| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词 | 第9-19页 |
| 第1章 绪论 | 第19-31页 |
| 1.1 课题研究背景 | 第19-29页 |
| 1.1.1 人类免疫缺陷病毒（HIV）概述 | 第19-20页 |
| 1.1.2 艾滋病疫苗的研究 | 第20-21页 |
| 1.1.3 HIV/AIDS 疫苗面临的挑战 | 第21-22页 |
| 1.1.4 艾滋病疫苗的主要免疫保护策略 | 第22-24页 |
| 1.1.5 艾滋病疫苗的种类及研究进展 | 第24-29页 |
| 1.2 本文主要研究内容及意义 | 第29-31页 |
| 第2章 表达 HIV 基因的 DNA、rMVA 及 rAd5 疫苗联合免疫方案的优化 | 第31-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 疫苗及来源 | 第31页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第31页 |
| 2.1.3 多肽合成 | 第31页 |
| 2.1.4 主要试剂和耗材 | 第31-32页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 小鼠淋巴细胞的分离 | 第32-33页 |
| 2.2.2 ELISpot 实验 | 第33页 |
| 2.2.3 基于流式细胞术的 6 色胞内细胞因子染色方法 | 第33-35页 |
| 2.2.4 三载体疫苗单独应用时的免疫次数、免疫剂量比较 | 第35-36页 |
| 2.2.5 DNA 与 rMVA/rAd5 疫苗联合应用的免疫间隔优化 | 第36页 |
| 2.2.6 三种疫苗联合应用时第二及第三种疫苗的免疫次序及间隔的优化 | 第36-37页 |
| 2.3 实验结果 | 第37-42页 |
| 2.3.1 三载体疫苗单独应用时的免疫次数、免疫剂量比较 | 第37页 |
| 2.3.2 DNA 与 rMVA/rAd5 疫苗联合应用的免疫间隔优化 | 第37-38页 |
| 2.3.3 三种疫苗联合应用时第二及第三种疫苗的免疫次序及间隔优化 | 第38-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-45页 |
| 第3章 表达 HIV CRF01_AE 亚型 env 共享序列优化基因的 DNA 疫苗构建与免疫原性的初步研究 | 第45-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第45-47页 |
| 3.1.1 样品来源 | 第45页 |
| 3.1.2 菌株及质粒 | 第45页 |
| 3.1.3 工具酶和试剂 | 第45-46页 |
| 3.1.4 引物合成 | 第46页 |
| 3.1.5 多肽合成 | 第46页 |
| 3.1.6 实验动物 | 第46页 |
| 3.1.7 实验器材 | 第46-47页 |
| 3.2 实验方法 | 第47-51页 |
| 3.2.1 血液标本基因组 DNA 的提取 | 第47-48页 |
| 3.2.2 血液样本的型别分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 A/E 亚型 env 基因克隆及共有序列的获得 | 第49-50页 |
| 3.2.4 A/E 亚型 env 共享序列密码子优化、全基因合成 | 第50页 |
| 3.2.5 表达密码子优化的 A/E 亚型 env 共享序列的 DNA 疫苗构建 | 第50页 |
| 3.2.6 密码子优化前后 env 基因表达差异的比较 | 第50-51页 |
| 3.2.7 表达 A/E 亚型优化 env 的 DNA 疫苗免疫原性的初步评价 | 第51页 |
| 3.3 实验结果 | 第51-57页 |
| 3.3.1 表达 A/E 亚型 HIV env 共享序列优化基因的 DNA 疫苗构建 | 第51-56页 |
| 3.3.2 表达 A/E 亚型优化 env 的 DNA 疫苗免疫原性的初步评价 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 3.5 小结 | 第58-59页 |
| 第4章 A/E 亚型 env 基因序列分析及假病毒中和敏感性研究 | 第59-79页 |
| 4.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 单克隆抗体、质粒、细胞和病毒株 | 第59页 |
| 4.1.2 血浆样本 | 第59-60页 |
| 4.1.3 主要试剂和耗材 | 第60页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-67页 |
| 4.2.1 从血浆样本中提取病毒 RNA | 第60-61页 |
| 4.2.2 逆转录 PCR | 第61-62页 |
| 4.2.3 血浆样本的型别分析 | 第62页 |
| 4.2.4 HIV-1 CRF01_AE 亚型假病毒的包装 | 第62页 |
| 4.2.5 假病毒感染细胞所需 DEAE-Dextran 最适浓度的确定 | 第62-63页 |
| 4.2.6 假病毒滴度的测定 | 第63-65页 |
| 4.2.7 HIV-1 假病毒辅助受体使用的研究 | 第65-66页 |
| 4.2.8 CRF01_AE 亚型假病毒中和特性研究 | 第66-67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-77页 |
| 4.3.1 HIV-1 CRF01_AE 亚型 env 基因序列特征研究 | 第67-71页 |
| 4.3.2 CRF01_AE 亚型假病毒中和敏感性的研究 | 第71-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-78页 |
| 4.5 小结 | 第78-79页 |
| 第5章 表达 SIV gag/env 基因的 DNA、MVA 及 Ad5 疫苗的构建及鉴定 | 第79-101页 |
| 5.1 实验材料 | 第79-81页 |
| 5.1.1 菌株、质粒、细胞株及病毒株 | 第79页 |
| 5.1.2 主要试剂和酶 | 第79-80页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第80页 |
| 5.1.4 引物合成 | 第80-81页 |
| 5.2 实验方法 | 第81-92页 |
| 5.2.1 基础实验方法 | 第81-84页 |
| 5.2.2 表达 SIV gag/env 优化基因的 DNA 疫苗的构建与鉴定 | 第84-86页 |
| 5.2.3 表达 SIV gag/env 优化基因的重组腺病毒疫苗的构建及鉴定 | 第86-89页 |
| 5.2.4 表达 SIV gag/env 优化基因的重组痘病毒疫苗的构建及鉴定 | 第89-92页 |
| 5.3 实验结果 | 第92-99页 |
| 5.3.1 表达 SIV gag/envT 优化基因的 DNA 疫苗构建及鉴定 | 第92-94页 |
| 5.3.2 表达 SIV gag/envT 优化基因的重组腺病毒疫苗的构建及鉴定 | 第94-96页 |
| 5.3.3 表达 SIV gag/envT 优化基因的重组痘病毒疫苗的构建和鉴定 | 第96-98页 |
| 5.3.4 电镜观察结果 | 第98-99页 |
| 5.4 讨论 | 第99-100页 |
| 5.5 小结 | 第100-101页 |
| 第6章 表达 SIV-gag、envT 基因的三载体疫苗在小鼠体内联合免疫研究 | 第101-111页 |
| 6.1 实验材料 | 第101-102页 |
| 6.1.1 多肽合成 | 第101页 |
| 6.1.2 实验动物 | 第101页 |
| 6.1.3 主要试剂和耗材 | 第101页 |
| 6.1.4 主要仪器 | 第101-102页 |
| 6.2 实验方法 | 第102-105页 |
| 6.2.1 小鼠淋巴细胞的分离 | 第102页 |
| 6.2.2 ELISpot 实验 | 第102-103页 |
| 6.2.3 表达 SIV gag/envT 的 rAd5 与 rMVA 不同剂量免疫效果的评价 | 第103-104页 |
| 6.2.4 表达 SIV gag/envT 的三载体疫苗联合免疫效果的评价 | 第104-105页 |
| 6.3 实验结果 | 第105-107页 |
| 6.3.1 表达 SIV gag/envT 的 rAd5 与 rMVA 疫苗不同剂量单独免疫效果的评价 | 第105-106页 |
| 6.3.2 小鼠体内 SIV 三载体疫苗联合免疫效果的评价 | 第106-107页 |
| 6.4 讨论 | 第107-108页 |
| 6.5 小结 | 第108-111页 |
| 结论 | 第111-115页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 附录 | 第125-133页 |
| 攻读博士学位期间的主要成果 | 第133-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
