| 论文创新点 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略词对照表 | 第15-18页 |
| 引言 | 第18-36页 |
| 1 食管癌研究现状 | 第18-27页 |
| 1.1 食管癌与晚期化疗 | 第18-20页 |
| 1.2 食管癌的药物敏感性 | 第20-23页 |
| 1.3 食管癌的分子靶向治疗 | 第23页 |
| 1.4 TCGA在癌症研究中的潜在价值 | 第23-27页 |
| 2 PI3K研究现状 | 第27-32页 |
| 2.1 PI3K信号通路简介 | 第27页 |
| 2.2 PI3K通路与肿瘤的关系 | 第27-28页 |
| 2.3 PI3K抑制剂的研究进展 | 第28-32页 |
| 3 内质网应激中的PERK通路研究进展 | 第32-34页 |
| 3.1 内质网应激与非折叠蛋白质反应 | 第32-33页 |
| 3.2 PERK通路的研究现状 | 第33-34页 |
| 3.3 PERK通路与肿瘤药物敏感性 | 第34页 |
| 4 本论文的研究意义、思路和技术路线 | 第34-36页 |
| 4.1 研究意义 | 第34-35页 |
| 4.2 研究思路 | 第35-36页 |
| 第一部分: 高表达的PI3K可影响食管鳞癌的患者生存期和细胞生长 | 第36-47页 |
| 1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 1.1 仪器设备 | 第36页 |
| 1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
| 1.3 溶液配制 | 第37-38页 |
| 1.4 细胞培养 | 第38-39页 |
| 1.5 TCGA的生物信息学分析 | 第39页 |
| 1.6 CCK8法检测LY294002对细胞的生长抑制作用 | 第39页 |
| 1.7 克隆形成实验 | 第39-40页 |
| 1.8 细胞蛋白的提取 | 第40页 |
| 1.9 蛋白浓度的测定 | 第40页 |
| 1.10 Western Blot | 第40-41页 |
| 1.11 统计学分析 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-45页 |
| 2.1 PI3Ks在食管癌组织中高表达 | 第41-42页 |
| 2.2 PI3Ks可显著影响鳞癌患者生存期 | 第42-44页 |
| 2.3 PI3K抑制剂LY294002可影响食管癌细胞生长 | 第44页 |
| 2.4 LY294002可影响食管癌细胞克隆形成 | 第44-45页 |
| 2.5 LY294002可抑制AKT和S6的磷酸化 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 第二部分: PI3K调控的PERK/EIF2α/ATF4信号通路对食管癌细胞的影响 | 第47-56页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| 1.1 仪器设备 | 第47页 |
| 1.2 实验试剂 | 第47页 |
| 1.3 溶液配制 | 第47页 |
| 1.4 细胞培养 | 第47页 |
| 1.5 TCGA生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 1.6 CCK8法检测GSK2656157对细胞的生长抑制作用 | 第48页 |
| 1.7 克隆形成实验 | 第48页 |
| 1.8 细胞蛋白的提取 | 第48页 |
| 1.9 蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| 1.10 Western Blot | 第49页 |
| 1.11 细胞总RNA的提取 | 第49-50页 |
| 1.12 RNA反转录 | 第50页 |
| 1.13 实时荧光定量PCR | 第50-51页 |
| 1.14 统计学分析 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-55页 |
| 2.1 PI3K和PERK/EIF2AK3基因在食管癌患者中同时高表达 | 第51-52页 |
| 2.2 PERK通路关键基因eIF2α/EIF2S1在食管癌组织中显著高表达 | 第52页 |
| 2.3 LY294002可抑制PERK/eIF2α/ATF4通路的活化 | 第52-53页 |
| 2.4 siRNA干扰PERK及ATF4可抑制食管鳞癌细胞的生长 | 第53页 |
| 2.5 PERK抑制剂GSK2656157可抑制eIF2α磷酸化 | 第53-54页 |
| 2.6 GSK2656157可抑制食管癌细胞的生长 | 第54页 |
| 2.7 GSK2656157可抑制食管癌细胞的克隆形成 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55页 |
| 4 结论 | 第55-56页 |
| 第三部分: 联合抑制PI3K和PERK通路对食管鳞癌细胞和患者生存期的影响 | 第56-65页 |
| 1 材料与方法 | 第56-58页 |
| 1.1 仪器设备 | 第56页 |
| 1.2 实验试剂 | 第56页 |
| 1.3 溶液配制 | 第56页 |
| 1.4 细胞培养 | 第56页 |
| 1.5 TCGA的生物信息学分析 | 第56-57页 |
| 1.6 CCK8法检测细胞的生长抑制作用 | 第57页 |
| 1.7 克隆形成实验 | 第57页 |
| 1.8 Western blot | 第57页 |
| 1.9 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第57页 |
| 1.10 统计学分析 | 第57-58页 |
| 2 结果 | 第58-60页 |
| 2.1 PI3K和PERK通路抑制剂联合用药对食管鳞癌细胞增殖影响 | 第58页 |
| 2.2 联合用药对食管鳞癌细胞生长和克隆形成的影响 | 第58-59页 |
| 2.3 联合用药对食管鳞癌细胞PARP剪切和eIF2α磷酸化的影响 | 第59-60页 |
| 2.4 联合用药对食管鳞癌细胞凋亡的影响 | 第60页 |
| 2.5 同时高表达PIK3CB、EIF2AK3或ATF4对食管鳞癌患者生存期的影响 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 4 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 综述 | 第73-83页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 攻读博士期间科研成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
