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寄生蜂对棉铃虫凝集素和溶血素的调控及寄主新免疫因子的鉴定

致谢第4-11页
摘要第11-14页
1 文献综述第14-42页
    1.1 昆虫凝集素的特性与功能第14-30页
        1.1.1 凝集素第15页
        1.1.2 C-型凝集素第15-30页
        1.1.3 昆虫凝集素的应用与展望第30页
    1.2 无脊椎动物溶血素的特性、作用机制及功能第30-42页
        1.2.1 理化特性第33-36页
        1.2.2 来源第36页
        1.2.3 溶血组分的分离第36-37页
        1.2.4 表面结合和作用机理第37-39页
        1.2.5 溶血素和补体系统第39-40页
        1.2.6 调控机制第40-41页
        1.2.7 功能第41-42页
2 引言第42-45页
    2.1 研究背景第42-44页
    2.2 目的与意义第44-45页
3 棉铃虫齿唇姬蜂寄生对棉铃虫凝集活性和C-型免疫凝集素基因转录的调控第45-60页
    3.1 材料与方法第46-50页
        3.1.1 昆虫饲养第46页
        3.1.2 棉铃虫齿唇姬蜂对棉铃虫的寄生第46-47页
        3.1.3 寄生蜂对寄主幼虫生长发育的影响第47页
        3.1.4 棉铃虫血淋巴的制备第47页
        3.1.5 蛋白浓度测定第47页
        3.1.6 SDS-PAGE电泳分析第47页
        3.1.7 红细胞的制备第47-48页
        3.1.8 凝集活性的检测第48页
        3.1.9 交叉吸附第48页
        3.1.10 总RNA的提取及c DNA合成第48页
        3.1.11 荧光定量PCR第48-49页
        3.1.12 数据分析第49-50页
    3.2 结果与分析第50-60页
        3.2.1 寄生蜂寄生对棉铃虫幼虫生长发育的影响第50-51页
        3.2.2 寄生蜂寄生对寄主幼虫血淋巴蛋白的影响第51-52页
        3.2.3 棉铃虫不同发育阶段的血淋巴凝集活性第52-54页
        3.2.4 交叉吸附对血淋巴凝集活性的影响第54页
        3.2.5 寄生对寄主幼虫血淋巴凝集素活性的影响第54-55页
        3.2.6 8 个C-型凝集素基因的发育表达谱第55-57页
        3.2.7 8 个C-型凝集素基因的组织表达特性第57页
        3.2.8 寄生对8个C-型凝集素转录水平的影响第57-60页
4 棉铃虫齿唇姬蜂寄生诱导棉铃虫血淋巴溶血因子的高表达第60-72页
    4.1 材料和方法第61-64页
        4.1.1 昆虫饲养第61页
        4.1.2 脊椎动物红细胞的制备第61页
        4.1.3 棉铃虫幼虫血淋巴的制备第61页
        4.1.4 棉铃虫不同发育期血浆及卵和幼虫组织提取物的制备第61页
        4.1.5 棉铃虫齿唇姬蜂寄生后寄主幼虫血浆样品的制备第61-62页
        4.1.6 革兰氏阴性菌感染棉铃虫幼虫第62页
        4.1.7 溶血活性检测第62-63页
        4.1.8 硫酸铵沉淀第63页
        4.1.9 蛋白质浓度的测定第63页
        4.1.10 统计分析第63-64页
    4.2 结果与分析第64-72页
        4.2.1 棉铃虫溶血活性因子的检测第64-67页
        4.2.2 棉铃虫溶血因子的化学性质第67页
        4.2.3 棉铃虫溶血素的时空特性第67-70页
        4.2.4 寄生蜂寄生对溶血因子的影响第70-71页
        4.2.5 溶血活性对细菌感染的应答第71-72页
5 棉铃虫唾液(反吐液)中新凝集素和溶血素的识别与初步鉴定第72-88页
    5.1 材料与方法第73-76页
        5.1.1 昆虫采集与饲养第73页
        5.1.2 幼虫唾液的提取第73页
        5.1.3 组织的制备第73页
        5.1.4 脊椎动物红细胞的制备第73-74页
        5.1.5 蛋白质浓度的测定第74页
        5.1.6 凝集素的识别与初步鉴定第74页
        5.1.7 溶血活性检测第74-75页
        5.1.8 硫酸铵沉淀第75页
        5.1.9 交叉吸附第75页
        5.1.10 膜吸附第75页
        5.1.11 差异蛋白的筛选和质谱分析第75-76页
        5.1.12 统计分析第76页
    5.2 结果与分析第76-88页
        5.2.1 棉铃虫唾液凝集素的检测第76-77页
        5.2.2 唾液凝集活性物质的化学性质第77页
        5.2.3 凝集素的糖结合特性第77-78页
        5.2.4 棉铃虫唾液溶血素的检测第78-81页
        5.2.5 虫龄对棉铃虫幼虫唾液溶血活性的影响第81-82页
        5.2.6 食物对棉铃虫唾液溶血活性的影响第82页
        5.2.7 几种鳞翅目昆虫唾液溶血活性的比较第82-83页
        5.2.8 唾液溶血素的来源第83-85页
        5.2.9 唾液溶血因子的化学性质第85页
        5.2.10 交叉吸附对溶血活性的影响第85-86页
        5.2.11 SDS-PAGE和差异条带ESI质谱分析第86-88页
6 棉铃虫血淋巴溶血素的理化特性第88-96页
    6.1 材料与方法第89-91页
        6.1.1 昆虫采集与饲养第89页
        6.1.2 脊椎动物红细胞的制备第89页
        6.1.3 棉铃虫幼虫血淋巴的制备第89页
        6.1.4 溶血活性检测方法第89-90页
        6.1.5 温度第90页
        6.1.6 浓度第90页
        6.1.7 反应时间第90页
        6.1.8 p H第90页
        6.1.9 EDTA与金属离子第90-91页
        6.1.10 糖抑制第91页
        6.1.11 统计分析第91页
    6.2 结果与分析第91-96页
        6.2.1 温度对血淋巴溶血活性的影响第91-92页
        6.2.2 血淋巴浓度与溶血活性的关系第92页
        6.2.3 作用时间与溶血的关系第92-93页
        6.2.4 p H对溶血活性的影响第93-94页
        6.2.5 EDTA和金属离子对血淋巴溶血活性的影响第94-95页
        6.2.6 糖结合特性第95-96页
7 棉铃虫唾液(反吐液)溶血素的理化特性第96-104页
    7.1 材料与方法第96-98页
        7.1.1 昆虫的采集与饲养第96页
        7.1.2 脊椎动物红细胞的制备第96-97页
        7.1.3 棉铃虫幼虫唾液的制备第97页
        7.1.4 蜂毒毒液的制备第97页
        7.1.5 溶血活性检测方法第97页
        7.1.6 温度第97页
        7.1.7 浓度第97页
        7.1.8 作用时间第97页
        7.1.9 p H第97页
        7.1.10 EDTA与金属离子第97-98页
        7.1.11 糖抑制第98页
        7.1.12 统计分析第98页
    7.2 结果与分析第98-104页
        7.2.1 温度对溶血活性的影响第98-99页
        7.2.2 浓度与溶血活性的关系第99页
        7.2.3 作用时间与溶血的关系第99-100页
        7.2.4 p H对溶血活性的影响第100-101页
        7.2.5 EDTA和金属离子对溶血活性的影响第101-103页
        7.2.6 糖抑制第103-104页
8 结论与讨论第104-117页
    8.1 棉铃虫齿唇姬蜂寄生对棉铃虫凝集活性和C-型免疫凝集素基因转录的调控第104-107页
        8.1.1 寄生显著抑制棉铃虫的生长发育第104页
        8.1.2 寄生导致棉铃虫幼虫血淋巴蛋白发生明显改变第104页
        8.1.3 凝集素表达与寄主发育相关第104-105页
        8.1.4 寄生干扰了寄主棉铃虫自身凝集活性的变化规律第105页
        8.1.5 C-型凝集素参与棉铃虫的生长发育过程第105-106页
        8.1.6 棉铃虫C-型凝集素在组织间的表达存在明显差异第106页
        8.1.7 寄生蜂调控寄主C-型凝集素基因转录水平的方式不同第106-107页
    8.2 棉铃虫齿唇姬蜂寄生诱导棉铃虫血淋巴溶血因子的高表达第107-108页
        8.2.1 棉铃虫血淋巴对多种脊椎动物红细胞具有溶血活性第107页
        8.2.2 血淋巴溶血活性物质的本质为蛋白质第107页
        8.2.3 溶血素在棉铃虫生长发育的不同时期和多个组织广泛分布第107-108页
        8.2.4 血淋巴溶血素与免疫相关第108页
    8.3 棉铃虫唾液(反吐液)中新凝集素和溶血素的识别与初步鉴定第108-111页
        8.3.1 棉铃虫唾液中存在免疫识别因子凝集素第108-109页
        8.3.2 棉铃虫唾液凝集素不同于血淋巴凝集素第109页
        8.3.3 棉铃虫唾液中存在天然的溶血活性物质第109页
        8.3.4 棉铃虫唾液溶血活性与其生长发育相关第109页
        8.3.5 鳞翅目昆虫唾液中普遍存在溶血活性物质第109-110页
        8.3.6 唾液溶血素可能来源于唾腺和中肠第110页
        8.3.7 棉铃虫唾液溶血活性物质的本质是蛋白质第110页
        8.3.8 唾液溶血素与细胞膜结合第110-111页
        8.3.9 唾液溶血素可能是酶类物质第111页
    8.4 棉铃虫血淋巴溶血素的理化特性第111-113页
        8.4.1 血淋巴溶血素具有热不稳定性第111页
        8.4.2 浓度影响血淋巴溶血活性第111-112页
        8.4.3 作用时间影响血淋巴溶血活性第112页
        8.4.4 血淋巴溶血素对酸碱敏感第112页
        8.4.5 EDTA促进血淋巴溶血活性第112页
        8.4.6 钙离子对血淋巴溶血活性具有抑制作用第112-113页
        8.4.7 血淋巴溶血素不与测试的糖结合第113页
    8.5 棉铃虫唾液(反吐液)溶血素的理化特性第113-117页
        8.5.1 唾液溶血素具有一定的热稳定性第113-114页
        8.5.2 浓度影响唾液溶血活性第114页
        8.5.3 作用时间影响唾液溶血效应第114页
        8.5.4 唾液具有广泛的p H耐受度第114-115页
        8.5.5 EDTA对唾液溶血活性具有促进作用第115页
        8.5.6 不同金属离子对唾液溶血活性的影响不同第115-116页
        8.5.7 唾液溶血素不与测试的糖结合第116-117页
参考文献(REFERENCES)第117-134页
ABSTRACT第134-139页

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