| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第19-21页 |
| 1 绪论 | 第21-46页 |
| 1.1 细菌耐药问题现状 | 第21-24页 |
| 1.2 免疫系统与抗感染 | 第24-27页 |
| 1.2.1 免疫系统 | 第24页 |
| 1.2.2 病原菌的免疫识别 | 第24-26页 |
| 1.2.3 感染部位病原菌的免疫清除 | 第26-27页 |
| 1.3 免疫治疗 | 第27-33页 |
| 1.3.1 模式识别受体激动剂 | 第28-30页 |
| 1.3.2 微生物信号分子 | 第30-31页 |
| 1.3.3 免疫调节肽 | 第31-33页 |
| 1.4 Cathelicidin | 第33-44页 |
| 1.4.1 Cathelicidin的结构与分类 | 第33-35页 |
| 1.4.2 Cahelicidin的生物合成与组织分布 | 第35-36页 |
| 1.4.3 Cathelicidin的生物学活性 | 第36-41页 |
| 1.4.4 Cathelicidin家族抗菌肽在医药领域的应用前景 | 第41页 |
| 1.4.5 多肽类新药开发面临的困难及解决方案 | 第41-44页 |
| 1.5 本论文的选题依据和研究内容 | 第44-46页 |
| 1.5.1 选题依据 | 第44页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第44-46页 |
| 2 缅甸蟒cahelicidins基因的克隆及序列分析 | 第46-59页 |
| 2.1 引言 | 第46页 |
| 2.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第46页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第46页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第46-47页 |
| 2.2.4 培养基和主要溶液 | 第47页 |
| 2.3 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.3.1 基因挖掘 | 第47页 |
| 2.3.2 cDNA文库的构建 | 第47-48页 |
| 2.3.3 基因克隆 | 第48-50页 |
| 2.3.4 序列分析 | 第50-51页 |
| 2.3.5 组织表达谱分析 | 第51页 |
| 2.3.6 进化分析 | 第51页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第51-57页 |
| 2.4.1 缅甸蟒cathelicidins的基因挖掘 | 第51-52页 |
| 2.4.2 缅甸蟒cathelicidins完整编码基因的克隆 | 第52-55页 |
| 2.4.3 物种间cahelicidins进化关联分析 | 第55-57页 |
| 2.4.4 CATHPbs的组织表达谱 | 第57页 |
| 2.5 本章小结 | 第57-59页 |
| 3 CATHPbs的体外活性筛选及毒理评价 | 第59-80页 |
| 3.1 引言 | 第59页 |
| 3.2 实验材料 | 第59-60页 |
| 3.2.1 多肽化学合成 | 第59页 |
| 3.2.2 菌株与细胞 | 第59-60页 |
| 3.2.3 实验动物 | 第60页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第60页 |
| 3.3 实验方法 | 第60-69页 |
| 3.3.1 小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养 | 第60-61页 |
| 3.3.2 人静脉血中性粒细胞的分离与培养 | 第61页 |
| 3.3.3 杀菌活性检测 | 第61-62页 |
| 3.3.4 杀菌动力学 | 第62页 |
| 3.3.5 抗细菌生物膜活性检测 | 第62-63页 |
| 3.3.6 抗真菌生物膜活性检测 | 第63-64页 |
| 3.3.7 激光共聚焦显微镜观察 | 第64页 |
| 3.3.8 实时定量PCR | 第64-65页 |
| 3.3.9 酶联免疫吸附试验 | 第65-66页 |
| 3.3.10 细胞毒性检测 | 第66页 |
| 3.3.11 溶血活性检测 | 第66-67页 |
| 3.3.12 肥大细胞脱颗粒实验 | 第67页 |
| 3.3.13 稳定性分析 | 第67-69页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第69-78页 |
| 3.4.1 CATHPbs的体外杀菌活性筛选及杀菌动力学分析 | 第69-70页 |
| 3.4.2 CATHPbs的抗生物膜活性筛选 | 第70-72页 |
| 3.4.3 CATHPbs的体外免疫调节活性筛选 | 第72-74页 |
| 3.4.4 CATHPbs的溶血及细胞毒性分析 | 第74-77页 |
| 3.4.5 CATHPbs的稳定性分析 | 第77-78页 |
| 3.5 本章小结 | 第78-80页 |
| 4 CATHPb1的抗MRSA/VRSA感染模型评价及用药参考 | 第80-85页 |
| 4.1 引言 | 第80页 |
| 4.2 实验材料 | 第80页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第80页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第80页 |
| 4.3 实验方法 | 第80-81页 |
| 4.3.1 病原菌预处理 | 第80页 |
| 4.3.2 不同给药途径 | 第80-81页 |
| 4.3.3 不同给药时间 | 第81页 |
| 4.3.4 不同给药剂量 | 第81页 |
| 4.3.5 MRSA/MSSA/E. coli感染小鼠模型 | 第81页 |
| 4.3.6 统计分析 | 第81页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第81-84页 |
| 4.4.1 不同给药途径对CATHPbl的抗耐药菌感染功效的影响 | 第81页 |
| 4.4.2 不同给药时间对CATHPbl的抗耐药菌感染功效的影响 | 第81-82页 |
| 4.4.3 不同给药剂量下CATHPbl的抗耐药菌感染效果 | 第82-83页 |
| 4.4.4 CATHPbl对多种致病菌感染模型的保护作用考察 | 第83-84页 |
| 4.5 本章小结 | 第84-85页 |
| 5 CATHPb1抗耐药金葡菌感染的多重机制研究 | 第85-106页 |
| 5.1 引言 | 第85页 |
| 5.2 实验材料 | 第85页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第85页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第85页 |
| 5.3 实验方法 | 第85-92页 |
| 5.3.1 中性粒细胞缺陷型鼠模型 | 第85-86页 |
| 5.3.2 单核/巨噬细胞缺陷型鼠模型 | 第86页 |
| 5.3.3 流式细胞仪分析 | 第86页 |
| 5.3.4 酶联免疫吸附试验 | 第86-87页 |
| 5.3.5 胞内ROS检测 | 第87页 |
| 5.3.6 中性粒细胞杀菌效率检测 | 第87-88页 |
| 5.3.7 NETs形成实验 | 第88页 |
| 5.3.8 NETs降解性考察 | 第88-89页 |
| 5.3.9 NETs诱捕病原菌能力的考察 | 第89页 |
| 5.3.10 Western Blotting分析检测 | 第89-90页 |
| 5.3.11 Calcein-AM实验 | 第90页 |
| 5.3.12 扫描电子显微镜观察 | 第90-91页 |
| 5.3.13 结构分析 | 第91页 |
| 5.3.14 数据处理分析 | 第91-92页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第92-105页 |
| 5.4.1 CATHPb1对微生物细胞膜的影响 | 第92-94页 |
| 5.4.2 CATHPb1的体内免疫调节活性依赖于中性粒细胞和单核/巨噬细胞 | 第94-95页 |
| 5.4.3 In vivo CATHPbl对中性粒细胞和单核/巨噬细胞的趋化调控研究 | 第95-96页 |
| 5.4.4 In vivo CATHPbl对感染诱发的炎症的调控作用 | 第96-101页 |
| 5.4.5 CATHPbl对中性粒细胞的功能调控及作用机理研究 | 第101-105页 |
| 5.5 本章小结 | 第105-106页 |
| 6 结论与展望 | 第106-108页 |
| 6.1 结论 | 第106页 |
| 6.2 创新点 | 第106-107页 |
| 6.3 展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 作者简介 | 第119页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第119-121页 |
