| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 主要英文缩写词 | 第6-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 HPV 相关背景知识 | 第11-19页 |
| 1.1.1 HPV 基因型及流行现状 | 第11-12页 |
| 1.1.2 HPV 的结构、功能及生物学性质 | 第12页 |
| 1.1.3 HPV 感染的致癌机制 | 第12-15页 |
| 1.1.4 HPV 和肿瘤、皮肤病发生的关系 | 第15-17页 |
| 1.1.5 HPV 疫苗简介 | 第17-19页 |
| 1.2 HPV 治疗性疫苗的国内外研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.1 活载体疫苗 | 第19-20页 |
| 1.2.2 多肽/蛋白疫苗 | 第20页 |
| 1.2.3 DNA 疫苗 | 第20-21页 |
| 1.2.4 DC 疫苗 | 第21-23页 |
| 1.3 HPV 治疗性疫苗研究的目的和意义 | 第23页 |
| 1.4 本课题的研究内容 | 第23-24页 |
| 1.4.1 基于 HPV16 E6E7 基因疫苗的抗肿瘤免疫反应研究 | 第23页 |
| 1.4.2 优化突变融合基因 HPV18 E6E7 的去致癌性检测 | 第23-24页 |
| 1.5 本课题研究技术路线 | 第24-25页 |
| 1.5.1 基于 HPV16 E6E7 基因疫苗的抗肿瘤免疫反应研究 | 第24页 |
| 1.5.2 优化突变融合基因 HPV18 E6E7 的去致癌性检测 | 第24-25页 |
| 第2章 基于 HPV16 E6E7 基因疫苗的抗肿瘤免疫反应研究 | 第25-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 疫苗成分及来源 | 第25页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.3 其他试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.5 多肽 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.2.1 重组 DNA 疫苗 pVR-HPV16-2 的鉴定和扩增 | 第26页 |
| 2.2.2 重组腺病毒疫苗的扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.3 重组腺病毒疫苗活性检测 | 第27页 |
| 2.2.4 重组腺病毒疫苗的纯化和滴度测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 制备小鼠树突细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.6 检测疫苗免疫原性小鼠免疫方案 | 第29-30页 |
| 2.2.7 脾脏淋巴细胞的采集 | 第30页 |
| 2.2.8 酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测细胞免疫反应 | 第30页 |
| 2.2.9 移植保护实验的免疫方案 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 重组 DNA 疫苗 pVR-HPV16 的鉴定 | 第31页 |
| 2.3.2 重组腺病毒疫苗活性检测 | 第31-32页 |
| 2.3.3 重组腺病毒的滴度测定 | 第32页 |
| 2.3.4 rAd-HPV16 感染 DC 细胞的条件 | 第32-33页 |
| 2.3.5 细胞免疫反应 | 第33-34页 |
| 2.3.6 移植保护实验小鼠肿瘤生长情况及存活率统计 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 优化突变融合基因 HPV18 E6E7 的去致癌性研究 | 第37-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第37-38页 |
| 3.1.2 细胞株 | 第38页 |
| 3.1.3 工具酶与其他试剂 | 第38页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第38页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第38-39页 |
| 3.2 实验内容 | 第39-41页 |
| 3.2.1 重组 pcDNA 质粒的酶切鉴定 | 第39页 |
| 3.2.2 重组 pcDNA 质粒在 293FT 细胞中的瞬时表达 | 第39页 |
| 3.2.3 构建稳定表达 HPV18 E6E7 基因的 NIH 3T3 细胞系 | 第39-41页 |
| 3.2.4 软琼脂集落形成实验 | 第41页 |
| 3.2.5 裸鼠致瘤实验 | 第41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-48页 |
| 3.3.1 重组 pcDNA 质粒的酶切鉴定 | 第41-42页 |
| 3.3.2 重组 pcDNA 质粒在 293FT 细胞中的瞬时表达 | 第42-43页 |
| 3.3.3 构建稳定表达 HPV18 E6E7 基因的 NIH 3T3 细胞系 | 第43-45页 |
| 3.3.4 软琼脂集落形成实验 | 第45-46页 |
| 3.3.5 裸鼠致瘤实验 | 第46-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-65页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
