摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第8-13页 |
1.1 CD81 的结构 | 第9-10页 |
1.1.1 胞外区 | 第9-10页 |
1.1.2 跨膜区 | 第10页 |
1.1.3 胞内区 | 第10页 |
1.2 CD81 对 B 细胞的作用 | 第10-11页 |
1.3 CD81 对 T 细胞的作用 | 第11页 |
1.4 CD81 与软脂酰化 | 第11-12页 |
1.5 结语 | 第12-13页 |
2 七鳃鳗 CD81 的分子克隆 | 第13-27页 |
2.1 材料 | 第13-14页 |
2.1.1 实验材料 | 第13页 |
2.1.2 仪器设备 | 第13页 |
2.1.3 药品及试剂 | 第13-14页 |
2.2 方法 | 第14-22页 |
2.2.1 七鳃鳗的造血组织研究 | 第14-16页 |
2.2.2 脂肪体总 RNA 的提取 | 第16-17页 |
2.2.3 引物设计 | 第17页 |
2.2.4 逆转录-聚合酶链式反应扩增 | 第17-19页 |
2.2.5 CD81 目的片段的切胶回收 | 第19页 |
2.2.6 CD81 目的片段与载体连接和转化 | 第19-20页 |
2.2.7 重组质粒的鉴定 | 第20-21页 |
2.2.8 重组质粒的提取及测序 | 第21页 |
2.2.9 实验所得的序列分析 | 第21-22页 |
2.3 结果 | 第22-25页 |
2.3.1 脂肪体总 RNA 的提取 | 第22页 |
2.3.2 CD81 目的片段扩增 | 第22-25页 |
2.4 讨论 | 第25-26页 |
2.5 小结 | 第26-27页 |
3 CD81 氨基酸序列的生物信息学分析 | 第27-46页 |
3.1 分析和预测 CD81 蛋白的网站和软件 | 第27页 |
3.2 结果 | 第27-43页 |
3.2.1 一级结构分析 | 第27-31页 |
3.2.2 功能结构域预测 | 第31页 |
3.2.3 二级结构预测 | 第31-33页 |
3.2.4 三级结构模拟 | 第33页 |
3.2.5 抗原表位预测 | 第33-34页 |
3.2.6 同源序列比对 | 第34-36页 |
3.2.7 保守性分析 | 第36-41页 |
3.2.8 系统发育分析 | 第41-43页 |
3.3 讨论 | 第43-44页 |
3.4 小结 | 第44-46页 |
4 半定量 PCR 法检测 CD81 在七鳃鳗各组织中的相对表达量 | 第46-52页 |
4.1 材料 | 第46-47页 |
4.1.1 实验材料 | 第46页 |
4.1.2 实验所用仪器设备 | 第46页 |
4.1.3 药品及试剂 | 第46-47页 |
4.2 方法 | 第47-48页 |
4.2.1 混合菌刺激七鳃鳗 | 第47页 |
4.2.2 白细胞的分离及组织提取 | 第47页 |
4.2.3 脂肪体及组织总 RNA 的提取 | 第47页 |
4.2.4 利用半定量 PCR 法测定靶基因相对表达量 | 第47-48页 |
4.3 结果 | 第48-50页 |
4.3.1 组织总 RNA 提取 | 第48页 |
4.3.2 CD81 目的片段 PCR 扩增 | 第48-49页 |
4.3.3 七鳃鳗各组织中 CD81 的相对表达量 | 第49-50页 |
4.4 讨论 | 第50-51页 |
4.5 小结 | 第51-52页 |
5 重组 CD81 载体的构建 | 第52-56页 |
5.1 材料 | 第52页 |
5.1.1 实验材料 | 第52页 |
5.1.2 仪器设备 | 第52页 |
5.1.3 药品及试剂 | 第52页 |
5.2 方法 | 第52-54页 |
5.2.1 设计引物 | 第52-53页 |
5.2.2 PCR 扩增 | 第53页 |
5.2.3 目的片段回收 | 第53-54页 |
5.2.4 目的片段与载体相连与转化 | 第54页 |
5.2.5 重组表达菌的鉴定 | 第54页 |
5.3 结果 | 第54-55页 |
5.4 讨论 | 第55页 |
5.5 小结 | 第55-56页 |
6 结论 | 第56-57页 |
本论文的创新点 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-61页 |
附录A 脂肪体 cDNA 文库中和 CD81 有较高同源性的序列 | 第61-62页 |
附录B 成功克隆的七鳃鳗 CD81 目的片段 | 第62-63页 |
附录C CD81 在不同物种中的氨基酸序列(FASTA 格式) | 第63-69页 |
研究生期间研究成果和发表文章 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |