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七鳃鳗(Lampetra japonica)CD81的克隆表达及生物信息学分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第8-13页
    1.1 CD81 的结构第9-10页
        1.1.1 胞外区第9-10页
        1.1.2 跨膜区第10页
        1.1.3 胞内区第10页
    1.2 CD81 对 B 细胞的作用第10-11页
    1.3 CD81 对 T 细胞的作用第11页
    1.4 CD81 与软脂酰化第11-12页
    1.5 结语第12-13页
2 七鳃鳗 CD81 的分子克隆第13-27页
    2.1 材料第13-14页
        2.1.1 实验材料第13页
        2.1.2 仪器设备第13页
        2.1.3 药品及试剂第13-14页
    2.2 方法第14-22页
        2.2.1 七鳃鳗的造血组织研究第14-16页
        2.2.2 脂肪体总 RNA 的提取第16-17页
        2.2.3 引物设计第17页
        2.2.4 逆转录-聚合酶链式反应扩增第17-19页
        2.2.5 CD81 目的片段的切胶回收第19页
        2.2.6 CD81 目的片段与载体连接和转化第19-20页
        2.2.7 重组质粒的鉴定第20-21页
        2.2.8 重组质粒的提取及测序第21页
        2.2.9 实验所得的序列分析第21-22页
    2.3 结果第22-25页
        2.3.1 脂肪体总 RNA 的提取第22页
        2.3.2 CD81 目的片段扩增第22-25页
    2.4 讨论第25-26页
    2.5 小结第26-27页
3 CD81 氨基酸序列的生物信息学分析第27-46页
    3.1 分析和预测 CD81 蛋白的网站和软件第27页
    3.2 结果第27-43页
        3.2.1 一级结构分析第27-31页
        3.2.2 功能结构域预测第31页
        3.2.3 二级结构预测第31-33页
        3.2.4 三级结构模拟第33页
        3.2.5 抗原表位预测第33-34页
        3.2.6 同源序列比对第34-36页
        3.2.7 保守性分析第36-41页
        3.2.8 系统发育分析第41-43页
    3.3 讨论第43-44页
    3.4 小结第44-46页
4 半定量 PCR 法检测 CD81 在七鳃鳗各组织中的相对表达量第46-52页
    4.1 材料第46-47页
        4.1.1 实验材料第46页
        4.1.2 实验所用仪器设备第46页
        4.1.3 药品及试剂第46-47页
    4.2 方法第47-48页
        4.2.1 混合菌刺激七鳃鳗第47页
        4.2.2 白细胞的分离及组织提取第47页
        4.2.3 脂肪体及组织总 RNA 的提取第47页
        4.2.4 利用半定量 PCR 法测定靶基因相对表达量第47-48页
    4.3 结果第48-50页
        4.3.1 组织总 RNA 提取第48页
        4.3.2 CD81 目的片段 PCR 扩增第48-49页
        4.3.3 七鳃鳗各组织中 CD81 的相对表达量第49-50页
    4.4 讨论第50-51页
    4.5 小结第51-52页
5 重组 CD81 载体的构建第52-56页
    5.1 材料第52页
        5.1.1 实验材料第52页
        5.1.2 仪器设备第52页
        5.1.3 药品及试剂第52页
    5.2 方法第52-54页
        5.2.1 设计引物第52-53页
        5.2.2 PCR 扩增第53页
        5.2.3 目的片段回收第53-54页
        5.2.4 目的片段与载体相连与转化第54页
        5.2.5 重组表达菌的鉴定第54页
    5.3 结果第54-55页
    5.4 讨论第55页
    5.5 小结第55-56页
6 结论第56-57页
本论文的创新点第57-58页
参考文献第58-61页
附录A 脂肪体 cDNA 文库中和 CD81 有较高同源性的序列第61-62页
附录B 成功克隆的七鳃鳗 CD81 目的片段第62-63页
附录C CD81 在不同物种中的氨基酸序列(FASTA 格式)第63-69页
研究生期间研究成果和发表文章第69-70页
致谢第70页

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