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炎性小体NLRP6调控P53抑制结直肠癌的机制研究

中文摘要第4-5页
英文摘要第5-12页
第一章 前言第12-23页
    1.1 流行病学第12页
    1.2 先天免疫模式识别受体第12-14页
    1.3 炎性小体NLRP3第14-17页
    1.4 炎性小体NLRP6及其相关研究第17-18页
    1.5 P53分子及其相关研究第18-21页
        1.5.1 P53分子概述第18-19页
        1.5.2 P53在细胞周期中作用第19-20页
        1.5.3 P53在细胞凋亡中作用第20-21页
        1.5.4 P53在细胞自噬中作用第21页
    1.6 小结第21-23页
第二章 实验材料与方法第23-46页
    2.1 主要实验材料第23-28页
        2.1.1 细胞株来源第23页
        2.1.2 质粒来源第23页
        2.1.3 实验仪器第23页
        2.1.4 实验试剂耗材第23-25页
        2.1.5 实验主要抗体第25-26页
        2.1.6 实验试剂配制第26-28页
        2.1.7 PCR引物第28页
    2.2 细胞培养第28-30页
        2.2.1 细胞复苏第28-29页
        2.2.2 细胞传代第29页
        2.2.3 细胞冻存第29-30页
    2.3 慢病毒包装相关实验第30-36页
        2.3.1 感受态细胞的制备第30页
        2.3.2 质粒转化第30-31页
        2.3.3 质粒小量提取第31-32页
        2.3.4 质粒中量提取第32-33页
        2.3.5 琼脂糖凝胶电泳第33页
        2.3.6 DNA片段的胶回收第33-34页
        2.3.7 DNA连接实验第34页
        2.3.8 PEI质粒转染第34-35页
        2.3.9 Lipofectamine细胞转染第35页
        2.3.10 慢病毒感染细胞预实验第35-36页
        2.3.11 嘌呤霉素适合浓度测定第36页
        2.3.12 慢病毒感染正式实验第36页
    2.4 基因水平实验第36-39页
        2.4.1 细胞RNA的提取第36-37页
        2.4.2 RNA样本浓度与纯度测算第37页
        2.4.3 逆转录第37-38页
        2.4.4 Real-Time PCR第38-39页
    2.5 蛋白水平相关实验第39-42页
        2.5.1 提取细胞蛋白第39-40页
        2.5.2 BCA法测定蛋白浓度第40页
        2.5.3 Western-blot实验操作第40-42页
    2.6 细胞相关实验第42-45页
        2.6.1 细胞增殖检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)第42页
        2.6.2 Transwell实验第42-43页
        2.6.3 细胞免疫荧光第43-44页
        2.6.4 流式细胞术-细胞凋亡测定第44-45页
    2.7 小鼠相关实验第45页
    2.8 统计分析方法第45-46页
第三章 实验结果与分析第46-57页
    3.1 慢病毒感染结直肠癌细胞第46-47页
    3.2 Real-Time PCR检测基因水平表达情况第47-48页
    3.3 Western Blot检测蛋白水平表达情况第48-50页
    3.4 细胞的增殖检测实验第50-51页
    3.5 Transwell实验第51-53页
    3.6 流式细胞术检测结直肠癌凋亡第53-54页
    3.7 细胞免疫荧光实验第54页
    3.8 裸鼠体内成瘤实验第54-57页
第四章 讨论与展望第57-59页
第五章 结论第59-60页
参考文献第60-76页
英文缩写表第76-80页
致谢第80-81页
科研成果第81页

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