中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
中英文缩略表 | 第16-17页 |
第1章 绪论 | 第17-21页 |
第2章 激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞分离、培养、鉴定及增殖能力研究 | 第21-31页 |
2.1 材料 | 第21-24页 |
2.1.1 SONFH入组病例选择与对照体系的建立 | 第21-23页 |
2.1.2 实验试剂 | 第23页 |
2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
2.1.4 试剂配置 | 第24页 |
2.2 方法 | 第24-25页 |
2.2.1 BMSCs分离及培养 | 第24页 |
2.2.2 BMSCs表面抗原检测 | 第24页 |
2.2.3 BMSCs细胞周期检测 | 第24-25页 |
2.2.4 BMSCs增殖能力检测 | 第25页 |
2.2.5 统计学分析 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-28页 |
2.3.1 SONFH组与对照组BMSCs形态学特征 | 第25-26页 |
2.3.2 SONFH组与对照组BMSCs表面抗原表达结果 | 第26页 |
2.3.3 SONFH组与对照组BMSCs细胞周期无显著差异 | 第26-27页 |
2.3.4 SONFH组与对照组BMSCs增殖能力无显著差异 | 第27-28页 |
2.4 讨论 | 第28-31页 |
第3章 激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞成骨、成脂分化能力研究 | 第31-47页 |
概述 | 第31页 |
3.1 材料 | 第31-33页 |
3.1.1 实验试剂 | 第31-32页 |
3.1.2 实验仪器 | 第32页 |
3.1.3 试剂配制 | 第32-33页 |
3.2 方法 | 第33-38页 |
3.3 结果 | 第38-43页 |
3.3.1 激素性股骨头坏死BMSCs成骨分化能力减弱 | 第38-41页 |
3.3.2 激素性股骨头坏死BMSCs成脂分化能力增强 | 第41-43页 |
3.4 讨论 | 第43-47页 |
第4章 激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞LNCRNA及MRNA表达谱研究 | 第47-71页 |
概述 | 第47页 |
4.1 材料 | 第47-48页 |
4.1.1 实验试剂 | 第47-48页 |
4.1.2 实验仪器 | 第48页 |
4.1.3 基因芯片信息 | 第48页 |
4.2 方法 | 第48-56页 |
4.3 结果 | 第56-67页 |
4.3.1 样本提取总RNA及标记效率质控结果 | 第56-57页 |
4.3.2 基因芯片扫描结果 | 第57-58页 |
4.3.3 原始表达谱信息标准化及注释 | 第58-60页 |
4.3.4 芯片数据质量评估 | 第60-61页 |
4.3.5 差异表达lncRNA及mRNA筛选 | 第61-64页 |
4.3.6 通过qRT-PCR验证lncRNA和mRNA基因芯片准确性 | 第64-67页 |
4.4 讨论 | 第67-71页 |
第5章 激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞LNCRNA及MRNA表达谱生物信息学分析 | 第71-93页 |
概述 | 第71-72页 |
5.1 生物信息学分析方法 | 第72-74页 |
5.1.1 基因本体论(Gene Ontology, GO)分析 | 第72页 |
5.1.2 信号通路分析(Pathway分析) | 第72-73页 |
5.1.3 PPI (protein-protein interaction)互作网络的构建及分析 | 第73页 |
5.1.4 CNC (Coding-non-coding gene co-expression)共表达网络分析 | 第73-74页 |
5.1.5 ceRNA(competing endogenous RNA)调控网络构建 | 第74页 |
5.1.6 统计学分析 | 第74页 |
5.2 结果 | 第74-88页 |
5.2.1 激素性股骨头坏死BMSCs差异表达基因GO分析结果 | 第74-81页 |
5.2.2 激素性股骨头坏死BMSCs差异表达基因Pathway分析 | 第81-84页 |
5.2.3 PPI互作网络分析结果 | 第84-86页 |
5.2.4 CNC共表达网络分析 | 第86-87页 |
5.2.5 ceRNA调控网络分析 | 第87-88页 |
5.3 讨论 | 第88-93页 |
第6章 LNCRNA-HOTAIR调控激素性股骨头坏死骨髓间充质干细胞成骨/成脂转分化异常机制研究 | 第93-115页 |
概述 | 第93页 |
6.1 材料 | 第93-95页 |
6.1.1 实验试剂 | 第93-94页 |
6.1.2 实验仪器 | 第94-95页 |
6.2 方法 | 第95-97页 |
6.3 结果 | 第97-110页 |
6.3.1 Knockdown HOTAIR促进SONFH-BMSCs成骨分化、抑制成脂分化 | 第97-100页 |
6.3.2 过表达HOTAIR抑制BMSCs成骨分化、促进成脂分化 | 第100-103页 |
6.3.3 HOTAIR及DKK1均与miR-217 有可结合位点 | 第103-105页 |
6.3.4 HOTAIR及DKK1均与miR-217 表达量呈显著负相关 | 第105-106页 |
6.3.5 HOTAIR通过结合miR-217 间接调控靶基因DKK1表达 | 第106-108页 |
6.3.6 低表达HOTAIR可抑制经典Wnt信号通路中OCT4表达,促进β-catenin表达 | 第108-109页 |
6.3.7 过表达HOTAIR可促进经典Wnt信号通路中OCT4表达,抑制β-catenin表达 | 第109-110页 |
6.4 讨论 | 第110-115页 |
第7章 结论 | 第115-117页 |
创新点与不足之处 | 第117-119页 |
参考文献 | 第119-127页 |
附录 | 第127-155页 |
综述1 骨髓间充质干细胞多能分化及骨疾病相关LNCRNA研究进展 | 第127-139页 |
1、长链非编码RNA分子功能及作用机制 | 第128-129页 |
2、长链非编码RNA与骨髓间充质干细胞多元性分化 | 第129-132页 |
3、LNCRNA与骨科疾病 | 第132-134页 |
4、结语 | 第134页 |
参考文献 | 第134-139页 |
综述2 生物信息学相关数据库及工具在长链非编码RNA研究中的应用进展 | 第139-155页 |
1、基因组学和基因组计划 | 第141-142页 |
2、基因测序与基因芯片 | 第142-143页 |
3、LNCRNA数据库及工具概述 | 第143-148页 |
4、LNCRNA与其它生物分子关联分析 | 第148-149页 |
5、LNCRNA数据库与组学数据集 | 第149-150页 |
6、展望 | 第150页 |
参考文献 | 第150-155页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第155-157页 |
致谢 | 第157页 |