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西红花球茎腐烂病的致病菌鉴定及其生防菌解淀粉芽孢杆菌C612的筛选和应用

致    谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第16-35页
    1 西红花第16-20页
        1.1 西红花的生产现状第16-17页
        1.2 西红花的应用价值第17-18页
        1.3 西红花病害第18-20页
            1.3.1 西红花球茎腐烂病第18-19页
            1.3.2 西红花的萎花烂花第19页
            1.3.3 西红花的病毒病第19-20页
    2 芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用和主要作用机制第20-25页
        2.1 生物农药及其发展前景第20-21页
        2.2 芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用第21-22页
        2.3 芽孢杆菌生物防治主要作用机制第22-25页
            2.3.1 拮抗作用第22-23页
            2.3.2 溶菌作用第23页
            2.3.3 营养和空间位点的竞争第23-24页
            2.3.4 诱导植物抗性第24-25页
            2.3.5 促进植物生长第25页
    3 解淀粉芽孢杆菌次生代谢产物及应用第25-31页
        3.1 脂肽类抗生素第25-28页
            3.1.1 生防芽孢杆菌脂肽抗生素的种类及特性第26-27页
            3.1.2 芽孢杆菌抗菌脂肽的抑菌机理研究第27-28页
        3.2 聚酮类第28页
        3.3 其他第28-31页
            3.3.1 溶杆菌素第29页
            3.3.2 a-淀粉酶第29页
            3.3.3 β-葡聚糖酶第29页
            3.3.4 溶血栓第29-30页
            3.3.5 蛋白酶第30页
            3.3.6 噬铁素第30页
            3.3.7 生长素第30-31页
            3.3.8 几丁质酶第31页
    4 芽胞杆菌抗菌脂肽分离纯化、鉴定和检测第31-33页
        4.1 芽孢杆菌抗菌脂肽的分离纯化与鉴定第31-32页
        4.2 芽孢杆菌抗菌脂肽的检测第32-33页
    5 本研究的目的和意义第33-35页
第二章 西红花球茎腐烂病的病原物鉴定第35-46页
    1 材料与方法第35-39页
        1.1 实验材料第35-36页
            1.1.1 植物材料第35页
            1.1.2 培养基与试剂第35页
            1.1.3 试剂与溶液配方第35-36页
        1.2 实验方法第36-39页
            1.2.1 病原菌的组织分离、培养和纯化第36页
            1.2.2 病原菌的致病性测定第36-37页
            1.2.3 病原菌的形态特征观察第37页
            1.2.4 病原菌的分子生物学鉴定第37-39页
    2 结果与分析第39-45页
        2.1 西红花建德产区病害调查结果第39-40页
        2.2 病原菌分离纯化及致病性第40-42页
        2.3 致病菌的形态学特征第42-43页
            2.3.1 菌落特征第42页
            2.3.2 光学及扫描显微镜观察第42-43页
        2.4 致病菌的分子生物学鉴定第43-45页
            2.4.1 ITS序列鉴定第43-44页
            2.4.2 TEF-1α序列鉴定第44-45页
    3 讨论第45-46页
第三章 防治西红花球茎腐烂病生防细菌的分离筛选鉴定及生防效果测定第46-57页
    1 材料方法第46-50页
        1.1 供试材料第46页
            1.1.1 生防菌种来源第46页
            1.1.2 培养基第46页
        1.2 拮抗细菌的分离第46-47页
        1.3 拮抗细菌的筛选第47页
        1.4 拮抗细菌的鉴定第47-48页
            1.4.1 培养性状及扫描电镜观察第47页
            1.4.2 分子鉴定第47-48页
        1.5 盆栽试验第48-50页
            1.5.1 试验设计第48-49页
            1.5.2 菌悬液制备第49页
            1.5.3 接种方法第49页
            1.5.4 测定方法第49-50页
            1.5.5 数据分析第50页
    2 结果与分析第50-56页
        2.1 生防菌的分离纯化第50页
        2.2 生防菌的筛选第50-51页
        2.3 拮抗细菌的鉴定第51-53页
            2.3.1 培养性状及扫描电镜观察第51-52页
            2.3.2 分子鉴定第52-53页
        2.4 盆栽实验结果分析第53-56页
            2.4.1 两种镰刀菌的致病性第53页
            2.4.2 接种拮抗菌对西红花球茎腐烂病的防治效果第53-54页
            2.4.3 菌株C612的促生长作用第54-56页
    3 讨论第56-57页
第四章 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质分析第57-70页
    1 材料与方法第57-61页
        1.1 供试菌株第57页
        1.2 培养基第57-58页
        1.3 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质测定第58-59页
            1.3.1 噬铁素活性检测第58页
            1.3.2 蛋白酶活性检测第58页
            1.3.3 几丁质酶活性的测定第58页
            1.3.4 纤维素酶活性测定第58-59页
        1.4 菌株C612抗菌脂肽类基因检测第59-60页
        1.5 解淀粉芽孢杆菌C612胞外抗菌粗提物稳定性分析第60-61页
            1.5.1 抗菌活性测定第60页
            1.5.2 温度对胞外抗菌粗提物活性的影响第60页
            1.5.3 pH对胞外抗菌粗提物活性的影响第60页
            1.5.4 蛋白酶K对胞外抗菌粗提物活性的影响第60-61页
        1.6 抑菌谱测定第61页
    2 结果与分析第61-68页
        2.1 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质测定第61-63页
            2.1.1 产噬铁素活性检测第61-62页
            2.1.2 产蛋白酶活性检测第62页
            2.1.3 产纤维素酶活性检测第62页
            2.1.4 几丁质酶活性检测第62-63页
        2.2 菌株C612胞外抗菌粗提物稳定性分析第63-65页
            2.2.1 胞外粗提物西红花的拮抗活性分析第63页
            2.2.2 温度对胞外抗菌粗提物活性的影响第63-64页
            2.2.3 PH对胞外抗菌粗提物活性的影响第64-65页
            2.2.4 蛋白酶K和胰蛋白酶对胞外抗菌粗提物活性的影响第65页
        2.3 抑菌谱测定第65-67页
        2.4 解淀粉芽孢杆菌C612菌株抗菌脂肽类基因检测第67-68页
            2.4.1 PCR扩增结果第67-68页
    3 讨论第68-70页
第五章 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌脂肽的分离纯化及活性测定第70-81页
    1 材料与方法第70-74页
        1.1 材料第70-71页
            1.1.1 生防菌株第70页
            1.1.2 病原菌第70页
            1.1.3 主要试剂第70页
            1.1.4 主要仪器第70-71页
            1.1.5 培养基第71页
        1.2 解淀粉芽孢杆菌C612活性粗提物制备第71-72页
            1.2.1 发酵液的制备第71页
            1.2.2 脂肽类抗生素的粗提取第71-72页
        1.3 活性物质的分离、纯化第72-73页
            1.3.1 硅胶柱层析第72页
            1.3.2 薄层层析(TLC)第72-73页
            1.3.3 活性物质的纯化第73页
        1.4 分离组分的活性测定第73-74页
        1.5 抑菌物质的LC-MS分析第74页
        1.6 Iturin A最低抑菌活性测定第74页
    2 结果与分析第74-79页
        2.1 活性粗提物的分离纯化及分离条带的活性检测第74-75页
        2.2 活性组分1的LC-MS检测。第75-79页
        2.3 Iturin A最低抑菌活性测定第79页
    3 讨论第79-81页
参考文献第81-92页

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