| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 巴西橡胶树概述 | 第11页 |
| 1.2 巴西橡胶组织培养研究状况 | 第11-13页 |
| 1.2.1 外植体培养 | 第11-12页 |
| 1.2.2 悬浮细胞培养 | 第12页 |
| 1.2.3 影响巴西橡胶组织培养的因素 | 第12-13页 |
| 1.3 花药愈伤组织低温保存的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.1 橡胶花药愈伤低温保存必要性 | 第13页 |
| 1.3.2 低温保存方式 | 第13-14页 |
| 1.4 巴西橡胶树遗传转化研究进展 | 第14-17页 |
| 1.4.1 巴西橡胶树遗传转化技术 | 第14页 |
| 1.4.2 巴西橡胶树遗传转化受体系统研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4.3 影响巴西橡胶树遗传转化的因素 | 第15-16页 |
| 1.4.4 巴西橡胶树功能基因转化研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4.5 CERK1基因及转基因研究进展 | 第17页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 1.6 本研究技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.5 培养基 | 第20-21页 |
| 2.1.6 引物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1 外植体的处理 | 第21页 |
| 2.2.2 培养基各成分母液的配制 | 第21-23页 |
| 2.2.3 遗传转化受体材料的优化 | 第23-25页 |
| 2.2.4 橡胶树胚性愈伤组织的低温保存 | 第25-26页 |
| 2.2.5 橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 | 第26-27页 |
| 2.2.6 胚性愈伤转化GUS、GFP基因及检测 | 第27-28页 |
| 2.2.7 橡胶树花药愈伤组织转化HbCERK1基因及再生植株的分子检测 | 第28-31页 |
| 2.2.8 抗性植株叶片RNA提取及Q-PCR | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-60页 |
| 3.1 橡胶树花药愈伤组织再生体系的优化 | 第33-41页 |
| 3.1.1 巴西橡胶树花粉发育时期与雄花蕾外观形态的对应关系 | 第33-34页 |
| 3.1.2 不同花粉发育时期对花药脱分化愈伤组织诱导的影响 | 第34-36页 |
| 3.1.3 花药外植体不同接种方式对易碎爽脆型愈伤组织诱导的影响 | 第36-37页 |
| 3.1.4 花药外植体不同接种方式对易碎爽脆型愈伤组织细胞活力的影响 | 第37-38页 |
| 3.1.5 花药胚性愈伤组织的诱导和甄别 | 第38-39页 |
| 3.1.6 花药愈伤组织的体细胞胚分化和成熟萌发 | 第39-40页 |
| 3.1.7 花药愈伤组织再生植株的移栽 | 第40-41页 |
| 3.2 橡胶树花药愈伤组织转化受体的优化和保存 | 第41-49页 |
| 3.2.1 花药胚性愈伤组织的增殖 | 第41-42页 |
| 3.2.2 体胚哺育增殖的胚性愈伤组织的分化、体细胞胚成熟和植株再生 | 第42-43页 |
| 3.2.3 外源抗氧化剂对低温冷藏橡胶树花药胚性愈伤组织的影响 | 第43-49页 |
| 3.3 建立和优化橡胶树花药体细胞胚胚性愈伤组织遗传转化体系 | 第49-54页 |
| 3.3.1 胚性愈伤组织筛选剂浓度的确定 | 第49-50页 |
| 3.3.2 花药体胚看护哺育胚性愈伤组织遗传转化体系条件探讨 | 第50-53页 |
| 3.3.3 体细胞胚愈伤组织转GUS基因组织化学染色检测 | 第53-54页 |
| 3.3.4 体细胞胚看护花药愈伤组织转GFP基因荧光检测 | 第54页 |
| 3.4 橡胶树HbCERK1基因转化植株形成及鉴定 | 第54-60页 |
| 3.4.1 转橡胶树HbCERK1基因抗性愈伤组织的产生 | 第54-55页 |
| 3.4.2 抗性愈伤组织的增殖和分化及抗性植株的产生 | 第55-56页 |
| 3.4.3 抗性愈伤组织及转化植株叶片的PCR鉴定 | 第56-57页 |
| 3.4.4 抗性植株western blot检测 | 第57-58页 |
| 3.4.5 抗性植株RNA的提取 | 第58-59页 |
| 3.4.6 抗性植株转录水平检测 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-65页 |
| 4.1 橡胶花药胚性愈伤组织受体材料的优化 | 第60-63页 |
| 4.1.1 橡胶花药胚性愈伤组织的优化 | 第60-61页 |
| 4.1.2 橡胶树花药胚性愈伤组织的低温保存 | 第61-63页 |
| 4.2 橡胶树遗传转化体系的建立及优化 | 第63-64页 |
| 4.3 转橡胶树HbCERK1基因抗性植株的形成及检测 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 缩略词 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 攻读硕士期间科研成果简介 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
