中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
縮略词表 | 第7-11页 |
第一部分 前言 | 第11-25页 |
1.1 蛋白磷酸酶调节植物激素信号转导的研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 蛋白磷酸酶的分类 | 第11-12页 |
1.1.2 PPP家族磷酸酶参与植物激素信号转导研究进展 | 第12-15页 |
1.1.3 植物PPl磷酸酶的研究进展 | 第15-17页 |
1.2 赤霉素(GA)调节植物发育的研究进展 | 第17-23页 |
1.2.1 GA的合成过程及其调控 | 第17-21页 |
1.2.2 GA信号传导途径 | 第21-22页 |
1.2.3 DELLA蛋白在调节植物发育过程中的重要作用 | 第22-23页 |
1.2.4 翻译后修饰对DELLA蛋白稳定性的调控 | 第23页 |
1.3 本论文的研究意义 | 第23-25页 |
第二部分 材料和方法 | 第25-44页 |
2.1 实验材料 | 第25-29页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.4 酶、试剂和试剂盒 | 第26页 |
2.1.5 常用培养基配制 | 第26-27页 |
2.1.6 常用抗生素配制 | 第27页 |
2.1.7 常用溶液配制 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-44页 |
2.2.1 植物材料的诱变和筛选 | 第29页 |
2.2.2 拟南芥培养 | 第29页 |
2.2.3 开花时间分析 | 第29页 |
2.2.4 单个花药中花粉总量及可育花粉比例的统计 | 第29-30页 |
2.2.5 突变体单株果荚数及种子产量分析 | 第30页 |
2.2.6 基因的图位克隆 | 第30-32页 |
2.2.7 载体构建及农杆菌转化拟南芥植株 | 第32-37页 |
2.2.8 定量PCR | 第37-39页 |
2.2.9 GUS染色 | 第39页 |
2.2.10 叶片原生质体中的瞬时表达 | 第39-40页 |
2.2.11 液相色谱测定植物体中总GAs的含量 | 第40-41页 |
2.2.12 GA和PAC处理 | 第41页 |
2.2.13 蛋白的免疫印迹 | 第41页 |
2.2.14 竞争性pull-down分析 | 第41-42页 |
2.2.15 双分子荧光互补和烟草叶片中的瞬时表达 | 第42页 |
2.2.16 TOPP4磷酸酶活性测定 | 第42页 |
2.2.17 体外去磷酸化检测 | 第42-43页 |
2.2.18 双向电泳 | 第43-44页 |
第三部分 结果与分析 | 第44-82页 |
3.1 拟南芥极度矮化突变体topp4-1的筛选 | 第44-51页 |
3.2 g39突变基因的定位 | 第51-54页 |
3.3 在topp4-1突变体中超表达正常TOPP4基因可以恢复其突变表型 | 第54-56页 |
3.4 在野生型中用artificial microRNA技术降低TOPP4基因的表达可引起矮化表型 | 第56-59页 |
3.5 野生型中超表达TOPP4引起器官增大 | 第59-61页 |
3.6 突变topp4-1蛋白对植株生长有显性负效应 | 第61-63页 |
3.7 TOPP4基因在拟南芥植株中广泛表达 | 第63-65页 |
3.8 TOPP4主要定位在细胞核和细胞膜上 | 第65-66页 |
3.9 TOPP4促进了GA的合成 | 第66-69页 |
3.10 topp4-1突变体对外源GA不敏感,GA促进了TOPP4蛋白的积累 | 第69-71页 |
3.11 TOPP4与RGA和GAI有遗传上的相互作用,位于它们的上游 | 第71-74页 |
3.12 TOPP4促进了GA诱导的DELLA蛋白的降解 | 第74-77页 |
3.13 TOPP4与DELLA蛋白在体内有直接相互作用,topp4-1突变蛋白可以与TOPP4蛋白竞争性结合DELLA蛋白 | 第77-78页 |
3.14 TOPP4和topp4-1蛋白磷酸酶活性测定 | 第78-79页 |
3.15 TOPP4能将DELLA蛋白去磷酸化 | 第79-82页 |
第四部分 讨论 | 第82-88页 |
4.1 TOPP4调控了赤霉素信号通路 | 第82-84页 |
4.2 TOPP4的246位苏氨酸对其功能的影响 | 第84-85页 |
4.3 TOPP4对其它植物发育过程的影响 | 第85-88页 |
4.3.1 TOPP4影响了细胞分裂和细胞扩张 | 第85页 |
4.3.2 TOPP4调节了表皮细胞的形态 | 第85-86页 |
4.3.3 TOPP4可能位于光和GA共同调控的信号网络中 | 第86页 |
4.3.4 TOPP4可能调节了GA合成 | 第86-87页 |
4.3.5 topp4-1突变体表型与发育时期有关 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-97页 |
在学期间的研究成果 | 第97-98页 |
致谢 | 第98页 |