摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 幽门螺旋杆菌H.pylori | 第11-13页 |
1.1.1 H.pylori的致病机制 | 第11-12页 |
1.1.2 H.pylori疫苗的研究进展 | 第12-13页 |
1.2 IgY的研究进展 | 第13-19页 |
1.2.1 IgY的结构和功能 | 第14-15页 |
1.2.2 IgY的理化性质 | 第15-16页 |
1.2.3 IgY的作用机制 | 第16页 |
1.2.4 DNA免疫制备IgY | 第16-18页 |
1.2.5 IgY的分离纯化方法 | 第18页 |
1.2.6 IgY的应用 | 第18-19页 |
1.3 本论文的研究意义和主要工作 | 第19-21页 |
第二章 幽门螺旋杆菌HpaA、UreB、UreI基因重组质粒的构建及鉴定 | 第21-49页 |
2.1 前言 | 第21页 |
2.2 实验材料与设备 | 第21-27页 |
2.2.1 仪器 | 第21-22页 |
2.2.2 病毒、菌种、细胞及质粒 | 第22页 |
2.2.3 主要试剂与酶 | 第22-23页 |
2.2.4 溶液配制 | 第23-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-42页 |
2.3.1 引物的设计与合成 | 第28页 |
2.3.2 目的基因的扩增 | 第28-30页 |
2.3.3 pET28a(+)原核表达载体的构建 | 第30-34页 |
2.3.4 pCMV-tag2B真核表达载体的构建 | 第34-38页 |
2.3.5 目标蛋白在两种表达系统中的表达与鉴定 | 第38-42页 |
2.4 实验结果 | 第42-46页 |
2.4.1 目的基因的扩增 | 第42-43页 |
2.4.2 重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
2.4.3 重组质粒基因的序列分析 | 第44-45页 |
2.4.4 重组质粒的原核表达 | 第45页 |
2.4.5 Westernblot检测真核系统重组蛋白的表达 | 第45-46页 |
2.5 讨论 | 第46-47页 |
2.6 本章小结 | 第47-49页 |
第三章 抗幽门螺旋杆菌HpaA、UreB、UreI特异性卵黄抗体的制备及其生物活性的检测 | 第49-60页 |
3.1 前言 | 第49-50页 |
3.2 实验材料与设备 | 第50页 |
3.2.1 仪器 | 第50页 |
3.2.2 实验动物 | 第50页 |
3.2.3 主要试剂 | 第50页 |
3.3 实验方法 | 第50-53页 |
3.3.1 抗原的制备 | 第50-51页 |
3.3.2 蛋鸡的免疫 | 第51-52页 |
3.3.3 稀释蛋黄液的凝集实验 | 第52页 |
3.3.4 IgY的分离、纯化 | 第52页 |
3.3.5 Westernblot检验IgY的特异性 | 第52-53页 |
3.3.6 ELISA检测特异性IgY的效价 | 第53页 |
3.4 实验结果与分析 | 第53-59页 |
3.4.1 卵黄液凝集实验结果 | 第53-54页 |
3.4.2 纯化后的特异性IgY的SDS-PAGE检测 | 第54-55页 |
3.4.3 Westernblot检验IgY的特异性 | 第55-58页 |
3.4.4 ELISA检测特异性IgY抗体的效价 | 第58-59页 |
3.5 讨论 | 第59页 |
3.6 本章小结 | 第59-60页 |
全文总结 | 第60-61页 |
展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
附录 | 第66-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第74页 |