| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 植物雄性不育 | 第12-17页 |
| 1.1 植物雄性不育分子机制 | 第12-13页 |
| 1.2 植物花粉败育 | 第13-15页 |
| 1.2.1 植物细胞质雄性不育系花粉败育时期 | 第13-14页 |
| 1.2.2 玉米细胞质雄性不育花粉败育时期 | 第14-15页 |
| 1.3 植物细胞质雄性不育系与保持系差异 | 第15-17页 |
| 1.3.1 植物细胞质雄性不育系与保持系生理生化差异 | 第15-16页 |
| 1.3.2 植物细胞质雄性不育系与保持系基因编辑差异 | 第16-17页 |
| 1.3.3 植物细胞质雄性不育系与保持系蛋白质差异 | 第17页 |
| 2 植物microRNA与花粉发育 | 第17-29页 |
| 2.1 植物microRNA | 第17-27页 |
| 2.1.1 植物microRNA的发现及特征 | 第17-18页 |
| 2.1.2 植物microRNA的合成及作用机制 | 第18-19页 |
| 2.1.3 植物microRNA的生物学功能 | 第19-22页 |
| 2.1.4 植物microRNA的研究方法 | 第22-27页 |
| 2.2 植物花粉发育相关miRNA的研究 | 第27-29页 |
| 3 目的意义 | 第29-30页 |
| 4 实验材料及方法 | 第30-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第30页 |
| 4.2 实验方法 | 第30-42页 |
| 4.2.1 生物信息学预测 | 第30-31页 |
| 4.2.2 microRNA鉴定分析 | 第31-34页 |
| 4.2.3 miRNA靶基因预测及GO和KEGG分析 | 第34-35页 |
| 4.2.4 miRNA靶基因qRT-PCR分析 | 第35-36页 |
| 4.2.5 花药发育相关miRNA过表达分析 | 第36-42页 |
| 5 结果分析 | 第42-78页 |
| 5.1 生物信息学分析 | 第42-56页 |
| 5.1.1 sRNAs文库测序数据分析 | 第42-45页 |
| 5.1.2 已知miRNA的鉴定 | 第45-46页 |
| 5.1.3 新miRNA(novel miRNA)的鉴定 | 第46-47页 |
| 5.1.4 差异极显著表达miRNA筛选 | 第47-50页 |
| 5.1.5 单核期差异极显著新miRNA前体结构 | 第50-54页 |
| 5.1.6 花药发育相关miRNA同源性分析 | 第54-56页 |
| 5.2 miRNA加尾法qRT-PCR分析 | 第56-58页 |
| 5.2.1 miRNA加尾反转录质量检测 | 第56页 |
| 5.2.2 miRNA加尾法qRT-PCR分析 | 第56-58页 |
| 5.3 miRNA靶基因预测及验证分析 | 第58-70页 |
| 5.3.1 miRNA靶基因功能预测 | 第58-62页 |
| 5.3.2 育性相关miRNA靶基因筛选 | 第62-63页 |
| 5.3.3 靶基因qRT-PCR分析 | 第63-70页 |
| 5.4 miRNA前体过表达载体的构建 | 第70-74页 |
| 5.4.1 目的片段的扩增 | 第70-71页 |
| 5.4.2 克隆载体的连接 | 第71-72页 |
| 5.4.3 表达载体的连接 | 第72-73页 |
| 5.4.4 农杆菌转化 | 第73-74页 |
| 5.5 过表达植株及表型 | 第74-78页 |
| 5.5.1 阳性苗PCR鉴定 | 第74-75页 |
| 5.5.2 阳性苗表型 | 第75-77页 |
| 5.5.3 阳性苗qRT-PCR | 第77-78页 |
| 6 讨论 | 第78-85页 |
| 6.1 玉米CMS-C不育相关miRNA鉴定 | 第78-81页 |
| 6.2 miRNA与候选靶基因之间的调控关系 | 第81-83页 |
| 6.3 miR171-5p, miR444b.2过表达植株表型分析 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
