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DNA免疫制备抗幽门螺旋杆菌卵黄抗体的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 幽门螺旋杆菌H.pylori第11-13页
        1.1.1 H.pylori的致病机制第11-12页
        1.1.2 H.pylori疫苗的研究进展第12-13页
    1.2 IgY的研究进展第13-19页
        1.2.1 IgY的结构和功能第14-15页
        1.2.2 IgY的理化性质第15-16页
        1.2.3 IgY的作用机制第16页
        1.2.4 DNA免疫制备IgY第16-18页
        1.2.5 IgY的分离纯化方法第18页
        1.2.6 IgY的应用第18-19页
    1.3 本论文的研究意义和主要工作第19-21页
第二章 幽门螺旋杆菌HpaA、UreB、UreI基因重组质粒的构建及鉴定第21-49页
    2.1 前言第21页
    2.2 实验材料与设备第21-27页
        2.2.1 仪器第21-22页
        2.2.2 病毒、菌种、细胞及质粒第22页
        2.2.3 主要试剂与酶第22-23页
        2.2.4 溶液配制第23-27页
    2.3 实验方法第27-42页
        2.3.1 引物的设计与合成第28页
        2.3.2 目的基因的扩增第28-30页
        2.3.3 pET28a(+)原核表达载体的构建第30-34页
        2.3.4 pCMV-tag2B真核表达载体的构建第34-38页
        2.3.5 目标蛋白在两种表达系统中的表达与鉴定第38-42页
    2.4 实验结果第42-46页
        2.4.1 目的基因的扩增第42-43页
        2.4.2 重组质粒的鉴定第43-44页
        2.4.3 重组质粒基因的序列分析第44-45页
        2.4.4 重组质粒的原核表达第45页
        2.4.5 Westernblot检测真核系统重组蛋白的表达第45-46页
    2.5 讨论第46-47页
    2.6 本章小结第47-49页
第三章 抗幽门螺旋杆菌HpaA、UreB、UreI特异性卵黄抗体的制备及其生物活性的检测第49-60页
    3.1 前言第49-50页
    3.2 实验材料与设备第50页
        3.2.1 仪器第50页
        3.2.2 实验动物第50页
        3.2.3 主要试剂第50页
    3.3 实验方法第50-53页
        3.3.1 抗原的制备第50-51页
        3.3.2 蛋鸡的免疫第51-52页
        3.3.3 稀释蛋黄液的凝集实验第52页
        3.3.4 IgY的分离、纯化第52页
        3.3.5 Westernblot检验IgY的特异性第52-53页
        3.3.6 ELISA检测特异性IgY的效价第53页
    3.4 实验结果与分析第53-59页
        3.4.1 卵黄液凝集实验结果第53-54页
        3.4.2 纯化后的特异性IgY的SDS-PAGE检测第54-55页
        3.4.3 Westernblot检验IgY的特异性第55-58页
        3.4.4 ELISA检测特异性IgY抗体的效价第58-59页
    3.5 讨论第59页
    3.6 本章小结第59-60页
全文总结第60-61页
展望第61-62页
参考文献第62-66页
附录第66-73页
致谢第73-74页
攻读硕士学位期间发表的论文第74页

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