| 中文摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 绪论 | 第10-29页 |
| 1.1 燃料乙醇的研究背景及意义 | 第10-11页 |
| 1.2 木质纤维素生产燃料乙醇 | 第11-13页 |
| 1.2.1 木质纤维素的组成 | 第12-13页 |
| 1.2.2 木质纤维素的水解 | 第13页 |
| 1.3 自然界中能利用木糖的微生物 | 第13-18页 |
| 1.3.1 木糖代谢途径 | 第14-15页 |
| 1.3.2 能利用木糖的微生物 | 第15页 |
| 1.3.3 理想的利用木质纤维素的微生物 | 第15-18页 |
| 1.4 原生质体融合技术构建发酵木糖产乙醇的酿酒酵母工程菌 | 第18-19页 |
| 1.5 Genome shuffling在酿酒酵母中的应用 | 第19-26页 |
| 1.5.1 Genome shuffling的原理及技术方法 | 第19-21页 |
| 1.5.2 Genome shuffling的特点 | 第21-22页 |
| 1.5.3 Genome shuffling育种优势的实例验证 | 第22-23页 |
| 1.5.4 Genome shuffling用于酿酒酵母中乙醇含量的提高 | 第23页 |
| 1.5.5 Genome shuffling用于酿酒酵母中提高对周围环境耐受性的增强 | 第23-24页 |
| 1.5.6 Genome shuffling的难点及展望 | 第24-26页 |
| 1.6 本论文的研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 1.7 本课题基金项目 | 第27页 |
| 1.8 本课题的主要研究路线 | 第27-29页 |
| 第2章 材料与方法 | 第29-48页 |
| 2.1 试验材料 | 第29-34页 |
| 2.1.1 菌株 | 第29页 |
| 2.1.2 PCR扩增引物 | 第29页 |
| 2.1.3 主要培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要药品及试剂配制方法 | 第30-33页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.2 试验方法 | 第34-48页 |
| 2.2.1 原始菌株的活化及保藏 | 第34-35页 |
| 2.2.2 原始菌株生长曲线的测定 | 第35页 |
| 2.2.3 原生质体制备及再生 | 第35-37页 |
| 2.2.4 原生质体灭活 | 第37-38页 |
| 2.2.5 原生质体融合 | 第38-39页 |
| 2.2.6 Genome shuffling | 第39-40页 |
| 2.2.7 非Genome shuffling对照试验 | 第40页 |
| 2.2.8 重组子的筛选 | 第40-41页 |
| 2.2.9 重组子的鉴定 | 第41-45页 |
| 2.2.10 重组子的遗传稳定性 | 第45页 |
| 2.2.11 重组子摇瓶发酵性能的研究 | 第45-46页 |
| 2.2.12 重组子发酵罐发酵性能的研究 | 第46-47页 |
| 2.2.13 数据处理 | 第47-48页 |
| 第3章 结果与分析 | 第48-81页 |
| 3.1 W5原生质体制备及再生结果 | 第48-55页 |
| 3.1.1 菌龄对原生质体制备率及再生率的影响 | 第48-49页 |
| 3.1.2 脱壁预处理时间对原生质体制备率与再生率的影响 | 第49-50页 |
| 3.1.3 蜗牛酶浓度及酶解时间对原生质体制备率及再生率的影响 | 第50-52页 |
| 3.1.4 酶解时温育方式对原生质体制备率及再生率的影响 | 第52-53页 |
| 3.1.5 酶解温度对原生质体制备率及再生率的影响 | 第53-54页 |
| 3.1.6 酶解pH对原生质体制备率及再生率的影响 | 第54页 |
| 3.1.7 渗透压稳定剂的种类对原生质体再生率的影响 | 第54-55页 |
| 3.2 原生质体灭活 | 第55-57页 |
| 3.2.1 YX-3原生质体热灭活 | 第55-56页 |
| 3.2.2 LX-4原生质体紫外线灭活 | 第56页 |
| 3.2.3 CXS-5原生质体紫外线+LiCl灭活 | 第56-57页 |
| 3.3 原生质体融合 | 第57-58页 |
| 3.3.1 融合条件的正交试验 | 第57-58页 |
| 3.3.2 融合条件的验证试验 | 第58页 |
| 3.4 Genome shuffling | 第58-68页 |
| 3.4.1 出发菌株的获得 | 第58页 |
| 3.4.2 重组子的筛选 | 第58-63页 |
| 3.4.3 重组子的鉴定 | 第63-68页 |
| 3.5 非Genome shuffling对照试验 | 第68-69页 |
| 3.6 重组子的遗传稳定性试验 | 第69页 |
| 3.7 重组子摇瓶发酵性能的研究 | 第69-77页 |
| 3.7.1 混合糖比例对重组子发酵的影响 | 第69-71页 |
| 3.7.2 转速对重组子发酵的影响 | 第71-74页 |
| 3.7.3 装液量对重组子发酵的影响 | 第74-77页 |
| 3.8 重组子发酵罐性能的研究 | 第77-81页 |
| 第4章 讨论 | 第81-91页 |
| 4.1 影响原生质体制备及再生的因素 | 第81-82页 |
| 4.2 原生质体灭活方法的选择 | 第82-84页 |
| 4.3 酶活的测定 | 第84-85页 |
| 4.4 摇瓶内溶氧水平对重组子发酵的影响 | 第85-88页 |
| 4.5 影响重组子在发酵罐中发酵的因素 | 第88页 |
| 4.6 重组酵母菌株的木糖代谢性能评价与分析 | 第88-89页 |
| 4.7 后续工作设想 | 第89-91页 |
| 第5章 结论 | 第91-92页 |
| 本文创新点 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第106-107页 |
