| 摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 昆虫的抗寒机制 | 第11-17页 |
| 1.1 昆虫抗寒等级分类 | 第11-12页 |
| 1.2 昆虫抗寒性的测定 | 第12-14页 |
| 1.3 昆虫抗寒生理机制 | 第14-15页 |
| 1.4 昆虫抗寒相关蛋白的积累 | 第15-17页 |
| 2 昆虫抗冻蛋白研究进展 | 第17-22页 |
| 2.1 抗冻蛋白的发现与命名 | 第17页 |
| 2.2 昆虫抗冻蛋白结构 | 第17-18页 |
| 2.3 抗冻蛋白的热滞活性 | 第18-19页 |
| 2.4 昆虫抗冻蛋白作用机制 | 第19-20页 |
| 2.5 昆虫抗冻蛋白的应用 | 第20-22页 |
| 2.6 昆虫抗冻蛋白的探寻方法 | 第22页 |
| 3 蜜蜂抗寒机制研究现状 | 第22-24页 |
| 4 技术路线 | 第24页 |
| 5 目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 中蜂个体低温胁迫后转录组测序分析与验证 | 第26-44页 |
| 1 材料与方法 | 第26-29页 |
| 1.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 1.2 试验方法 | 第27-29页 |
| 1.3 统计分析 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-38页 |
| 2.1 中蜂低温处理前后表型的差异 | 第29-31页 |
| 2.2 测序数据与参考基因组比对结果 | 第31页 |
| 2.3 差异表达基因分析 | 第31-36页 |
| 2.4 差异表达基因的GO分析 | 第36-37页 |
| 2.5 差异表达基因的KEGG分析 | 第37页 |
| 2.6 qRT-PCR验证 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-43页 |
| 3.1 关于RNA-seq在昆虫抗寒性中的研究 | 第38页 |
| 3.2 关于差异表达基因的KEGG分析 | 第38-39页 |
| 3.3 关于差异表达基因的GO分析 | 第39-41页 |
| 3.4 关于抗寒相关候选基因研究 | 第41-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 中蜂和意蜂抗寒性以及低温胁迫后体内几种生理指标变化的研究 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 1.1 供试蜜蜂 | 第44-45页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第45页 |
| 1.3 蜜蜂血淋巴完全结冰温度的测定 | 第45页 |
| 1.4 蜜蜂体内葡萄糖含量的测定 | 第45-46页 |
| 1.5 蜜蜂体内甘油含量的测定 | 第46页 |
| 1.6 蜜蜂体内氨基酸含量的测定 | 第46-47页 |
| 1.7 数据统计分析 | 第47页 |
| 2 试验结果 | 第47-51页 |
| 2.1 蜜蜂血淋巴完全结冰温度的测定 | 第47页 |
| 2.2 低温胁迫下蜜蜂体内葡萄糖含量的变化 | 第47-48页 |
| 2.3 低温胁迫下蜜蜂体内甘油含量的变化 | 第48-49页 |
| 2.4 低温胁迫下蜜蜂体内水解氨基酸含量的变化 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| 3.1 关于中蜂和意蜂抗寒能力的差异 | 第51页 |
| 3.2 关于蜜蜂抗寒生理机制的假设 | 第51页 |
| 3.3 关于低温处理对蜜蜂体内葡萄糖含量的影响 | 第51-52页 |
| 3.4 关于低温处理对蜜蜂体内甘油含量的影响 | 第52页 |
| 3.5 关于低温处理对蜜蜂体内氨基酸含量的影响 | 第52-53页 |
| 4 小结 | 第53-54页 |
| 第四章、中蜂和意蜂抗冻蛋白基因的差异表达研究 | 第54-74页 |
| 1 材料与方法 | 第54-59页 |
| 1.1 试验材料 | 第54-55页 |
| 1.2 试验方法与操作技术 | 第55-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-70页 |
| 2.1 中蜂和意蜂抗冻蛋白基因克隆与比对 | 第59-61页 |
| 2.2 中蜂和意蜂AFP生物信息学分析 | 第61-66页 |
| 2.3 中蜂和意蜂抗冻蛋白基因表达调控序列预测 | 第66-67页 |
| 2.4 中蜂和意蜂抗冻蛋白基因的表达特性研究 | 第67-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| 3.1 关于基因和氨基酸序列的生物信息学分析 | 第70-71页 |
| 3.2 关于AFP表达特性的研究 | 第71-73页 |
| 4 小结 | 第73-74页 |
| 第五章 中蜂和意蜂抗冻蛋白基因功能初探 | 第74-99页 |
| 1 材料与方法 | 第74-81页 |
| 1.1 供试蜜蜂 | 第74-75页 |
| 1.2 主要试剂与仪器 | 第75-76页 |
| 1.3 试验方法 | 第76-81页 |
| 1.4 数据处理 | 第81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-95页 |
| 2.1 中蜂和意蜂AFP在低温下的表达研究 | 第81-84页 |
| 2.2 AFP低温下的表达量与多种抗寒物质浓度间的关联分析 | 第84-87页 |
| 2.3 蜜蜂抗冻蛋白的RNA干扰试验 | 第87-92页 |
| 2.4 AcerAFP生理功能初探 | 第92-95页 |
| 3 讨论 | 第95-98页 |
| 3.1 关于中蜂和意蜂AFP低温诱导表达 | 第95-96页 |
| 3.2 关于AFP浓度与小分子抗冻保护剂的关联分析 | 第96页 |
| 3.3 关于饲喂dsRNA进行的蜜蜂体内RNA干扰 | 第96-97页 |
| 3.4 关于AFP沉默前后其他抗冻候选基因的表达 | 第97页 |
| 3.5 关于中蜂抗冻蛋白原核表达 | 第97-98页 |
| 3.6 关于中蜂抗冻蛋白抗冻生理机制 | 第98页 |
| 4 小结 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-111页 |
| 全文结论 | 第111-112页 |
| 创新和特色 | 第112-113页 |
| Abstract | 第113-115页 |
| 附录一 | 第117-129页 |
| 附录二 意大利蜜蜂28个抗寒相关蛋白基因荧光定量PCR引物 | 第129-131页 |
| 攻读博士期间发表论文情况 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
