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AP3B1基因在雌性生殖和子宫发育中作用的研究及CRISPR-CAS9技术在小鼠基因定点敲除中的应用

符号说明第7-8页
第一部分:AP3B1基因在雌性生殖和子宫发育中作用的研究第8-66页
    中文摘要第8-9页
    Abstract第9-10页
    第一章 前言第10-18页
        1.1 AP3B1基因与HPS综合征简介第10-11页
        1.2 雌性生殖概述第11-13页
            1.2.1 子宫第11-12页
            1.2.2 卵巢第12页
            1.2.3 卵泡与卵子第12-13页
        1.3 调节子宫发育的关键基因和信号通路第13-15页
            1.3.1 HOX基因第13-14页
            1.3.2 Wnt信号通路第14-15页
        1.4 雌激素与雌激素受体(ER)第15页
        1.5 发情周期第15-16页
        1.6 幼稚子宫第16页
        1.7 AP3B1基因与子宫发育的关系第16-18页
            1.7.1 β-catenin在雌性生殖中的作用第16-17页
            1.7.2 β-catenin与PCP-2的相互作用第17页
            1.7.3 PCP-2与AP-3的相互作用第17-18页
    第二章 材料和方法第18-28页
        2.1 实验动物第18页
        2.4. 实验方法第18-28页
            2.4.1 生殖能力检测第18页
            2.4.2 发情周期检测第18-19页
            2.4.3 心脏、肾脏、生殖器官/体重检测及外部形态观察第19-20页
            2.4.4 生殖器官组织学观察第20-22页
            2.4.5 子宫发育关键基因的RT-PCR检测第22-23页
            2.4.6 子宫总蛋白、胞浆蛋白和膜蛋白的提取第23-24页
            2.4.7 子宫发育关键蛋白β-catenin的Western Blot分析第24-26页
            2.4.8 雌激素含量检测第26-27页
            2.4.9 统计学分析第27-28页
    第三章 实验结果第28-50页
        3.1 B6、pe雌鼠生殖能力对比第28-29页
        3.2 B6、pe雌鼠心、肾、子宫发育情况对比第29-38页
            3.2.1 P1、P7、P14的pe雌鼠子宫未见明显异常第29-34页
            3.2.2 一月龄和三月龄成鼠子宫发育不良第34-38页
        3.3 B6、pe雌鼠卵巢病理切片分析第38-39页
        3.4 B6、pe雌鼠子宫基质层和子宫内膜发育情况对比第39-42页
        3.5 B6、pe雌鼠超排卵数目比较第42页
        3.6 B6、pe雌鼠精卵结合能力比较第42-43页
        3.7 B6、pe雌鼠雌激素含量对比第43-44页
        3.8 B6、pe雌鼠子宫发育关键基因RT-PCR分析第44-47页
        3.9 B6、pe雌鼠子宫中β-catenin表达水平比较第47-50页
    第四章 讨论第50-56页
    参考文献第56-62页
    附录第62-66页
第二部分:CRISPR-CAS9技术在小鼠基因定点敲除中的应用第66-92页
    中文摘要第66-68页
    Abstract第68-70页
    第一章 前言第70-76页
        1.1 CRISPR-CAS9技术第70-72页
            1.1.1 CRISPR-CAS9技术概述第70页
            1.1.2 CRISPR-CAS9系统结构和作用原理第70-71页
            1.1.3 Cas9基因编辑的优势第71-72页
        1.2 CAS9技术在小鼠基因定点敲除中的研究进展第72-73页
        1.3 附睾特异基因Teddm1和serpinalf简介第73-74页
        1.4 本研究的目的、思路和意义第74-76页
    第二章 材料和方法第76-82页
        2.1 实验材料、试剂与仪器第76页
            2.1.1 实验动物(见第一部分)第76页
            2.1.2 试剂与仪器第76页
        2.2 实验方法第76-82页
            2.2.1 靶位点的选择第76-77页
            2.2.2 CD1雄鼠绝育手术第77页
            2.2.3 雌鼠超排及制作假孕雌鼠第77-78页
            2.2.4 收集合子并利用透明质酸酶去掉卵丘细胞第78页
            2.2.5 显微注射针和固定针的拉制第78-79页
            2.2.6 小鼠受精卵显微注射第79-80页
            2.2.7 二细胞期受精卵胚胎移植入输卵管内第80-82页
    第三章 实验结果第82-86页
        3.1 靶点的查找和确定第82页
        3.2 透明质酸酶浓度的探索第82-83页
        3.3 小鼠受精卵收集和体外培养条件的探索第83-84页
        3.4 输卵管胚胎移植技术的探索第84-86页
    第四章 讨论第86-90页
    参考文献第90-92页
致谢第92-93页
学位论文评阅及答辩情况表第93页

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