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一株鸭坦布苏病毒的分离鉴定及致病性研究

符号说明第4-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1 前言第14-27页
    1.1 坦布苏病毒病概述第14页
    1.2 坦布苏病毒的生物学特性第14-19页
        1.2.0 TMUV 的分类地位第14-15页
        1.2.1 坦布苏病毒的形态结构第15页
        1.2.2 坦布苏病毒的基因组、编码蛋白及其功能第15-18页
            1.2.2.1 坦布苏病毒结构蛋白第15-16页
            1.2.2.2 坦布苏病毒的非结构蛋白第16-18页
            1.2.2.3 坦布苏病毒的复制机制第18页
        1.2.3 坦布苏病毒的理化特性和培养特性第18-19页
    1.3 坦布苏病毒的流行病学第19页
    1.4 坦布苏病毒的致病性第19-20页
        1.4.1 主要临床症状第19-20页
        1.4.2 主要剖检变化第20页
        1.4.3 主要病理变化第20页
    1.5 我国坦布苏病毒的分离现状第20-21页
    1.6 坦布苏病毒的诊断第21-25页
        1.6.1 坦布苏病毒的分离与鉴定第21-22页
        1.6.2 血清学检测方法第22-23页
            1.6.2.1 血清中和试验第22页
            1.6.2.2 酶联免疫吸附试验第22-23页
            1.6.2.3 乳胶凝集试验第23页
        1.6.3 坦布苏病毒分子生物学检测技术第23-25页
            1.6.3.1 RT-PCR 检测技术第23-24页
            1.6.3.2 核酸探针检测技术第24-25页
            1.6.3.3 RT-LAMP 检测技术第25页
    1.7 坦布苏病毒的防控第25-26页
    1.8 研究目的及意义第26-27页
2 材料和方法第27-38页
    2.1 材料第27-29页
        2.1.1 病料与鸭胚第27页
        2.1.2 试验动物第27页
        2.1.3 仪器和试剂第27-28页
        2.1.4 主要试剂和溶液的配置第28-29页
    2.2 方法第29-38页
        2.2.1 坦布苏病毒的分离和鉴定第29-34页
            2.2.1.1 病料处理与病毒的传代第29页
            2.2.1.2 引物第29-30页
            2.2.1.3 病毒 RNA 的提取和 RT-PCR 鉴定第30-32页
                2.2.1.3.1 Trizol 法提取病毒 RNA第30-31页
                2.2.1.3.2 目的片段的琼脂糖凝胶回收纯化第31页
                2.2.1.3.3 连接及转化第31-32页
                2.2.1.3.4 阳性克隆鉴定与测序第32页
            2.2.1.4 病毒 ELD50的测定第32页
            2.2.1.5 动物回归试验第32页
            2.2.1.6 鸭胚的致死性第32-33页
            2.2.1.7 病毒分离株理化特性的研究第33-34页
                2.2.1.7.1 脂溶剂敏感试验第33页
                2.2.1.7.2 耐热性试验第33页
                2.2.1.7.3 阳离子稳定试验第33页
                2.2.1.7.4 耐酸性试验第33页
                2.2.1.7.5 胰蛋白酶敏感试验第33页
                2.2.1.7.6 血凝特性试验第33-34页
        2.2.2 坦布苏病毒对雏鸭的致病性研究第34-38页
            2.2.2.1 病毒增殖第34页
            2.2.2.2 动物分组与人工感染第34页
            2.2.2.3 免疫器官指数的测定第34页
            2.2.2.4 病理组织的固定及观察第34-35页
            2.2.2.5 血清中白介素-6 、干扰素-γ含量的测定第35-36页
            2.2.2.6 TMUV 抗体水平的测定第36-37页
            2.2.2.7 外周血 T 淋巴细胞亚群 CD4+/CD8+的测定第37页
            2.2.2.8 血清中生化指标的测定第37页
            2.2.2.9 数据分析第37-38页
3 结果与分析第38-54页
    3.1 病毒的分离与鉴定第38-41页
        3.1.1 病毒 RT-PCR 扩增结果及序列分析第38-39页
        3.1.2 病毒分离株 ELD50的测定第39页
        3.1.3 动物回归试验第39-40页
        3.1.4 鸭胚的致死性第40页
        3.1.5 脂溶剂敏感试验第40页
        3.1.6 耐热性试验第40-41页
        3.1.7 阳离子稳定试验第41页
        3.1.8 耐酸性试验第41页
        3.1.9 胰蛋白酶敏感试验第41页
        3.1.10 血凝特性试验第41页
    3.2 TMUV 对雏鸭的致病性研究第41-54页
        3.2.1 人工感染雏鸭后临床症状第41页
        3.2.2 人工感染雏鸭后剖检变化第41-42页
        3.2.3 人工感染雏鸭后病理组织学变化第42-48页
        3.2.4 人工感染后雏鸭体重变化情况第48页
        3.2.5 人工感染后雏鸭免疫器官指数变化情况第48-50页
        3.2.6 人工感染后雏鸭血清中 IL-6、IFN-γ的变化情况第50页
        3.2.7 人工感染后雏鸭血清中 TMUV 抗体水平的测定第50-51页
        3.2.8 外周血 T 淋巴细胞亚群 CD4+/CD8+测定结果第51页
        3.2.9 人工感染后雏鸭血液生化指标测定结果第51-54页
4 讨论第54-57页
    4.1 坦布苏病毒的分离鉴定及特性研究分析第54页
    4.2 坦布苏病毒的致病性研究分析第54-57页
5 结论第57-58页
参考文献第58-70页
致谢第70-71页
攻读硕士期间发表论文情况第71页

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