| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第15-27页 |
| 1. 核受体和NuR77 | 第15-18页 |
| 1.1 核激素受体 | 第15页 |
| 1.2 孤儿核受体Nur77 | 第15-18页 |
| 1.2.1 Nur77的结构和表达分布 | 第15-16页 |
| 1.2.2 Nur77作为良好的药物靶点 | 第16-17页 |
| 1.2.3 Nur77的非基因型功能 | 第17-18页 |
| 2. 分化抑制蛋白家族和分化抑制蛋白-1 | 第18-21页 |
| 2.1 分化抑制蛋白家族概述 | 第18-19页 |
| 2.2 分化抑制蛋白-1 | 第19-20页 |
| 2.3 分化抑制蛋白-1的泛素化降解 | 第20-21页 |
| 3. 雷公藤红素 | 第21-27页 |
| 3.1 雷公藤概况 | 第21-23页 |
| 3.1.1 雷公藤简介和应用 | 第21-22页 |
| 3.1.2 雷公藤红素的结构和疾病治疗 | 第22-23页 |
| 3.2 雷公藤红素药物靶点的研究 | 第23-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| 1. 材料 | 第27-29页 |
| 1.1 细胞株 | 第27页 |
| 1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 1.3 主要仪器 | 第28-29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-42页 |
| 2.1 细胞的培养和冻存 | 第29-30页 |
| 2.1.1 细胞传代 | 第29页 |
| 2.1.2 细胞冻存 | 第29-30页 |
| 2.1.3 细胞复苏 | 第30页 |
| 2.2 质粒构建 | 第30-32页 |
| 2.1.1 Myc-ID1质粒构建 | 第30-32页 |
| 2.3 细胞脂质体转染 | 第32-33页 |
| 2.4 Western blot | 第33-34页 |
| 2.5 免疫共沉淀 | 第34-35页 |
| 2.6 泛素化实验 | 第35-36页 |
| 2.7 RT-PCR | 第36-38页 |
| 2.8 免疫组化 | 第38-40页 |
| 2.9 稳转细胞库构建 | 第40-42页 |
| 第三章 结果 | 第42-63页 |
| 1. NUR77下调ID1蛋白在结肠癌细胞中的表达 | 第42-45页 |
| 1.1 CRISPR/Cas9质粒PX330/PX335-ID1的构建 | 第42页 |
| 1.2 结肠癌细胞稳定敲除细胞库筛选及细胞表型变化及相关蛋白检测 | 第42-43页 |
| 1.3 Nur77的表达与ID1表达呈负相关性 | 第43-45页 |
| 2. NUR77调控ID1蛋白稳定性 | 第45-52页 |
| 2.1 结肠癌组织中ID1的表达明显高于癌旁组织 | 第45-46页 |
| 2.2 Nur77调控ID1蛋白表达不依赖转录活性 | 第46-49页 |
| 2.3 Nur77影响ID1的生物半衰期 | 第49-52页 |
| 3. NUR77通过蛋白酶体途径诱导ID1蛋白降解 | 第52-53页 |
| 4. NUR77诱导ID1蛋白降解机制 | 第53-58页 |
| 4.1 Nur77与ID1相互作用 | 第53-54页 |
| 4.2 Nur77促进ID1与Smurf2相互作用 | 第54-55页 |
| 4.3 ID1与Smurf2相互作用部分依赖Nr77 | 第55-56页 |
| 4.4 Nur77可以增强ID1的泛素化降解 | 第56-57页 |
| 4.5 ID1的泛素化部分依赖Nur77 | 第57-58页 |
| 5. 靶向NUR77的化合物雷公藤红素诱导ID1的降解 | 第58-61页 |
| 5.1 化合物雷公藤红素诱导ID1降解 | 第58-59页 |
| 5.2 雷公藤红素靶向Nur77促进ID1和Smruf2相互作用,从而增强ID1的泛素化降解 | 第59-61页 |
| 6. NUR77对肿瘤的形态和定位的影响 | 第61-63页 |
| 第四章 讨论和结论 | 第63-68页 |
| 1. 讨论 | 第63-67页 |
| 1.1 NUR77蛋白水平调控分化抑制因子-1的表达 | 第63-64页 |
| 1.2 NUR77增强SMURF2介导的分化抑制因子-1的泛素化降解 | 第64-65页 |
| 1.3 雷公藤红素诱导分化抑制因子-1蛋白酶体降解依赖NUR77 | 第65-66页 |
| 1.4 NUR77调控分化抑制因子-1蛋白表达的生物学功能 | 第66-67页 |
| 2. 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
