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用Genome shuffling筛选利用木糖葡萄糖高产乙醇的酿酒酵母

中文摘要第2-4页
Abstract第4-5页
第1章 绪论第10-29页
    1.1 燃料乙醇的研究背景及意义第10-11页
    1.2 木质纤维素生产燃料乙醇第11-13页
        1.2.1 木质纤维素的组成第12-13页
        1.2.2 木质纤维素的水解第13页
    1.3 自然界中能利用木糖的微生物第13-18页
        1.3.1 木糖代谢途径第14-15页
        1.3.2 能利用木糖的微生物第15页
        1.3.3 理想的利用木质纤维素的微生物第15-18页
    1.4 原生质体融合技术构建发酵木糖产乙醇的酿酒酵母工程菌第18-19页
    1.5 Genome shuffling在酿酒酵母中的应用第19-26页
        1.5.1 Genome shuffling的原理及技术方法第19-21页
        1.5.2 Genome shuffling的特点第21-22页
        1.5.3 Genome shuffling育种优势的实例验证第22-23页
        1.5.4 Genome shuffling用于酿酒酵母中乙醇含量的提高第23页
        1.5.5 Genome shuffling用于酿酒酵母中提高对周围环境耐受性的增强第23-24页
        1.5.6 Genome shuffling的难点及展望第24-26页
    1.6 本论文的研究目的及意义第26-27页
    1.7 本课题基金项目第27页
    1.8 本课题的主要研究路线第27-29页
第2章 材料与方法第29-48页
    2.1 试验材料第29-34页
        2.1.1 菌株第29页
        2.1.2 PCR扩增引物第29页
        2.1.3 主要培养基第29-30页
        2.1.4 主要药品及试剂配制方法第30-33页
        2.1.5 主要仪器设备第33-34页
    2.2 试验方法第34-48页
        2.2.1 原始菌株的活化及保藏第34-35页
        2.2.2 原始菌株生长曲线的测定第35页
        2.2.3 原生质体制备及再生第35-37页
        2.2.4 原生质体灭活第37-38页
        2.2.5 原生质体融合第38-39页
        2.2.6 Genome shuffling第39-40页
        2.2.7 非Genome shuffling对照试验第40页
        2.2.8 重组子的筛选第40-41页
        2.2.9 重组子的鉴定第41-45页
        2.2.10 重组子的遗传稳定性第45页
        2.2.11 重组子摇瓶发酵性能的研究第45-46页
        2.2.12 重组子发酵罐发酵性能的研究第46-47页
        2.2.13 数据处理第47-48页
第3章 结果与分析第48-81页
    3.1 W5原生质体制备及再生结果第48-55页
        3.1.1 菌龄对原生质体制备率及再生率的影响第48-49页
        3.1.2 脱壁预处理时间对原生质体制备率与再生率的影响第49-50页
        3.1.3 蜗牛酶浓度及酶解时间对原生质体制备率及再生率的影响第50-52页
        3.1.4 酶解时温育方式对原生质体制备率及再生率的影响第52-53页
        3.1.5 酶解温度对原生质体制备率及再生率的影响第53-54页
        3.1.6 酶解pH对原生质体制备率及再生率的影响第54页
        3.1.7 渗透压稳定剂的种类对原生质体再生率的影响第54-55页
    3.2 原生质体灭活第55-57页
        3.2.1 YX-3原生质体热灭活第55-56页
        3.2.2 LX-4原生质体紫外线灭活第56页
        3.2.3 CXS-5原生质体紫外线+LiCl灭活第56-57页
    3.3 原生质体融合第57-58页
        3.3.1 融合条件的正交试验第57-58页
        3.3.2 融合条件的验证试验第58页
    3.4 Genome shuffling第58-68页
        3.4.1 出发菌株的获得第58页
        3.4.2 重组子的筛选第58-63页
        3.4.3 重组子的鉴定第63-68页
    3.5 非Genome shuffling对照试验第68-69页
    3.6 重组子的遗传稳定性试验第69页
    3.7 重组子摇瓶发酵性能的研究第69-77页
        3.7.1 混合糖比例对重组子发酵的影响第69-71页
        3.7.2 转速对重组子发酵的影响第71-74页
        3.7.3 装液量对重组子发酵的影响第74-77页
    3.8 重组子发酵罐性能的研究第77-81页
第4章 讨论第81-91页
    4.1 影响原生质体制备及再生的因素第81-82页
    4.2 原生质体灭活方法的选择第82-84页
    4.3 酶活的测定第84-85页
    4.4 摇瓶内溶氧水平对重组子发酵的影响第85-88页
    4.5 影响重组子在发酵罐中发酵的因素第88页
    4.6 重组酵母菌株的木糖代谢性能评价与分析第88-89页
    4.7 后续工作设想第89-91页
第5章 结论第91-92页
本文创新点第92-93页
参考文献第93-104页
致谢第104-106页
攻读硕士期间发表的文章第106-107页

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