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Nrf2在糖尿病OxLDL所致肾纤维化中的保护机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩略语/符号说明第13-16页
前言第16-21页
    研究现状、成果第16-19页
    研究目的、方法第19-21页
一、高糖、高脂诱导糖尿病大鼠肾CD36表达第21-26页
    1.1 研究对象和主要试剂第21页
        1.1.1 研究对象第21页
        1.1.2 主要试剂及仪器第21页
        1.1.3 主要抗体第21页
    1.2 研究方法第21-23页
        1.2.1 建立2型糖尿病合并高脂血症大鼠模型方法第21页
        1.2.2 标本的收集方法第21-22页
        1.2.3 肾组织病理学检查肾组织标本腊块制备方法第22页
        1.2.4 肾小管间质损伤评分标准第22页
        1.2.5 免疫组化检测方法第22页
        1.2.6 生化指标测定方法第22-23页
        1.2.7 图像采集方法第23页
        1.2.8 统计学处理方法第23页
    1.3 结果第23-24页
        1.3.1 肾脏病理一般表现第23页
        1.3.2 糖尿病大鼠组与对照组比较肾标本CD36表达第23-24页
        1.3.3 肾小管间质损伤半定量分析第24页
    1.4 讨论第24-25页
        1.4.1 动物模型的选择和建立第24页
        1.4.2 CD36作用概述第24页
        1.4.3 CD36与糖尿病肾间质纤维化之间的关联性第24-25页
    1.5 小结第25-26页
二、O_xLDL对其肾小管细胞受体CD36及LOX1具有上调作用第26-39页
    2.1 对象和方法第26-30页
        2.1.1 研究对象第26页
        2.1.2 主要试剂第26页
        2.1.3 主要抗体第26页
        2.1.4 主要实验仪器第26页
        2.1.5 细胞培养方法第26-27页
        2.1.6 O_xLDL处理细胞方法第27页
        2.1.7 免疫印迹方法第27页
        2.1.8 RT-PCR实验方法-检测基因LOX-1 mRNA的表达第27-30页
            2.1.8.1 RT-PCR实验原理第27页
            2.1.8.2 RT-PCR主要试剂准备第27-28页
            2.1.8.3 RT-PCR主要仪器准备第28页
            2.1.8.4 RT-PCR主要实验步骤第28-30页
    2.2 结果第30-34页
        2.2.1 50mg/L浓度O_xLDL刺激NRK-52E细胞后CD36表达第30-32页
        2.2.2 不同浓度O_xLDL刺激NRK-52E细胞CD36的表达第32-34页
        2.2.3 OXLDL处理NRK-52E细胞后LOX1-mRNA的表达第34页
    2.3 讨论第34-38页
        2.3.1 高脂相关肾损害的机制概述第34-35页
        2.3.2 CD36在慢性间质损伤中的研究进展第35-37页
        2.3.3 LOX-1受体的作用机制研究进展概述第37页
        2.3.4 O_xLDL与肾小管损伤对其受体CD36、LOX-1的影响及其关系第37-38页
    2.4 小结第38-39页
三、O_xLDL对其肾小管细胞Nrf2蛋白水平的影响第39-50页
    3.1 对象和方法第39-41页
        3.1.1 研究对象第39页
        3.1.2 主要试剂第39页
        3.1.3 主要抗体第39页
        3.1.4 主要实验仪器第39页
        3.1.5 细胞培养方法第39-40页
        3.1.6 O_xLDL处理细胞方法第40页
        3.1.7 血清饥饿处理NRK-52E细胞方法第40页
        3.1.8 核蛋白的提取方法第40页
        3.1.9 免疫印迹方法第40-41页
    3.2 结果第41-44页
        3.2.1 O_xLDL处理后Nrf2总蛋白水平第41-42页
        3.2.2 O_xLDL处理后Nrf2在核内及胞浆内的蛋白水平第42-44页
    3.3 讨论第44-49页
        3.3.1 脂蛋白异常与氧化应激关系概述第44-45页
        3.3.2 Nrf2的作用概述第45-47页
        3.3.3 O_xLDL对Nrf2的影响及其机制探讨第47-49页
    3.4 小结第49-50页
四、Keap1对CD36、LOX-1、E-cadherin蛋白表达影响第50-66页
    4.1 对象及方法第50-54页
        4.1.1 研究对象第50页
        4.1.2 主要试剂第50页
        4.1.3 主要抗体第50页
        4.1.4 主要实验仪器第50-51页
        4.1.5 细胞培养方法第51页
        4.1.6 OxLDL处理细胞方法第51页
        4.1.7 RT-PCR方法检测基因CD36 mRNA第51页
        4.1.8 细胞转染试验方法第51-54页
    4.2 结果第54-61页
        4.2.1 Keap1过表达后再以O_xLDL处理细胞CD36蛋白表达第54-55页
        4.2.2 Keap1过表达后再以OXLDL处理细胞CD36 mRNA含量第55-57页
        4.2.3 Keap1过表达后再以OXLDL处理细胞LOX-1mRNA比较第57-60页
        4.2.4 Keap1处理后细胞E-cadherin蛋白表达第60-61页
    4.3 讨论第61-65页
        4.3.1 Nrf2抑制剂Keap1的概述第61页
        4.3.2 O_xLDL的肾小管细胞受体CD36的调节机制概述第61-62页
        4.3.3 Nrf2抑制剂Keap1对CD36影响及调节机制第62-64页
        4.3.4 肾小管细胞纤维化标志分子E-cadherin概述第64-65页
        4.3.5 Nrf2抑制剂Keap1对肾小管细胞E-cadherin的影响第65页
    4.4 小结第65-66页
五、O_xLDL及Keap1对NFκB蛋白表达影响第66-73页
    5.1 对象与方法第66-67页
        5.1.1 研究对象第66页
        5.1.2 主要试剂第66页
        5.1.3 主要抗体第66页
        5.1.4 主要实验仪器第66页
        5.1.5 细胞培养方法第66页
        5.1.6 细胞处理方法第66-67页
        5.1.7 免疫印迹方法第67页
        5.1.8 细胞转染方法第67页
    5.2 结果第67-70页
        5.2.1 OxLDL处理后的细胞中NF-κB蛋白表达第67-68页
        5.2.2 Nrf2抑制剂处理后的293T细胞中NF-κB蛋白第68-70页
    5.3 讨论第70-72页
    5.4 小结第72-73页
全文结论第73-75页
论文创新点第75-76页
参考文献第76-87页
发表论文和参加科研情况说明第87-88页
综述第88-115页
    综述参考文献第104-115页
致谢第115页

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