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SmD1蛋白表达与免疫原性研究及其抗体检测初步应用

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
引言第11-13页
第一章 文献研究第13-22页
    1.1 系统性红斑狼疮及临床诊断免疫学标准第13页
    1.2 抗Sm抗体与SLE第13-16页
    1.3 SmD1理化特性第16-19页
    1.4 抗SmD1抗体与SLE第19-20页
    1.5 SLE与主要相关的自身抗体第20-21页
    1.6 小结第21-22页
第二章 大肠杆菌SmD1蛋白表达与纯化第22-41页
    2.1 材料与方法第22-35页
        2.1.1 主要试剂第22-23页
        2.1.2 主要仪器第23-24页
        2.1.3 载体第24-25页
        2.1.4 主要溶液配制第25-30页
        2.1.5 方法第30-35页
    2.2 结果第35-38页
        2.2.1 PCR扩增目的基因第35-36页
        2.2.2 基因克隆与酶切鉴定第36-37页
        2.2.3 目的基因序列分析第37页
        2.2.4 重组蛋白的诱导表达第37-38页
        2.2.5 重组蛋白的纯化第38页
    2.3 讨论第38-41页
第三章 杆状病毒/昆虫细胞SmD1蛋白表达与纯化第41-62页
    3.1 材料与方法第41-55页
        3.1.1 主要试剂第41-42页
        3.1.2 主要仪器第42-43页
        3.1.3 主要溶液配制第43-47页
        3.1.4 方法第47-55页
    3.2 结果第55-58页
        3.2.1 重组转移质粒pFastBac~(TM)1-SmD1的构建与鉴定第55-56页
        3.2.2 重组杆粒Bacmid-SmD1的构建与鉴定第56-57页
        3.2.3 重组杆状病毒的包装第57页
        3.2.4 目的基因表达与蛋白纯化第57页
        3.2.5 重组蛋白Western-blot第57-58页
    3.3 讨论第58-62页
第四章 SmD1蛋白免疫原性研究第62-73页
    4.1 材料与方法第62-67页
        4.1.1 材料第62-63页
        4.1.2 方法第63-66页
        4.1.3 统计学处理第66-67页
    4.2 结果第67-69页
        4.2.1 免疫刺激抗Sm抗体产生及动态变化第67页
        4.2.2 免疫诱导抗dsDNA抗体产生及动态变化第67-68页
        4.2.3 ANA谱检测结果第68页
        4.2.4 T淋巴细胞亚群分类第68-69页
        4.2.5 ELISPOT测定分泌IFN-γ的T淋巴细胞频数第69页
    4.3 讨论第69-73页
第五章 抗SmD1抗体ELISA试剂盒的研制与初步应用第73-85页
    5.1 材料与方法第73-80页
        5.1.1 实验器材与试剂配制第73-75页
        5.1.2 研究对象第75-76页
        5.1.3 间接ELISA方法建立第76-77页
        5.1.4 正常参考值确定第77-78页
        5.1.5 溯源性第78-79页
        5.1.6 准确度第79页
        5.1.7 检测限第79页
        5.1.8 重复性第79页
        5.1.9 线性第79-80页
        5.1.10 热稳定性第80页
    5.2 结果第80-82页
        5.2.1 最佳抗原包被浓度与样本稀释倍数选择结果第80页
        5.2.2 显色时间确定结果第80页
        5.2.3 正常参考值值确定结果第80页
        5.2.4 标准品定值与不确定度测量结果第80-81页
        5.2.5 准确度结果第81页
        5.2.6 检测限结果第81页
        5.2.7 重复性结果第81页
        5.2.8 线性结果第81-82页
        5.2.9 热稳定性结果第82页
        5.2.10 自身免疫性疾病患者血清抗SmD1抗体ELISA检测结果第82页
        5.2.11 检测SLE患者抗Sm抗体结果第82页
    5.3 讨论第82-85页
结语第85-87页
参考文献第87-97页
附录第97-105页
在校期间发表论文情况第105-106页
致谢第106-107页
详细摘要第107-114页

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