| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 综述 | 第11-26页 |
| 1.1 苏云金芽孢杆菌及Cry蛋白的概述 | 第11-17页 |
| 1.1.1 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白 | 第11-12页 |
| 1.1.2 Cry蛋白的分类 | 第12-13页 |
| 1.1.3 杀虫蛋白的结构与功能 | 第13-15页 |
| 1.1.4 Bt蛋白的杀虫机理 | 第15-17页 |
| 1.2 昆虫对转Bt作物抗性的产生及延缓策略 | 第17-20页 |
| 1.2.1 昆虫对转Bt作物抗性的产生 | 第18-19页 |
| 1.2.2 昆虫抗性治理策略 | 第19-20页 |
| 1.3 转基因玉米的研究现状 | 第20-22页 |
| 1.3.1 国际转基因作物产业化现状 | 第20页 |
| 1.3.2 转基因抗虫玉米产业化研究现状 | 第20-22页 |
| 1.4 转基因抗草甘膦作物研究进展及应用 | 第22-25页 |
| 1.4.1 草甘膦的作用机制 | 第22-23页 |
| 1.4.2 抗草甘膦植物基因工程策略 | 第23-25页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 酶类 | 第26-27页 |
| 2.1.3 常用试剂、试剂盒 | 第27页 |
| 2.1.4 供试昆虫与除草剂 | 第27页 |
| 2.1.5 各种培养基的配制 | 第27页 |
| 2.1.6 常用试剂和仪器 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 CTAB法提取植物基因组 | 第27-28页 |
| 2.2.2 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR) | 第28页 |
| 2.2.3 质粒提取 | 第28-29页 |
| 2.2.4 Tail-PCR分析基因边界插入位点 | 第29-31页 |
| 2.2.5 限制性内切酶消化DNA(酶切反应) | 第31-32页 |
| 2.2.6 DNA琼脂糖凝胶电泳及纯化回收 | 第32页 |
| 2.2.7 DNA片段的连接 | 第32-33页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第33页 |
| 2.2.9 转基因植株快速鉴定方法 | 第33-34页 |
| 2.2.10 DNA印迹(Southern Blot) | 第34-37页 |
| 2.2.11 Western Blot印记检测 | 第37-38页 |
| 2.2.12 EPSPS定量检测方法 | 第38-39页 |
| 2.2.13 抗虫蛋白定量检测 | 第39-40页 |
| 2.2.14 转基因玉米植株温室抗虫测定 | 第40页 |
| 2.2.15 转基因玉米植株温室抗药性测定 | 第40-41页 |
| 3 结果及分析 | 第41-53页 |
| 3.1 不同代次转基因玉米的PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2 Tail-PCR检测玉米转基因插入位点 | 第42-44页 |
| 3.3 不同代次的Southern检测结果 | 第44-46页 |
| 3.4 不同代次的Western blot分析 | 第46-47页 |
| 3.5 不同代次的ELISA检测结果 | 第47-49页 |
| 3.6 不同代次的室内生物测定试验结果 | 第49-52页 |
| 3.7 不同代次的转基因玉米温室草甘膦抗药性测定 | 第52-53页 |
| 4 总结与讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录A 分子生物学实验所用溶液 | 第62-65页 |
| 附录B 常用生化试剂及仪器 | 第65-66页 |