致 谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第16-35页 |
1 西红花 | 第16-20页 |
1.1 西红花的生产现状 | 第16-17页 |
1.2 西红花的应用价值 | 第17-18页 |
1.3 西红花病害 | 第18-20页 |
1.3.1 西红花球茎腐烂病 | 第18-19页 |
1.3.2 西红花的萎花烂花 | 第19页 |
1.3.3 西红花的病毒病 | 第19-20页 |
2 芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用和主要作用机制 | 第20-25页 |
2.1 生物农药及其发展前景 | 第20-21页 |
2.2 芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用 | 第21-22页 |
2.3 芽孢杆菌生物防治主要作用机制 | 第22-25页 |
2.3.1 拮抗作用 | 第22-23页 |
2.3.2 溶菌作用 | 第23页 |
2.3.3 营养和空间位点的竞争 | 第23-24页 |
2.3.4 诱导植物抗性 | 第24-25页 |
2.3.5 促进植物生长 | 第25页 |
3 解淀粉芽孢杆菌次生代谢产物及应用 | 第25-31页 |
3.1 脂肽类抗生素 | 第25-28页 |
3.1.1 生防芽孢杆菌脂肽抗生素的种类及特性 | 第26-27页 |
3.1.2 芽孢杆菌抗菌脂肽的抑菌机理研究 | 第27-28页 |
3.2 聚酮类 | 第28页 |
3.3 其他 | 第28-31页 |
3.3.1 溶杆菌素 | 第29页 |
3.3.2 a-淀粉酶 | 第29页 |
3.3.3 β-葡聚糖酶 | 第29页 |
3.3.4 溶血栓 | 第29-30页 |
3.3.5 蛋白酶 | 第30页 |
3.3.6 噬铁素 | 第30页 |
3.3.7 生长素 | 第30-31页 |
3.3.8 几丁质酶 | 第31页 |
4 芽胞杆菌抗菌脂肽分离纯化、鉴定和检测 | 第31-33页 |
4.1 芽孢杆菌抗菌脂肽的分离纯化与鉴定 | 第31-32页 |
4.2 芽孢杆菌抗菌脂肽的检测 | 第32-33页 |
5 本研究的目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 西红花球茎腐烂病的病原物鉴定 | 第35-46页 |
1 材料与方法 | 第35-39页 |
1.1 实验材料 | 第35-36页 |
1.1.1 植物材料 | 第35页 |
1.1.2 培养基与试剂 | 第35页 |
1.1.3 试剂与溶液配方 | 第35-36页 |
1.2 实验方法 | 第36-39页 |
1.2.1 病原菌的组织分离、培养和纯化 | 第36页 |
1.2.2 病原菌的致病性测定 | 第36-37页 |
1.2.3 病原菌的形态特征观察 | 第37页 |
1.2.4 病原菌的分子生物学鉴定 | 第37-39页 |
2 结果与分析 | 第39-45页 |
2.1 西红花建德产区病害调查结果 | 第39-40页 |
2.2 病原菌分离纯化及致病性 | 第40-42页 |
2.3 致病菌的形态学特征 | 第42-43页 |
2.3.1 菌落特征 | 第42页 |
2.3.2 光学及扫描显微镜观察 | 第42-43页 |
2.4 致病菌的分子生物学鉴定 | 第43-45页 |
2.4.1 ITS序列鉴定 | 第43-44页 |
2.4.2 TEF-1α序列鉴定 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
第三章 防治西红花球茎腐烂病生防细菌的分离筛选鉴定及生防效果测定 | 第46-57页 |
1 材料方法 | 第46-50页 |
1.1 供试材料 | 第46页 |
1.1.1 生防菌种来源 | 第46页 |
1.1.2 培养基 | 第46页 |
1.2 拮抗细菌的分离 | 第46-47页 |
1.3 拮抗细菌的筛选 | 第47页 |
1.4 拮抗细菌的鉴定 | 第47-48页 |
1.4.1 培养性状及扫描电镜观察 | 第47页 |
1.4.2 分子鉴定 | 第47-48页 |
1.5 盆栽试验 | 第48-50页 |
1.5.1 试验设计 | 第48-49页 |
1.5.2 菌悬液制备 | 第49页 |
1.5.3 接种方法 | 第49页 |
1.5.4 测定方法 | 第49-50页 |
1.5.5 数据分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-56页 |
2.1 生防菌的分离纯化 | 第50页 |
2.2 生防菌的筛选 | 第50-51页 |
2.3 拮抗细菌的鉴定 | 第51-53页 |
2.3.1 培养性状及扫描电镜观察 | 第51-52页 |
2.3.2 分子鉴定 | 第52-53页 |
2.4 盆栽实验结果分析 | 第53-56页 |
2.4.1 两种镰刀菌的致病性 | 第53页 |
2.4.2 接种拮抗菌对西红花球茎腐烂病的防治效果 | 第53-54页 |
2.4.3 菌株C612的促生长作用 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-57页 |
第四章 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质分析 | 第57-70页 |
1 材料与方法 | 第57-61页 |
1.1 供试菌株 | 第57页 |
1.2 培养基 | 第57-58页 |
1.3 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质测定 | 第58-59页 |
1.3.1 噬铁素活性检测 | 第58页 |
1.3.2 蛋白酶活性检测 | 第58页 |
1.3.3 几丁质酶活性的测定 | 第58页 |
1.3.4 纤维素酶活性测定 | 第58-59页 |
1.4 菌株C612抗菌脂肽类基因检测 | 第59-60页 |
1.5 解淀粉芽孢杆菌C612胞外抗菌粗提物稳定性分析 | 第60-61页 |
1.5.1 抗菌活性测定 | 第60页 |
1.5.2 温度对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第60页 |
1.5.3 pH对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第60页 |
1.5.4 蛋白酶K对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第60-61页 |
1.6 抑菌谱测定 | 第61页 |
2 结果与分析 | 第61-68页 |
2.1 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌物质测定 | 第61-63页 |
2.1.1 产噬铁素活性检测 | 第61-62页 |
2.1.2 产蛋白酶活性检测 | 第62页 |
2.1.3 产纤维素酶活性检测 | 第62页 |
2.1.4 几丁质酶活性检测 | 第62-63页 |
2.2 菌株C612胞外抗菌粗提物稳定性分析 | 第63-65页 |
2.2.1 胞外粗提物西红花的拮抗活性分析 | 第63页 |
2.2.2 温度对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第63-64页 |
2.2.3 PH对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第64-65页 |
2.2.4 蛋白酶K和胰蛋白酶对胞外抗菌粗提物活性的影响 | 第65页 |
2.3 抑菌谱测定 | 第65-67页 |
2.4 解淀粉芽孢杆菌C612菌株抗菌脂肽类基因检测 | 第67-68页 |
2.4.1 PCR扩增结果 | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-70页 |
第五章 解淀粉芽孢杆菌C612产生的抗菌脂肽的分离纯化及活性测定 | 第70-81页 |
1 材料与方法 | 第70-74页 |
1.1 材料 | 第70-71页 |
1.1.1 生防菌株 | 第70页 |
1.1.2 病原菌 | 第70页 |
1.1.3 主要试剂 | 第70页 |
1.1.4 主要仪器 | 第70-71页 |
1.1.5 培养基 | 第71页 |
1.2 解淀粉芽孢杆菌C612活性粗提物制备 | 第71-72页 |
1.2.1 发酵液的制备 | 第71页 |
1.2.2 脂肽类抗生素的粗提取 | 第71-72页 |
1.3 活性物质的分离、纯化 | 第72-73页 |
1.3.1 硅胶柱层析 | 第72页 |
1.3.2 薄层层析(TLC) | 第72-73页 |
1.3.3 活性物质的纯化 | 第73页 |
1.4 分离组分的活性测定 | 第73-74页 |
1.5 抑菌物质的LC-MS分析 | 第74页 |
1.6 Iturin A最低抑菌活性测定 | 第74页 |
2 结果与分析 | 第74-79页 |
2.1 活性粗提物的分离纯化及分离条带的活性检测 | 第74-75页 |
2.2 活性组分1的LC-MS检测。 | 第75-79页 |
2.3 Iturin A最低抑菌活性测定 | 第79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-92页 |