| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 英文缩略词索引 | 第6-11页 |
| 绪论 | 第11-15页 |
| 参考文献 | 第13-15页 |
| 第一部分 高通量筛选差异表达的NR_040245 | 第15-32页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-23页 |
| 2.1 材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 实验用细胞株 | 第15-16页 |
| 2.1.2 实验用主要试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验用主要仪器 | 第17页 |
| 2.1.4 常用试剂配制 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2 构建肺纤维化细胞模型 | 第19-20页 |
| 2.2.3 细胞RNA提取 | 第20页 |
| 2.2.4 TEM观察 | 第20-21页 |
| 2.2.5 Western blot免疫印迹分析 | 第21-22页 |
| 2.2.6 基因芯片检测 | 第22-23页 |
| 2.2.7 生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.2.8 qRT PCR检测 | 第23页 |
| 2.3 统计学分析 | 第23页 |
| 3 结果 | 第23-29页 |
| 3.1 鉴定肺纤维化细胞模型 | 第23-25页 |
| 3.2 lncRNA、mRNA存在差异表达谱 | 第25-26页 |
| 3.3 mRNA GO分析和KEGG信号通路分析 | 第26-27页 |
| 3.4 NR_040245是与其他纤维化分子共表达关系最强的lncRNA | 第27-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二部分 NR_040245在肺纤维化中的作用 | 第32-56页 |
| 1 前言 | 第32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-43页 |
| 2.1 材料 | 第32-35页 |
| 2.1.1 实验用细胞株 | 第32页 |
| 2.1.2 临床人体血液样本 | 第32-33页 |
| 2.1.3 实验用主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 常用仪器 | 第34页 |
| 2.1.5 常用试剂配制 | 第34-35页 |
| 2.2 方法 | 第35-43页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第35页 |
| 2.2.2 建立肺纤维化细胞模型 | 第35-36页 |
| 2.2.3 临床血液样本RNA提取 | 第36页 |
| 2.2.4 IncRNA smart silence转染 | 第36页 |
| 2.2.5 IncRNA逆转录 | 第36-37页 |
| 2.2.6 qRT-PCR检测 | 第37页 |
| 2.2.7 细胞免疫荧光 | 第37-38页 |
| 2.2.8 Western blot免疫印迹分析 | 第38页 |
| 2.2.9 制备感受态大肠杆菌 | 第38页 |
| 2.2.10 质粒转化 | 第38-39页 |
| 2.2.11 质粒提取 | 第39-40页 |
| 2.2.12 琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 2.2.13 质粒转染 | 第41页 |
| 2.2.14 RTCA实时无标记细胞增殖分析 | 第41-42页 |
| 2.2.15 RTCA实时无标记细胞迁移分析 | 第42页 |
| 2.2.16 筛选上游信号通路 | 第42-43页 |
| 2.3 统计学分析 | 第43页 |
| 3 结果 | 第43-52页 |
| 3.1 NR_040245在肺纤维化中高表达 | 第43-45页 |
| 3.2 NR_040245全长序列 | 第45-47页 |
| 3.3 NR_040245影响肺纤维化相关蛋白的表达 | 第47-50页 |
| 3.4 NR_040245促进肺纤维化细胞增殖和迁移 | 第50-51页 |
| 3.5 NR_040245在肺纤维化中的高表达受TGF-β1Smad2/3依赖和非依赖ERK/MAPK通路的调控 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三部分 NR_040245在肺纤维化发生中的作用机制 | 第56-70页 |
| 1 前言 | 第56页 |
| 2 材料与方法 | 第56-61页 |
| 2.1 材料 | 第56-57页 |
| 2.1.1 实验用细胞 | 第56页 |
| 2.1.2 实验用主要试剂 | 第56-57页 |
| 2.1.3 实验用主要仪器 | 第57页 |
| 2.1.4 常用试剂配制 | 第57页 |
| 2.2 方法 | 第57-61页 |
| 2.2.1 原位杂交 | 第57-59页 |
| 2.2.2 核质分离 | 第59页 |
| 2.2.3 Passway报告分析 | 第59-60页 |
| 2.2.4 RNA pull-down | 第60-61页 |
| 2.3 统计学分析 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-66页 |
| 3.1 NR_040245定位于细胞核和细胞质 | 第61-62页 |
| 3.2 NR_040245可以与HuR蛋白结合 | 第62-63页 |
| 3.3 NR_040245可以调节EEZH2/STAT1自噬信号通路 | 第63-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 总论 | 第70-71页 |
| 综述:肺纤维化生物标志物的研究进展 | 第71-83页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 硕士就读期间发表的文章及参与课题 | 第84页 |
