缩略语索引 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
前言 | 第14-25页 |
1 模式识别受体MR是DCs交叉提呈的关键受体 | 第15-18页 |
2 内体是MR介导DCs交叉提呈抗原的关键器室 | 第18-19页 |
3 泛素化是DCs抗原交叉提呈的关键要素 | 第19-21页 |
4 p97在泛素化调控DCs交叉提呈中的作用 | 第21-22页 |
5 Sec61的内体转位是DCs交叉提呈的重要因素 | 第22-25页 |
实验材料与方法 | 第25-40页 |
1 实验材料 | 第25-32页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 细胞培养相关器皿 | 第25页 |
1.3 主要试剂 | 第25-31页 |
1.3.1 细胞培养相关试剂 | 第25-26页 |
1.3.2 Western Blot相关试剂 | 第26-30页 |
1.3.3 激光共聚焦相关试剂 | 第30-31页 |
1.3.4 试剂盒 | 第31页 |
1.4 主要仪器 | 第31-32页 |
2 实验方法 | 第32-40页 |
2.1 树突状细胞(DCs)的诱导与预处理 | 第32-34页 |
2.1.1 DCs的诱导 | 第32-33页 |
2.1.2 DCs的预处理 | 第33-34页 |
2.2 Western Blot | 第34-36页 |
2.2.1 蛋白的提取 | 第34-35页 |
2.2.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第35-36页 |
2.3 激光共聚焦 | 第36-37页 |
2.4 Ubiquitin siRNA干扰实验 | 第37页 |
2.5 免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP) | 第37-38页 |
2.6 γ-干扰素酶联免疫斑点试验检测抗原特异性CTL诱生 | 第38-39页 |
2.7 统计方法 | 第39-40页 |
实验结果 | 第40-54页 |
1 乙酰胆碱N型受体激动剂尼古丁经上调DCs表面甘露糖受体(MR)表达而增强DCs对抗原的吞噬 | 第40-41页 |
2 乙酰胆碱N型受体激动剂尼古丁调控DCs泛素化水平 | 第41-42页 |
3 泛素化在乙酰胆碱N型受体调控DCs交叉提呈中发挥重要作用 | 第42-43页 |
4 乙酰胆碱N型受体主要调控MR的K48多聚泛素化 | 第43-45页 |
5 K48泛素突变链可有效调控MR的K48多聚泛素化水平 | 第45-46页 |
6 尼古丁经K48多泛素化MR增加抗原内体转位 | 第46-48页 |
7 尼古丁对内体招募p97的增强作用依赖于MR K48多聚泛素化 | 第48-49页 |
8 尼古丁对内体招募Sec61的增强作用依赖于MR K48多聚泛素化 | 第49-50页 |
9 K48多泛素化MR促进乙酰胆碱N型受体增强DCs交叉提呈 | 第50-52页 |
10 K48多泛素化MR促进乙酰胆碱受体所增强的DCs交叉致敏 | 第52-54页 |
讨论 | 第54-58页 |
1 尼古丁调控甘露糖受体K48多聚泛素化的机制 | 第54-55页 |
2 泛素化所致p97/Sec61内体招募的机制 | 第55-56页 |
3 K48多聚泛素化MR招募p97至内体促进尼古丁增强DCs交叉提呈的其它可能机制 | 第56-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
致谢 | 第67-68页 |