前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第1章 绪论 | 第16-34页 |
1.1 干燥综合征的研究现状 | 第16-21页 |
1.2 干燥综合征的发病机制之遗传因素 | 第21-25页 |
1.2.1 全基因组关联分析 | 第21页 |
1.2.2 干燥综合征的遗传易感因素 | 第21-23页 |
1.2.3 OAS1基因及OAS1基因上功能性SNP位点rs10774671 | 第23-25页 |
1.3 干燥综合征的发病机制之病毒感染 | 第25-30页 |
1.3.1 干燥综合征的环境易感因素 | 第25-26页 |
1.3.2 HBV病毒介绍 | 第26-29页 |
1.3.3 HBV与干燥综合征发病的关系 | 第29-30页 |
1.4 研究设计 | 第30-34页 |
第2章 材料与方法 | 第34-46页 |
2.1 材料与常规试剂 | 第34-36页 |
2.1.1 菌株 | 第34页 |
2.1.2 质粒 | 第34页 |
2.1.3 细胞 | 第34页 |
2.1.4 抗体 | 第34-35页 |
2.1.5 相关试剂 | 第35-36页 |
2.2 仪器与设备 | 第36-37页 |
2.3 方法 | 第37-46页 |
2.3.1 样本收集 | 第37页 |
2.3.2 核酸提取 | 第37-38页 |
2.3.3 外周血单核细胞提取 | 第38页 |
2.3.4 构建永生化淋巴母细胞系 | 第38-39页 |
2.3.5 基因型检测(Taq Man实时定量PCR法) | 第39-40页 |
2.3.6 基因表达检测 | 第40-41页 |
2.3.7 细胞培养与转染 | 第41-42页 |
2.3.8 数据分析 | 第42页 |
2.3.9 质粒构建与提取 | 第42-43页 |
2.3.10 免疫蛋白印迹 | 第43-44页 |
2.3.11 酶联免疫试剂盒检测HBV抗原表达情况 | 第44-46页 |
第3章 结果与讨论 | 第46-74页 |
3.1 rs10774671位点与干燥综合征并发HBV感染的遗传关联分析 | 第46-51页 |
3.1.1 样本收集与处理 | 第46-47页 |
3.1.2 SNP: rs10774671位点基因多态性与干燥综合征易感性的关联分析 | 第47-48页 |
3.1.3 SNP: rs10774671位点基因多态性与HBV感染易感性的关联分析 | 第48-50页 |
3.1.4 小结与讨论 | 第50-51页 |
3.2 OAS1基因表达在抗SSA抗体阳性的干燥综合征中显著增加 | 第51-63页 |
3.2.1 鉴定与rs10774671位点具有连锁不平衡关系(r2>0.95)的单倍体 | 第51-56页 |
3.2.2 OAS1在干燥综合征与健康人群中m RNA表达量鉴定 | 第56-59页 |
3.2.3 OAS3在干燥综合征与健康人群中m RNA表达量鉴定 | 第59-61页 |
3.2.4 小结与讨论 | 第61-63页 |
3.3 rs10774671位点的高频率等位基因“A”通过调控OAS1基因m RNA剪切前体诱导干燥综合征的发生 | 第63-67页 |
3.3.1 四种OAS1蛋白亚型基因表达的特异性引物设计 | 第63-64页 |
3.3.2 特异性引物鉴定四种OAS1蛋白亚型基因表达结果 | 第64-65页 |
3.3.3 实时定量PCR鉴定四种OAS1蛋白亚型基因表达结果 | 第65-66页 |
3.3.4 小结与讨论 | 第66-67页 |
3.4 rs10774671位点突变基因“A”调控OAS1蛋白抵抗HBV的作用机制 | 第67-74页 |
3.4.1 构建四种OAS1蛋白亚型的表达载体 | 第67-68页 |
3.4.2 Western Blot法比较四种OAS1蛋白亚型抑制HBV病毒的能力 | 第68页 |
3.4.3 ELISA法比较四种OAS1蛋白亚型抑制HBV病毒的能力 | 第68-69页 |
3.4.4 实时定量PCR法比较四种OAS1蛋白亚型抑制HBV病毒的能力 | 第69-70页 |
3.4.5 小结与讨论 | 第70-74页 |
第4章 结论 | 第74-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
攻读博士学位期间发表的论文及科研成果 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |