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红肉与白肉火龙果果实发育的色素比较与差异表达基因研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 前言第11-19页
    1.1 火龙果的研究现状第11-14页
        1.1.1 火龙果的概况第11页
        1.1.2 火龙果栽培技术与品种资源的研究进展第11-12页
        1.1.3 火龙果的果实成分与营养保健的相关研究进展第12-13页
        1.1.4 火龙果色素相关研究进展第13-14页
    1.2 植物果实颜色的研究进展第14-15页
        1.2.1 植物果实颜色的生理生化研究进展第14页
        1.2.2 植物果实颜色遗传与基因克隆研究进展第14-15页
        1.2.3 植物果实色素的组学研究进展第15页
    1.3 转录组学的研究进展第15-17页
        1.3.1 生物信息学的产生和发展第15-16页
        1.3.2 生物信息学的研究内容和基本方法第16页
        1.3.3 转录组测序技术(RNA-Seq)第16-17页
        1.3.4 无参数字基因表达谱技术(DGE)第17页
    1.4 荧光定量技术(qRT-PCR)第17页
    1.5 本研究的目的意义、内容与技术路线第17-19页
        1.5.1 本研究的目的意义和内容第17-18页
        1.5.2 本研究技术路线第18-19页
2 材料与方法第19-36页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 遗传材料和菌株第19页
        2.1.2 主要仪器设备第19-20页
        2.1.3 主要生化试剂第20-21页
    2.2 火龙果的果实相关生理指标测定第21-24页
        2.2.1 果肉组织细胞观察第21页
        2.2.2 甜菜色素提取与测定第21页
        2.2.3 花青素提取与测定第21页
        2.2.4 类黄酮提取与测定第21-22页
        2.2.5 总酚提取与测定第22页
        2.2.6 类胡萝卜素提取与测定第22页
        2.2.7 抗坏血酸提取与测定第22-23页
        2.2.8 可溶性糖提取与测定第23-24页
        2.2.9 可溶性蛋白提取与测定第24页
    2.3 火龙果的转录组测序和生物信息分析第24-26页
        2.3.1 火龙果的转录组测序第24-26页
        2.3.2 测序数据质量评估分析第26页
        2.3.3 基因差异表达分析第26页
        2.3.4 GO功能显著性富集分析第26页
        2.3.5 Pathway显著性富集分析第26页
    2.4 火龙果的果实总RNA提取与检测第26-27页
        2.4.1 火龙果果实总RNA提取的器具准备第26-27页
        2.4.2 火龙果总RNA提取步骤第27页
        2.4.3 火龙果总RNA的质量检测第27页
    2.5 实时荧光定量PCR第27-30页
        2.5.1 qPCR引物设计第27-28页
        2.5.2 qRT-PCR验证基因表达情况第28-30页
    2.6 色素代谢相关基因的组织特异性分析第30-31页
        2.6.1 目的基因的筛选第30页
        2.6.2 RT-PCR验证基因组织特异性第30-31页
    2.7 U31379M2基因的克隆与生物信息分析第31-36页
        2.7.1 U31379M2基因的PCR扩增和切胶回收第31-32页
        2.7.2 T载体的连接反应第32-33页
        2.7.3 重组载体的遗传转化第33页
        2.7.4 阳性克隆鉴定第33页
        2.7.5 U31379M2的质粒DNA提取及鉴定第33-35页
        2.7.6 U31379M2基因的生物信息学预测分析第35-36页
3 结果与分析第36-71页
    3.1 火龙果果实形态和生理指标分析第36-39页
        3.1.1 果实形态学比较分析第36-37页
        3.1.2 果实生理指标比较分析第37-39页
    3.2 火龙果果实转录组Denove组装结果分析第39-47页
        3.2.1 转录组组装结果第39-40页
        3.2.2 组装质量分析第40-44页
        3.2.3 Unigenes在四大数据库的注释及分析第44-47页
    3.3 火龙果果实无参数字基因表达谱测序结果第47-56页
        3.3.1 火龙果果肉RNA-seq测序表达谱情况第47-48页
        3.3.2 红肉火龙果不同时期差异表达基因分析第48-51页
        3.3.3 白肉火龙果不同时期差异表达基因分析第51页
        3.3.4 红肉和白肉火龙果在绿熟期差异表达基因分析第51-52页
        3.3.5 红肉和白肉火龙果在成熟期差异表达基因分析第52-55页
        3.3.6 样品间特有表达基因分析第55-56页
    3.4 火龙果根茎花果总RNA的检测结果第56页
    3.5 火龙果果实色素代谢途径中重要酶基因的筛选及表达分析第56-58页
        3.5.1 果实色素代谢途径中重要酶基因的筛选第56-57页
        3.5.2 果实色素代谢通路中重要酶基因的qRT-PCR验证第57-58页
    3.6 火龙果果实色素代谢途径中重要基因的筛选及表达分析第58-60页
        3.6.1 火龙果果实色素代谢相关重要基因的筛选结果第58-59页
        3.6.2 RT-PCR验证基因组织特异性结果第59-60页
    3.7 U31379M2基因的扩增与生物信息学分析第60-71页
        3.7.1 U31379M2基因扩增和切胶回收结果第60-61页
        3.7.2 U31379M2基因重组子鉴定第61-64页
        3.7.3 U31379M2核酸序列Blast结果第64-65页
        3.7.4 U31379M2核酸序列与Unigene0031379基因序列比对第65-66页
        3.7.5 U31379M2基因的氨基酸理化性质分析第66-67页
        3.7.6 U31379M2表达蛋白的疏水性预测第67-68页
        3.7.7 U31379M2表达蛋白的结构域预测第68页
        3.7.8 U31379M2表达蛋白的翻译后修饰预测第68-69页
        3.7.9 U31379M2表达蛋白的功能预测第69页
        3.7.10 U31379M2表达蛋白的同源蛋白比对分析第69-71页
4 讨论第71-76页
    4.1 红肉与白肉火龙果的生理指标差异第71页
    4.2 转录组测序数据的可靠性第71页
    4.3 测序数据中差异基因的筛选思路第71-72页
    4.4 火龙果RNA提取方法的优化第72页
    4.5 火龙果的果实色素代谢通路的预测第72-75页
    4.6 U31379M2研究意义第75-76页
5 结论第76-77页
参考文献第77-82页
附录第82-83页
致谢第83页

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