| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 肝癌的危害及治疗方法 | 第14-18页 |
| 1.2.1 肝癌的危害及发病危险因素 | 第14-15页 |
| 1.2.2 肝癌的筛查方法 | 第15页 |
| 1.2.3 肝癌的治疗方法 | 第15-18页 |
| 1.2.3.1 肝切除术 | 第16页 |
| 1.2.3.2 肝移植术 | 第16-17页 |
| 1.2.3.3 局部消融术 | 第17页 |
| 1.2.3.4 介入术 | 第17-18页 |
| 1.2.3.5 药物治疗 | 第18页 |
| 1.3 细胞凋亡途径及PARP与肿瘤 | 第18-20页 |
| 1.3.1 线粒体凋亡途径 | 第19页 |
| 1.3.2 死亡受体途径 | 第19页 |
| 1.3.3 B粒酶介导的凋亡途径及内质网凋亡途径 | 第19-20页 |
| 1.3.4 PARP与凋亡 | 第20页 |
| 1.4 细胞周期与肿瘤 | 第20-22页 |
| 1.4.1 细胞周期 | 第20-21页 |
| 1.4.2 细胞周期的调控 | 第21页 |
| 1.4.3 Aurora激酶与细胞周期 | 第21-22页 |
| 1.5 Reversine研究背景 | 第22-24页 |
| 1.5.1 Reversine的结构与来源 | 第22-23页 |
| 1.5.2 Reversine与肿瘤 | 第23-24页 |
| 1.5.2.1 Reversine与Aurora激酶及细胞周期 | 第23-24页 |
| 1.5.2.2 Reversine与细胞凋亡 | 第24页 |
| 1.6 本课题的研究意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第26页 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第26-28页 |
| 2.1.2.1 细胞培养及功能试验相关试剂及耗材 | 第26-27页 |
| 2.1.2.2 免疫印迹及免疫荧光相关试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 仪器 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-36页 |
| 2.2.1 特定浓度Reversine的制备与储存 | 第29页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第29-31页 |
| 2.2.2.1 细胞复苏 | 第29页 |
| 2.2.2.2 细胞换液 | 第29-30页 |
| 2.2.2.3 细胞传代 | 第30页 |
| 2.2.2.4 细胞冻存 | 第30-31页 |
| 2.2.2.5 细胞加药 | 第31页 |
| 2.2.3 MTS法检测reversine对细胞增殖的影响 | 第31-32页 |
| 2.2.4 细胞克隆形成实验 | 第32页 |
| 2.2.5 细胞核染色 | 第32-33页 |
| 2.2.6 用流式细胞仪测定细胞DNA含量 | 第33-34页 |
| 2.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第34页 |
| 2.2.8 用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot) | 第34-36页 |
| 2.2.8.1 细胞蛋白质提取 | 第35页 |
| 2.2.8.2 BCA法蛋白定量 | 第35页 |
| 2.2.8.3 Western Blot免疫印迹方法检测蛋白表达水平 | 第35-36页 |
| 2.3 统计学分析 | 第36-37页 |
| 第三章 实验结果 | 第37-46页 |
| 3.1 Reversine对人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用 | 第37-38页 |
| 3.2 Reversine可以抑制人肝癌细胞HepG2的克隆形成能力 | 第38-39页 |
| 3.3 Reversine干扰人肝癌细胞HepG2的细胞周期,诱发细胞多倍体形成 | 第39-42页 |
| 3.4 Reversine可诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡 | 第42-44页 |
| 3.5 Reversine诱导HepG2发生凋亡是通过线粒体依赖的内源性凋亡途径 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-49页 |
| 第五章 结论 | 第49-50页 |
| 附录 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
