| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略词 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1.1 轴突导向经典模型 | 第14-19页 |
| 1.1.1 轴突投射——双侧对称动物的中线轴突导向模型 | 第15-16页 |
| 1.1.2 局部树突和轴突分布——神经元的自我规避(Self-avoidance)和镶嵌分布(Tiling) | 第16-19页 |
| 1.2 果蝇作为研究成束排列的研究模型的优势 | 第19-22页 |
| 1.3 轴突导向分子概述 | 第22-34页 |
| 1.3.1 Netrins和其受体的结构与功能概述 | 第22-25页 |
| 1.3.2 Slits和其受体的结构与功能概述 | 第25-27页 |
| 1.3.3 Semaphorins和其受体的结构与功能概述 | 第27-28页 |
| 1.3.4 Ephrins和其受体的结构与功能概述 | 第28-32页 |
| 1.3.5 轴突导向分子相关研究的总结和展望 | 第32-34页 |
| 1.4 本研究拟解决的问题 | 第34-36页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第36-52页 |
| 2.1 果蝇遗传学,培养与基因组DNA提取 | 第36-37页 |
| 2.1.1 果蝇遗传学 | 第36-37页 |
| 2.1.2 果蝇培养 | 第37页 |
| 2.1.3 果蝇基因组DNA的提取 | 第37页 |
| 2.2 质粒构建,酚氯仿抽提和融合蛋白的表达与纯化 | 第37-41页 |
| 2.2.1 质粒构建 | 第37-38页 |
| 2.2.2 酚氯仿抽提 | 第38-39页 |
| 2.2.3 GST融合蛋白的表达与纯化 | 第39-40页 |
| 2.2.4 麦芽糖融合蛋白的表达与纯化 | 第40-41页 |
| 2.2.5 His融合蛋白的表达与纯化 | 第41页 |
| 2.3 Western blot蛋白免疫印迹,Pull down与免疫共沉淀 | 第41-43页 |
| 2.3.1 Western Blot免疫印迹和考马斯亮蓝染色 | 第41-42页 |
| 2.3.2 GST-Pull down | 第42-43页 |
| 2.3.3 免疫共沉淀 | 第43页 |
| 2.4 免疫组化实验 | 第43-46页 |
| 2.4.1 抗体的纯化 | 第43-45页 |
| 2.4.2 果蝇大脑免疫荧光染色(Whole head staining) | 第45-46页 |
| 2.5 RNA的提取,体外逆转录和定量PCR | 第46-47页 |
| 2.5.1 RNA提取: | 第46页 |
| 2.5.2 体外逆转录: | 第46-47页 |
| 2.5.3 实时定量PCR | 第47页 |
| 2.6 S2R~+细胞培养,转染与免疫荧光染色 | 第47-49页 |
| 2.6.1 S2R~+细胞培养 | 第47-48页 |
| 2.6.2 S2R~+细胞转染 | 第48页 |
| 2.6.3 S2R~+细胞免疫荧光染色 | 第48-49页 |
| 2.7 表型分析与图像分析 | 第49-50页 |
| 2.7.1 表型分析 | 第49页 |
| 2.7.2 图像分析 | 第49-50页 |
| 2.8 数据分析与统计 | 第50-52页 |
| 第三章 实验结果 | 第52-78页 |
| 3.1 DNrx在发育中的Lamina神经元中高表达 | 第52-55页 |
| 3.1.1 DNrx在果蝇Medulla中的表达是动态变化的 | 第52-54页 |
| 3.1.2 DNrx在Lamina神经元中表达 | 第54-55页 |
| 3.2 DNrx表达在L4神经元侧枝和轴突末端并限制其轴突在单个神经束中生长 | 第55-59页 |
| 3.2.1 dnrx突变体中L4神经元异常投射到邻近神经束中 | 第55-57页 |
| 3.2.2 DNrx在L4神经元的侧枝和轴突末端高表达 | 第57页 |
| 3.2.3 L4神经元轴突投射到单个神经束是细胞自主过程 | 第57-59页 |
| 3.3 dnrx突变体中L4神经元轴突异常投射到邻近神经束发生在果蝇蛹中期 | 第59-62页 |
| 3.4 DNrx与Ephrin在体内具有相互作用 | 第62-65页 |
| 3.4.1 L4神经元中有Ephrin表达 | 第62-63页 |
| 3.4.2 DNrx~(1760-1813)与Ephrin相互结合 | 第63-65页 |
| 3.5 dnrx突变体中L4神经元轴突异常投射是由于Ephrin功能异常 | 第65-70页 |
| 3.5.1 dnrx突变体中Ephrin的蛋白质水平与野生型相比有所降低 | 第65-67页 |
| 3.5.2 dnrx突变体由于Ephrin功能异常导致L4神经元轴突异常投射到邻近神经束中 | 第67-68页 |
| 3.5.3 邻近神经束中L4神经元表达的Eph提供了排斥信号 | 第68-70页 |
| 3.6 DNrx促进Ephrin在细胞膜上聚集介导L4神经元轴突在同一个神经束中投射 | 第70-72页 |
| 3.6.1 DNrx促进Ephrin聚集在细胞膜上 | 第70-71页 |
| 3.6.2 DNrx与Ephrin的相互作用介导L4神经元轴突投射到单个神经束中 | 第71-72页 |
| 3.7 DNlg4募集DNrx在细胞膜上聚集后调节L4神经元轴突投射在单个神经束 | 第72-76页 |
| 3.7.1 DNrx胞外端在L4神经元轴突投射中起重要作用 | 第72-73页 |
| 3.7.2 DNlg4介导DNrx在L4神经元轴突上聚集以及随后的Ephrin的聚集 | 第73-75页 |
| 3.7.3 Tm2神经元上的DNlg4介导L4神经元的轴突投射 | 第75-76页 |
| 3.8 结论 | 第76-78页 |
| 第四章 讨论和展望 | 第78-84页 |
| 4.1 Eph/Ephrin信号通路调控L4神经元轴突投射在一个神经束中 | 第78-80页 |
| 4.2 DNrx促进Ephrin在细胞膜上的聚集 | 第80-81页 |
| 4.3 在dnrx突变体中L4神经元轴突投射异常的生理意义 | 第81-82页 |
| 4.4 NRX基因突变引起的神经精神类疾病可能与其参与轴突导向功能有关 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-102页 |
| 致谢 | 第102-106页 |
| 作者简介 | 第106-107页 |
| 个人简介 | 第106页 |
| 参与糧课题 | 第106页 |
| 科研成果 | 第106-107页 |
| 参加学术会议 | 第107页 |
