毒质粒的构建及鉴定 | 第54页 |
3.4.4 NbAQP_NPAs融合蛋白在家蚕BmN细胞中的表达 | 第54-58页 |
3.4.5 突变体NbAQP_NPAs在家蚕BmN细胞中的定位 | 第58-60页 |
3.4.6 NbAQP_NPAs水通道蛋白功能 | 第60-65页 |
3.5 讨论 | 第65-68页 |
结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
附录 | 第76-80页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |