| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第16-40页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 黑腹果蝇及其生物学研究价值 | 第16-21页 |
| 1.2.1 模式生物—黑腹果蝇 | 第16-18页 |
| 1.2.2 强大的遗传学可操作性 | 第18-20页 |
| 1.2.3 利用黑腹果蝇研究人类疾病的发病病理 | 第20-21页 |
| 1.3 果蝇肠道免疫研究进展 | 第21-38页 |
| 1.3.1 果蝇肠道的基本结构 | 第22-26页 |
| 1.3.1.1 果蝇肠道各区域主要功能 | 第22-23页 |
| 1.3.1.2 果蝇肠道组织学特点 | 第23-25页 |
| 1.3.1.3 果蝇肠道干细胞的发现 | 第25-26页 |
| 1.3.2 果蝇肠道活性氧自由基的产生 | 第26-28页 |
| 1.3.2.1 ROS简介 | 第26页 |
| 1.3.2.2 ROS在果蝇肠道中的功能 | 第26页 |
| 1.3.2.3 控制果蝇肠道ROS产生的信号转导通路 | 第26-28页 |
| 1.3.3 抗菌肽分泌—果蝇肠道次级防御体系 | 第28-31页 |
| 1.3.3.1 AMPs简介 | 第28-29页 |
| 1.3.3.2 果蝇体内AMPs的产生 | 第29-30页 |
| 1.3.3.3 果蝇肠道抗菌肽表达机制 | 第30-31页 |
| 1.3.4 果蝇肠道干细胞的增殖 | 第31-35页 |
| 1.3.4.1 维持果蝇肠道干细胞属性的机制 | 第31页 |
| 1.3.4.2 果蝇中肠干细胞增殖机制 | 第31-35页 |
| 1.3.4.2.1 果蝇中肠干细胞的不对称分裂 | 第31-32页 |
| 1.3.4.2.2 果蝇中肠干细胞的增殖 | 第32-35页 |
| 1.3.4.3 果蝇肠道其它类型干细胞的增殖 | 第35页 |
| 1.3.5 果蝇中肠干细胞分化机制 | 第35-36页 |
| 1.3.5.1 影响果蝇中肠干细胞分化因素 | 第35-36页 |
| 1.3.5.2 果蝇中肠干细胞分化机制 | 第36页 |
| 1.3.6 果蝇肠道共生菌对干细胞增殖与分化的影响 | 第36-38页 |
| 1.4 锌指蛋白及果蝇CG12744基因的研究现状 | 第38-39页 |
| 1.4.1 锌指蛋白简介 | 第38页 |
| 1.4.2 果蝇CG12744基因研究进展 | 第38-39页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 2 CG12744基因在果蝇肠道免疫中的功能研究 | 第40-107页 |
| 2.1 材料方法 | 第40-52页 |
| 2.1.1 果蝇品系 | 第40-41页 |
| 2.1.2 实验室果蝇培养 | 第41页 |
| 2.1.3 实验菌株 | 第41页 |
| 2.1.4 Ecc15感染果蝇肠道时间点设定 | 第41-42页 |
| 2.1.5 肠道研究区域 | 第42页 |
| 2.1.6 果蝇培养基配制 | 第42-43页 |
| 2.1.6.1 配制过程 | 第42-43页 |
| 2.1.6.2 配制过程中的注意事项 | 第43页 |
| 2.1.7 果蝇杂交策略以及果蝇饲养 | 第43-45页 |
| 2.1.7.1 一步杂交实验 | 第43-44页 |
| 2.1.7.2 纯合体品系获得 | 第44-45页 |
| 2.1.7.3 果蝇的饲养 | 第45页 |
| 2.1.8 肠道免疫研究中的主要试剂 | 第45-46页 |
| 2.1.9 主要实验仪器 | 第46-47页 |
| 2.1.10 果蝇基因组DNA提取 | 第47页 |
| 2.1.11 RT-PCR | 第47-48页 |
| 2.1.12 病原体Ecc15的培养 | 第48-49页 |
| 2.1.13 配制特定浓度的Ecc15 | 第49页 |
| 2.1.14 病原体感染条件下的生存率实验 | 第49页 |
| 2.1.15 果蝇肠道常规免疫染色方法 | 第49-50页 |
| 2.1.16 Delta蛋白质染色 | 第50页 |
| 2.1.17 osa蛋白质染色 | 第50页 |
| 2.1.18 cut蛋白质染色 | 第50-51页 |
| 2.1.19 TUNEL染色 | 第51页 |
| 2.1.20 DHE染色 | 第51页 |
| 2.1.21 BrdU染色 | 第51-52页 |
| 2.1.22 统计学分析 | 第52页 |
| 2.2 技术路线 | 第52-53页 |
| 2.3 结果与分析 | 第53-107页 |
| 2.3.1 CG12744突变体果蝇检测与验证 | 第53-54页 |
| 2.3.2 突变体果蝇生存率分析 | 第54-56页 |
| 2.3.2.1 正常条件下CG12744突变体果蝇生存率分析 | 第54-55页 |
| 2.3.2.2 病原体感染条件下CG12744突变体果蝇生存率分析 | 第55页 |
| 2.3.2.3 讨论 | 第55-56页 |
| 2.3.2.4 小结 | 第56页 |
| 2.3.3 喂食Ecc15后CG12744突变体果蝇肠道内稳态分析 | 第56-74页 |
| 2.3.3.1 无感染条件下CG12744突变体果蝇前体细胞数量分析 | 第56-57页 |
| 2.3.3.2 病原体感染后CG12744突变体果蝇前体细胞数量分析 | 第57-59页 |
| 2.3.3.3 CCR区域前体细胞数量分析 | 第59-61页 |
| 2.3.3.4 病原体感染后CG12744突变体果蝇肠道长度分析 | 第61-62页 |
| 2.3.3.5 病原体感染后CG12744突变体果蝇肠道干细胞(ISC)数量分析 | 第62-64页 |
| 2.3.3.6 病原体感染后CG12744突变体果蝇EB细胞数量分析 | 第64-65页 |
| 2.3.3.7 病原体感染后CG12744突变体果蝇EC细胞分化分析 | 第65-67页 |
| 2.3.3.8 病原体感染后CG12744突变体果蝇EC细胞数量分析 | 第67-69页 |
| 2.3.3.9 CG12744基因前体细胞表达控制osa基因在EC细胞中的表达量 | 第69-71页 |
| 2.3.3.10 CG12744基因前体细胞表达控制肠道JNK活性 | 第71-72页 |
| 2.3.3.11 讨论 | 第72-73页 |
| 2.3.3.12 小结 | 第73-74页 |
| 2.3.4 病原体感染条件下CG12744控制肠内分泌细胞(EEs)分化 | 第74-77页 |
| 2.3.4.1 Ecc15感染后CG12744基因全身低表达引起EE分化活性增强 | 第74-76页 |
| 2.3.4.2 Ecc15感染后CG12744基因中肠低表达引起EE分化活性增强 | 第76-77页 |
| 2.3.4.3 讨论 | 第77页 |
| 2.3.4.4 小结 | 第77页 |
| 2.3.5 病原体感染条件下CG12744基因在EB细胞内表达影响EE分化 | 第77-92页 |
| 2.3.5.1 CG12744基因在EC细胞内表达对EE分化无影响 | 第78页 |
| 2.3.5.2 CG12744基因在EE内表达对EE分化无影响 | 第78-79页 |
| 2.3.5.3 CG12744基因在前体细胞内表达控制EE分化活性 | 第79-80页 |
| 2.3.5.4 CG12744基因在干细胞内表达对EE分化活性无影响 | 第80-83页 |
| 2.3.5.4.1 CG12744基因在干细胞内低表达后EE分化活性分析 | 第80-81页 |
| 2.3.5.4.2 CG12744基因在干细胞内低表达后PH3与prospero阳性细胞共定位分析 | 第81-83页 |
| 2.3.5.5 CG12744基因在EB细胞内表达控制EE分化活性 | 第83-85页 |
| 2.3.5.6 CG12744基因与Notch信号无直接关系 | 第85-86页 |
| 2.3.5.7 突变体果蝇EE分化活性增强引起TK水平升高以及肠道脂肪合成的改变 | 第86-87页 |
| 2.3.5.8 突变体果蝇肠道内其它分泌肽水平分析 | 第87-88页 |
| 2.3.5.9 CG12744低表达引起独立的EE数量增多 | 第88-90页 |
| 2.3.5.10 Ecc15感染16h引起野生型果蝇肠道EE分化方式改变,而EE数量无显著差异 | 第90-91页 |
| 2.3.5.11 讨论 | 第91-92页 |
| 2.3.5.12 小结 | 第92页 |
| 2.3.6 感染条件下肠道形态学分析 | 第92-94页 |
| 2.3.6.1 感染条件下CG12744基因控制肠道形态学发生 | 第92-93页 |
| 2.3.6.2 讨论 | 第93-94页 |
| 2.3.6.3 小结 | 第94页 |
| 2.3.7 CG12744基因在EC细胞内表达控制形态学发生 | 第94-104页 |
| 2.3.7.1 CG12744基因在前体细胞内表达对肠道形态无影响 | 第94-98页 |
| 2.3.7.1.1 CG12744基因在前体细胞内低表达对果蝇肠道细胞形态和排列无影响 | 第94-95页 |
| 2.3.7.1.2 CG12744基因在ISC或EB内低表达对果蝇肠道细胞形态和排列无影响 | 第95-98页 |
| 2.3.7.2 CG12744基因在EC细胞内表达影响肠道形态学发生 | 第98-103页 |
| 2.3.7.3 讨论 | 第103-104页 |
| 2.3.7.4 小结 | 第104页 |
| 2.3.8 感染条件下CG12744基因在EE低表达引起干细胞增殖活性升高 | 第104-105页 |
| 2.3.9 感染条件下CG12744基因影响铜细胞分化 | 第105页 |
| 2.3.10 氧化压力条件下CG12744基因影响肠道DNA合成水平 | 第105-106页 |
| 2.3.11 感染条件下CG12744控制活性氧自由基水平 | 第106-107页 |
| 结论 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-123页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
| 附件 | 第126-128页 |
