| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 1 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 引言 | 第12-13页 |
| 1.2 立题依据 | 第13-17页 |
| 1.2.1 莱氏野村菌及微菌核的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.2 Nrcdc24 和Nrbem1 基因的研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3 研究目的 | 第17页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第17-19页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究创新之处 | 第19-20页 |
| 2 Nrcdc24 和Nrbem1 基因cDNA和基因组的克隆与分析 | 第20-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 试验用菌株 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要设备仪器及厂家 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要培养基和溶液的配制 | 第21页 |
| 2.2 试验方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 莱氏野村菌及其微菌核的培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 莱氏野村菌RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 RACE技术扩全长模板第一链的合成 | 第23页 |
| 2.2.4 RACE技术扩增目的基因cDNA的全长 | 第23-26页 |
| 2.2.5 扩增片段测序 | 第26-28页 |
| 2.2.6 c DNA全长序列的克隆 | 第28-29页 |
| 2.2.7 基因组全长序列的克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.8 Nrcdc24 和Nrbem1 基因的生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.3.1 Nrcdc24 与Nrbem1 的 5'/3' RACE的扩增 | 第30-31页 |
| 2.3.2 Nrcdc24 与Nrbem1 的基因组的克隆和序列分析 | 第31-32页 |
| 2.3.3 Nrcdc24 与Nrbem1 编码蛋白的生物信息学及进化关系分析 | 第32-37页 |
| 3 Nrcdc24 和Nrbem1 基因的表达模式分析 | 第37-43页 |
| 3.1 试验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 试验菌株 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂、仪器和设备 | 第37页 |
| 3.1.3 主要培养基 | 第37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 微菌核的诱导培养及菌体收集 | 第37页 |
| 3.2.2 微菌核各发育时期菌体RNA的提取及cDNA反转录 | 第37-39页 |
| 3.2.3 RT-qPCR引物设计 | 第39页 |
| 3.2.4 定量引物标准曲线的制作 | 第39页 |
| 3.2.5 莱氏野村菌Nrcdc24 与Nrbem1 的表达模式分析 | 第39-40页 |
| 3.2.6 RT-qPCR结果分析 | 第40页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第40-43页 |
| 3.3.1 定量引物的扩增效率及特异性分析 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Nrcdc24 与Nrbem1 的表达模式分析 | 第41-43页 |
| 4 外源性RNAi研究Nrcdc24 与Nrbem1 的功能 | 第43-56页 |
| 4.1 试验材料 | 第43-44页 |
| 4.1.1 试验菌株 | 第43页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第43页 |
| 4.1.4 主要培养基和溶液 | 第43-44页 |
| 4.2 试验方法 | 第44-50页 |
| 4.2.1 莱氏野村菌Nrcdc24 与Nrbem1 干扰引物的设计 | 第44页 |
| 4.2.2 莱氏野村菌Nrcdc24 与Nrbem1 干扰片段扩增 | 第44-45页 |
| 4.2.3 体外合成dsRNA和siRNA片段 | 第45-47页 |
| 4.2.4 siRNA的转化（PEG/LiCl法） | 第47-48页 |
| 4.2.5 siRNA干扰效率的测定 | 第48页 |
| 4.2.6 菌落形态及产孢量的测定 | 第48页 |
| 4.2.7 微菌核形态、数量及生物干重量的测定 | 第48-49页 |
| 4.2.8 cdc42、racA及NOX复合体的表达模式测定 | 第49页 |
| 4.2.9 毒力生测试验 | 第49页 |
| 4.2.10 数据处理 | 第49-50页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第50-56页 |
| 4.3.1 最适siRNA干扰浓度的确定 | 第50页 |
| 4.3.2 菌落形态观察及产孢量的测定分析 | 第50-51页 |
| 4.3.3 菌丝和微菌核形态观察、干重量及数量的测定分析 | 第51-53页 |
| 4.3.4 干扰菌株中cdc42、racA及NOX复合体的表达模式分析 | 第53-54页 |
| 4.3.5 RNAi对斜纹夜蛾幼虫毒力的影响 | 第54-56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| 6 主要结论及后续工作 | 第59-60页 |
| 6.1 主要研究结论 | 第59页 |
| 6.2 后续试验建议 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表和待发表的论文目录 | 第68页 |
