| 摘要 | 第6-9页 |
| abstract | 第9-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-29页 |
| 1.1 葡萄生产的重要性与存在的病害问题 | 第17-18页 |
| 1.2 葡萄中白藜芦醇的抗病作用与应用研究 | 第18-21页 |
| 1.2.1 葡萄中白藜芦醇的发现及其作用 | 第18页 |
| 1.2.2 葡萄中白藜芦醇合成途径及其衍生物的种类 | 第18-19页 |
| 1.2.3 葡萄中白藜芦醇及其衍生物的检测 | 第19-20页 |
| 1.2.4 白藜芦醇介导的葡萄抗病性研究 | 第20-21页 |
| 1.3 葡萄芪合成酶基因及其产物的研究 | 第21-25页 |
| 1.3.1 葡萄基因组测序与芪合成酶基因注释 | 第21-22页 |
| 1.3.2 葡萄芪合成酶基因转录水平表达模式分析 | 第22-23页 |
| 1.3.3 葡萄芪合成酶基因蛋白水平表达模式分析 | 第23-24页 |
| 1.3.4 葡萄芪合成酶基因表达产物白藜芦醇的组织分布 | 第24页 |
| 1.3.5 葡萄芪合成酶基因转基因研究 | 第24-25页 |
| 1.4 中国野生葡萄芪合成酶基因研究 | 第25-28页 |
| 1.4.1 中国野生葡萄收集保存、鉴定和利用 | 第25页 |
| 1.4.2 中国野生葡萄白藜芦醇的含量与分布 | 第25页 |
| 1.4.3 中国野生华东葡萄芪合成酶基因的克隆与功能分析 | 第25-27页 |
| 1.4.4 中国野生毛葡萄芪合成酶基因的克隆与功能分析 | 第27-28页 |
| 1.5 葡萄芪合成酶基因研究趋势 | 第28页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 第二章 中国野生华东葡萄芪合成酶基因VpSTS29组织表达特性研究 | 第29-50页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.1 葡萄材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 主要试剂与载体 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-32页 |
| 2.2.1 葡萄白粉菌接菌实验 | 第31页 |
| 2.2.2 葡萄基因组提取鉴定转基因VpSTS29无核白株系 | 第31页 |
| 2.2.3 葡萄不同组织总蛋白提取 | 第31页 |
| 2.2.4 高效液相色谱法分析芪类物质含量 | 第31页 |
| 2.2.5 葡萄组培苗微型嫁接实验分析芪合成酶及产物组织分布 | 第31页 |
| 2.2.6 芪合成酶VpSTS29组织原位荧光观察 | 第31-32页 |
| 2.2.7 葡萄原生质体制备进行亚细胞定位分析 | 第32页 |
| 2.2.8 实时qRT-PCR分析 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-47页 |
| 2.3.1 芪合成酶基因STS29在中国野生华东葡萄中的表达分析 | 第32-35页 |
| 2.3.2 芪合成酶基因STS29在中国野生毛葡萄中的表达分析 | 第35页 |
| 2.3.3 芪合成酶基因STS29在欧洲葡萄无核白中的表达分析 | 第35-38页 |
| 2.3.4 芪合成酶基因VpSTS29在转基因葡萄中的表达分析 | 第38-41页 |
| 2.3.5 芪合成酶基因VpSTS29在转基因拟南芥中的表达分析 | 第41-42页 |
| 2.3.6 芪合成酶VpSTS29蛋白及芪类物质运输模式分析 | 第42-44页 |
| 2.3.7 转基因VpSTS29无核白中芪合成酶组织原位荧光观察 | 第44-47页 |
| 2.3.8 芪合成酶VpSTS29亚细胞定位 | 第47页 |
| 2.4 讨论 | 第47-50页 |
| 第三章 葡萄芪合成酶基因VpSTS29在生长发育进程与胁迫条件下表达研究 | 第50-81页 |
| 3.1 材料 | 第51-52页 |
| 3.1.1 葡萄材料 | 第51页 |
| 3.1.2 模式植物材料 | 第51页 |
| 3.1.3 主要试剂仪器与载体 | 第51-52页 |
| 3.2 方法 | 第52-56页 |
| 3.2.1 生物与非生物胁迫处理 | 第52页 |
| 3.2.2 叶绿体亚细胞组分分离 | 第52-53页 |
| 3.2.3 H2O2含量测定 | 第53页 |
| 3.2.4 叶绿素含量测定 | 第53-54页 |
| 3.2.5 高效液相色谱法(HPLC)分析芪类物质含量 | 第54页 |
| 3.2.6 黑暗处理 | 第54页 |
| 3.2.7 PSII光化学效率Fv/Fm和叶绿素含量测定 | 第54页 |
| 3.2.8 透射电镜分析 | 第54页 |
| 3.2.9 实时qRT-PCR分析 | 第54-56页 |
| 3.3 结果 | 第56-75页 |
| 3.3.1 芪合成酶基因VpSTS29生物胁迫条件下表达模式分析 | 第56-57页 |
| 3.3.2 非生物胁迫条件下芪合成酶基因VpSTS29表达分析 | 第57-58页 |
| 3.3.3 UV-C处理对芪合成酶VpSTS29亚细胞定位的影响 | 第58-60页 |
| 3.3.4 UV-C光诱导芪合成酶VpSTS29向叶绿体转移并积累芪类物质 | 第60-61页 |
| 3.3.5 转基因VpSTS29无核白葡萄增加对UV-C光的敏感性 | 第61页 |
| 3.3.6 转基因VpSTS29无核白葡萄下调氧化还原进程基因的表达 | 第61-63页 |
| 3.3.7 芪合成酶基因VpSTS29与乙醇酸氧化酶基因VpGLO1共表达分析 | 第63-64页 |
| 3.3.8 芪合成酶VpSTS29在植物生长发育进程亚细胞定位差异分析 | 第64-66页 |
| 3.3.9 芪合成酶VpSTS29向叶油体迁移 | 第66-68页 |
| 3.3.10 芪合成酶VpSTS29由叶油体转运至液泡 | 第68-69页 |
| 3.3.11 芪合成酶VpSTS29转运途径分析 | 第69-71页 |
| 3.3.12 芪合成酶VpSTS29蛋白稳定性分析 | 第71-72页 |
| 3.3.13 白藜芦醇积累在液泡中 | 第72-75页 |
| 3.3.14 过表达芪合成酶基因VpSTS29延迟拟南芥叶片衰老 | 第75页 |
| 3.4 讨论 | 第75-81页 |
| 3.4.1 芪合成酶基因VpSTS29响应生物与非生物胁迫 | 第75-76页 |
| 3.4.2 芪合成酶基因VpSTS29及芪类物质对UV-C辐射的表达 | 第76-79页 |
| 3.4.3 芪合成酶VpSTS29及芪类物质在植物发育进程亚细胞动态分布 | 第79-81页 |
| 第四章 葡萄芪合成酶基因VpSTS29抗白粉病功能研究 | 第81-95页 |
| 4.1 材料 | 第82页 |
| 4.1.1 葡萄材料 | 第82页 |
| 4.1.2 模式植物材料 | 第82页 |
| 4.1.3 病原菌材料 | 第82页 |
| 4.1.4 主要试剂仪器与载体 | 第82页 |
| 4.2 方法 | 第82-83页 |
| 4.2.1基因枪法瞬时表达芪合成酶基因VpSTS29 | 第82页 |
| 4.2.2 大麦凝集素染色荧光观察白粉菌发育进程 | 第82-83页 |
| 4.2.3 台盼蓝染色显微观察白粉菌与植物互作 | 第83页 |
| 4.2.4 苯胺蓝染色显微观察胼胝质沉积情况 | 第83页 |
| 4.2.5 白藜芦醇与水杨酸处理诱导转基因拟南芥合成芪类物质分析 | 第83页 |
| 4.3 结果 | 第83-92页 |
| 4.3.1 葡萄白粉菌侵染结构发育进程观察 | 第83-84页 |
| 4.3.2 葡萄白粉菌诱导条件下接种区与健康区芪类物质差异分析 | 第84-85页 |
| 4.3.3 转基因VpSTS29无核白葡萄中受白粉菌诱导表达 | 第85-86页 |
| 4.3.4 转基因无核白葡萄突变体上表皮芪合成酶VpSTS29荧光定位观察 | 第86-88页 |
| 4.3.5 转基因VpSTS29拟南芥增强抗白粉病能力 | 第88-90页 |
| 4.3.6 SA信号途径参与芪合成酶基因VpSTS29介导的病原菌防御反应 | 第90-92页 |
| 4.4 讨论 | 第92-95页 |
| 第五章 中国野生葡萄芪合成酶基因表达调控研究 | 第95-118页 |
| 5.1 材料 | 第95-96页 |
| 5.1.1 葡萄材料 | 第95页 |
| 5.1.2 模式材料 | 第95页 |
| 5.1.3 菌株 | 第95-96页 |
| 5.1.4 主要仪器试剂与载体 | 第96页 |
| 5.2 方法 | 第96-99页 |
| 5.2.1 基因共表达网络分析 | 第96-97页 |
| 5.2.2 酵母双杂交分析验证VqICE1与VqMYB14/15的相互作用 | 第97页 |
| 5.2.3 免疫共沉淀分析验证VqICE1与VqMYB14/15的相互作用 | 第97页 |
| 5.2.4 双分子荧光互补分析验证VqICE1与VqMYB14/15的相互作用 | 第97页 |
| 5.2.5 中国野生毛葡萄芪合成酶基因启动子作用元件分析 | 第97页 |
| 5.2.6 酵母单杂交分析验证转录因子与STS启动子的结合 | 第97-98页 |
| 5.2.7 GUS蛋白定量分析验证转录因子对STS启动子的转录活性 | 第98页 |
| 5.2.8 定量PCR与HPLC分析 | 第98页 |
| 5.2.9 葡萄白粉菌接种实验和低温处理 | 第98-99页 |
| 5.2.10 统计分析 | 第99页 |
| 5.3 结果 | 第99-115页 |
| 5.3.1 中国野生华东葡萄VpMYB14和VpMYB15基因克隆与功能分析 | 第99-101页 |
| 5.3.2 中国野生毛葡萄’丹凤-2’转录因子基因与STS基因表达相关性分析 | 第101-105页 |
| 5.3.3 中国野生毛葡萄‘丹凤-2’转录因子VqICE1亚细胞定位分析 | 第105页 |
| 5.3.4 中国野生毛葡萄VqICE1激活芪合成酶基因启动子活性分析 | 第105-108页 |
| 5.3.5 中国野生毛葡萄VqICE1降低MYB14表达以及芪类物质积累 | 第108-110页 |
| 5.3.6 中国野生毛葡萄VqICE1与VqMYB14、VqMYB15相互作用分析 | 第110-111页 |
| 5.3.7 中国野生毛葡萄VqICE1结合VqMYB14和VqMYB15基因启动子分析 | 第111-112页 |
| 5.3.8 生物胁迫条件下中国野生毛葡萄bHLH-MYB转录因子基因表达模式分析 | 第112-115页 |
| 5.3.9 非生物胁迫条件下中国野生毛葡萄bHLH-MYB转录因子基因表达分析 | 第115页 |
| 5.4 讨论 | 第115-118页 |
| 第六章 结论和创新点 | 第118-120页 |
| 6.1 结论 | 第118-119页 |
| 6.2 创新点 | 第119-120页 |
| 参考文献 | 第120-133页 |
| 缩略词 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134-135页 |
| 作者简介 | 第135-136页 |
