| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·溶菌酶概述 | 第8页 |
| ·溶菌酶类型 | 第8-9页 |
| ·溶菌酶分子生物学性质 | 第9-10页 |
| ·溶菌酶基因结构 | 第9页 |
| ·溶菌酶分子结构 | 第9-10页 |
| ·溶菌酶催化机制 | 第10-11页 |
| ·溶菌酶作用机制 | 第11-12页 |
| ·溶菌酶应用 | 第12-13页 |
| ·溶菌酶与医药 | 第12页 |
| ·溶菌酶与食品 | 第12页 |
| ·溶菌酶与饲料 | 第12页 |
| ·其它应用 | 第12-13页 |
| ·溶菌酶基因工程研究进展 | 第13-15页 |
| ·我国人溶菌酶研究状况 | 第13-14页 |
| ·国外的研究动态及发展趋势 | 第14-15页 |
| ·融合蛋白技术概述 | 第15页 |
| ·木聚糖酶概述 | 第15-16页 |
| ·立题背景及课题内容 | 第16-18页 |
| 第二章 AP-hLY融合基因载体的构建与表达 | 第18-35页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·菌株及质粒 | 第18页 |
| ·工具酶及试剂 | 第18页 |
| ·培养基和试剂配制 | 第18-20页 |
| ·培养基配制 | 第18-19页 |
| ·常用贮存液配制 | 第19页 |
| ·碱法质粒抽提试剂配制 | 第19-20页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳试剂配制 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-31页 |
| ·AP-EKsite基因的合成 | 第20-22页 |
| ·AP-hLY基因C片段的合成 | 第22-23页 |
| ·AP-hLY基因D片段的合成 | 第23-24页 |
| ·AP-hLY融合基因的合成 | 第24-25页 |
| ·重组质粒pUCm-T-AP-hLY的构建 | 第25-27页 |
| ·重组质粒pPIC9K-AP-hLY的构建 | 第27-28页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第28-29页 |
| ·高拷贝重组子的筛选及鉴定 | 第29-30页 |
| ·毕赤酵母的诱导表达 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-35页 |
| ·重组质粒pUCm-T-AP-hLY的构建 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pPIC9K-AP-hLY的构建 | 第32-33页 |
| ·重组毕赤酵母的鉴定 | 第33-34页 |
| ·融合蛋白的鉴定 | 第34-35页 |
| 第三章 Xyn Ⅱ-hLY融合基因载体的构建与表达 | 第35-48页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·菌株及质粒 | 第35页 |
| ·工具酶及试剂 | 第35页 |
| ·培养基和试剂配制 | 第35-36页 |
| ·培养基配制 | 第35页 |
| ·试剂配制 | 第35-36页 |
| ·木聚糖酶活性测定溶液的配制 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-41页 |
| ·Xyn Ⅱ-EKsite-hLY基因的合成 | 第36-38页 |
| ·Xyn Ⅱ-Linker-hLY基因的合成 | 第38页 |
| ·重组质粒pUCm-T-Xyn Ⅱ-EKsite/Linker-hLY的构建 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pPIC9K-Xyn Ⅱ-EKsite/Linker-hLY的构建 | 第39页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第39页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳检测 | 第39页 |
| ·表达产物的初步活性检测 | 第39-40页 |
| ·表达产物的分离纯化 | 第40-41页 |
| ·融合蛋白的肠激酶酶切 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-48页 |
| ·重组质粒pUCm-T-Xyn Ⅱ-EKsite/Linker-hLY的构建 | 第41-43页 |
| ·重组质粒pPIC9K-Xyn Ⅱ-hLY的构建 | 第43-44页 |
| ·重组毕赤酵母的鉴定 | 第44页 |
| ·融合蛋白的鉴定 | 第44-45页 |
| ·融合蛋白的Sephadex G-75凝胶层析柱纯化 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白的酶切结果 | 第46页 |
| ·重组蛋白活性测定结果 | 第46-48页 |
| 小结与展望 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |
