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基于成纤维细胞的经络作用机制的探索研究

摘要第3-4页
abstract第4-5页
第一章 绪论第9-21页
    1.1 成纤维细胞与结缔组织第9-11页
        1.1.1 成纤维细胞第9页
        1.1.2 结缔组织第9-11页
    1.2 活性氧第11-13页
        1.2.1 活性氧简介第11页
        1.2.2 常见的活性氧及抗氧化剂第11-13页
            1.2.2.1 超氧阴离子自由基第11-12页
            1.2.2.2 过氧化氢第12页
            1.2.2.3 羟自由基第12-13页
            1.2.2.4 抗氧化剂第13页
    1.3 经络与结缔组织第13-19页
        1.3.1 经络简介第13-14页
        1.3.2 结缔组织与经络的关系第14页
        1.3.3 成纤维细胞与经络的关系第14-15页
        1.3.4 腹白线与经络的关系第15-16页
        1.3.5 活性氧与经络的关系第16-19页
    1.4 本课题的研究目标、内容与意义第19-21页
        1.4.1 研究目标第19页
        1.4.2 研究内容第19页
        1.4.3 研究意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-33页
    2.1 实验材料第21-23页
        2.1.1 实验动物与细胞株第21-22页
        2.1.2 实验常用药品和试剂第22-23页
    2.2 主要实验仪器设备第23-24页
    2.3 实验常用溶液配方第24-25页
    2.4 主要试验方法步骤第25-32页
        2.4.1 体内实验第25-30页
            2.4.1.1 体内实验基本操作第25-26页
            2.4.1.2 大鼠体内部分组织的活性氧相关指标测定第26-28页
            2.4.1.3 膜染色第28页
            2.4.1.4 Western Blot测定ERK1/2与p-ERK1/2第28-30页
        2.4.2 细胞实验第30-31页
            2.4.2.1 细胞实验基本操作第30页
            2.4.2.2 CCK-8法测细胞活力第30页
            2.4.2.3 酶联免疫试剂盒测细胞Ⅰ型胶原蛋白生成量第30-31页
            2.4.2.4 DCFH-DA法测胞内ROS水平第31页
            2.4.2.5 三维细胞培养体系的构建第31页
        2.4.3 无细胞体系活性氧强度检测(DCFH法)第31-32页
    2.5 实验数据处理第32-33页
第三章 实验结果与讨论第33-67页
    3.1 体内实验第33-41页
        3.1.1 大鼠腹白线与其他组织活性氧相关指标的比较研究第33-40页
            3.1.1.1 SOD酶活测定第33-34页
            3.1.1.2 CAT酶活测定第34-35页
            3.1.1.3 T-GSH含量测定第35-37页
            3.1.1.4 羟自由基抑制能力测定第37页
            3.1.1.5 总抗氧化能力测定第37-38页
            3.1.1.6 过氧化氢含量测定第38页
            3.1.4.7 总一氧化氮合成酶酶活力测定第38-39页
            3.1.1.8 丙二醛含量测定第39-40页
        3.1.2 活性氧对大鼠结缔组织ERK信号通路的影响第40-41页
        3.1.3 动物实验小结第41页
    3.2 体外活性氧引发体系的构建与分析第41-47页
        3.2.1 胞外活性氧水平检测第42-44页
        3.2.2 胞内活性氧水平检测第44-47页
        3.2.3 小结第47页
    3.3 活性氧对成纤维细胞的影响第47-53页
        3.3.1 过氧化氢对不同来源成纤维细胞增殖的影响第47-50页
            3.3.1.1 过氧化氢对无COI体系成纤维细胞增殖的影响第47-49页
            3.3.1.2 过氧化氢对包被COI体系中成纤维细胞增殖的影响第49-50页
        3.3.2 超氧自由基对L929细胞增殖的影响第50-53页
            3.3.2.1 胞外超氧自由基对L929细胞增殖的影响第51-52页
            3.3.2.2 胞内超氧自由基对L929细胞增殖的影响第52-53页
        3.3.3 小结第53页
    3.4 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应活性氧的影响第53-61页
        3.4.1 L929细胞与P815细胞共培养体系的构建第53-55页
        3.4.2 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应过氧化氢的影响第55-59页
        3.4.3 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应超氧自由基的影响第59-60页
            3.4.3.1 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应胞外超氧自由基的影响第59页
            3.4.3.2 肥大细胞的共培养对成纤维细胞响应胞内超氧自由基的影响第59-60页
        3.4.4 小结第60-61页
    3.5 钙离子对成纤维细胞的影响第61-65页
        3.5.1 钙离子对单独培养与共培养体系细胞存活率的影响第61-63页
        3.5.2 钙离子对单独培养与共培养体系胞内活性氧水平的影响第63-64页
        3.5.3 SOD对钙离子刺激的共培养体系的存活率的影响第64-65页
        3.5.4 小结第65页
    3.6 三维培养成纤维细胞L929第65-67页
总结与展望第67-71页
    总结第67-69页
    展望第69-71页
参考文献第71-78页
致谢第78-80页
附录第80-84页
    附录一第80-81页
    附录二第81-82页
    附录三第82-83页
    附录四第83-84页
个人简历第84页

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