摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-21页 |
1.1 成纤维细胞与结缔组织 | 第9-11页 |
1.1.1 成纤维细胞 | 第9页 |
1.1.2 结缔组织 | 第9-11页 |
1.2 活性氧 | 第11-13页 |
1.2.1 活性氧简介 | 第11页 |
1.2.2 常见的活性氧及抗氧化剂 | 第11-13页 |
1.2.2.1 超氧阴离子自由基 | 第11-12页 |
1.2.2.2 过氧化氢 | 第12页 |
1.2.2.3 羟自由基 | 第12-13页 |
1.2.2.4 抗氧化剂 | 第13页 |
1.3 经络与结缔组织 | 第13-19页 |
1.3.1 经络简介 | 第13-14页 |
1.3.2 结缔组织与经络的关系 | 第14页 |
1.3.3 成纤维细胞与经络的关系 | 第14-15页 |
1.3.4 腹白线与经络的关系 | 第15-16页 |
1.3.5 活性氧与经络的关系 | 第16-19页 |
1.4 本课题的研究目标、内容与意义 | 第19-21页 |
1.4.1 研究目标 | 第19页 |
1.4.2 研究内容 | 第19页 |
1.4.3 研究意义 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
2.1 实验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 实验动物与细胞株 | 第21-22页 |
2.1.2 实验常用药品和试剂 | 第22-23页 |
2.2 主要实验仪器设备 | 第23-24页 |
2.3 实验常用溶液配方 | 第24-25页 |
2.4 主要试验方法步骤 | 第25-32页 |
2.4.1 体内实验 | 第25-30页 |
2.4.1.1 体内实验基本操作 | 第25-26页 |
2.4.1.2 大鼠体内部分组织的活性氧相关指标测定 | 第26-28页 |
2.4.1.3 膜染色 | 第28页 |
2.4.1.4 Western Blot测定ERK1/2与p-ERK1/2 | 第28-30页 |
2.4.2 细胞实验 | 第30-31页 |
2.4.2.1 细胞实验基本操作 | 第30页 |
2.4.2.2 CCK-8法测细胞活力 | 第30页 |
2.4.2.3 酶联免疫试剂盒测细胞Ⅰ型胶原蛋白生成量 | 第30-31页 |
2.4.2.4 DCFH-DA法测胞内ROS水平 | 第31页 |
2.4.2.5 三维细胞培养体系的构建 | 第31页 |
2.4.3 无细胞体系活性氧强度检测(DCFH法) | 第31-32页 |
2.5 实验数据处理 | 第32-33页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第33-67页 |
3.1 体内实验 | 第33-41页 |
3.1.1 大鼠腹白线与其他组织活性氧相关指标的比较研究 | 第33-40页 |
3.1.1.1 SOD酶活测定 | 第33-34页 |
3.1.1.2 CAT酶活测定 | 第34-35页 |
3.1.1.3 T-GSH含量测定 | 第35-37页 |
3.1.1.4 羟自由基抑制能力测定 | 第37页 |
3.1.1.5 总抗氧化能力测定 | 第37-38页 |
3.1.1.6 过氧化氢含量测定 | 第38页 |
3.1.4.7 总一氧化氮合成酶酶活力测定 | 第38-39页 |
3.1.1.8 丙二醛含量测定 | 第39-40页 |
3.1.2 活性氧对大鼠结缔组织ERK信号通路的影响 | 第40-41页 |
3.1.3 动物实验小结 | 第41页 |
3.2 体外活性氧引发体系的构建与分析 | 第41-47页 |
3.2.1 胞外活性氧水平检测 | 第42-44页 |
3.2.2 胞内活性氧水平检测 | 第44-47页 |
3.2.3 小结 | 第47页 |
3.3 活性氧对成纤维细胞的影响 | 第47-53页 |
3.3.1 过氧化氢对不同来源成纤维细胞增殖的影响 | 第47-50页 |
3.3.1.1 过氧化氢对无COI体系成纤维细胞增殖的影响 | 第47-49页 |
3.3.1.2 过氧化氢对包被COI体系中成纤维细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
3.3.2 超氧自由基对L929细胞增殖的影响 | 第50-53页 |
3.3.2.1 胞外超氧自由基对L929细胞增殖的影响 | 第51-52页 |
3.3.2.2 胞内超氧自由基对L929细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
3.3.3 小结 | 第53页 |
3.4 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应活性氧的影响 | 第53-61页 |
3.4.1 L929细胞与P815细胞共培养体系的构建 | 第53-55页 |
3.4.2 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应过氧化氢的影响 | 第55-59页 |
3.4.3 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应超氧自由基的影响 | 第59-60页 |
3.4.3.1 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应胞外超氧自由基的影响 | 第59页 |
3.4.3.2 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应胞内超氧自由基的影响 | 第59-60页 |
3.4.4 小结 | 第60-61页 |
3.5 钙离子对成纤维细胞的影响 | 第61-65页 |
3.5.1 钙离子对单独培养与共培养体系细胞存活率的影响 | 第61-63页 |
3.5.2 钙离子对单独培养与共培养体系胞内活性氧水平的影响 | 第63-64页 |
3.5.3 SOD对钙离子刺激的共培养体系的存活率的影响 | 第64-65页 |
3.5.4 小结 | 第65页 |
3.6 三维培养成纤维细胞L929 | 第65-67页 |
总结与展望 | 第67-71页 |
总结 | 第67-69页 |
展望 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
附录 | 第80-84页 |
附录一 | 第80-81页 |
附录二 | 第81-82页 |
附录三 | 第82-83页 |
附录四 | 第83-84页 |
个人简历 | 第84页 |