符号说明 | 第4-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-27页 |
1.1 坦布苏病毒病概述 | 第14页 |
1.2 坦布苏病毒的生物学特性 | 第14-19页 |
1.2.0 TMUV 的分类地位 | 第14-15页 |
1.2.1 坦布苏病毒的形态结构 | 第15页 |
1.2.2 坦布苏病毒的基因组、编码蛋白及其功能 | 第15-18页 |
1.2.2.1 坦布苏病毒结构蛋白 | 第15-16页 |
1.2.2.2 坦布苏病毒的非结构蛋白 | 第16-18页 |
1.2.2.3 坦布苏病毒的复制机制 | 第18页 |
1.2.3 坦布苏病毒的理化特性和培养特性 | 第18-19页 |
1.3 坦布苏病毒的流行病学 | 第19页 |
1.4 坦布苏病毒的致病性 | 第19-20页 |
1.4.1 主要临床症状 | 第19-20页 |
1.4.2 主要剖检变化 | 第20页 |
1.4.3 主要病理变化 | 第20页 |
1.5 我国坦布苏病毒的分离现状 | 第20-21页 |
1.6 坦布苏病毒的诊断 | 第21-25页 |
1.6.1 坦布苏病毒的分离与鉴定 | 第21-22页 |
1.6.2 血清学检测方法 | 第22-23页 |
1.6.2.1 血清中和试验 | 第22页 |
1.6.2.2 酶联免疫吸附试验 | 第22-23页 |
1.6.2.3 乳胶凝集试验 | 第23页 |
1.6.3 坦布苏病毒分子生物学检测技术 | 第23-25页 |
1.6.3.1 RT-PCR 检测技术 | 第23-24页 |
1.6.3.2 核酸探针检测技术 | 第24-25页 |
1.6.3.3 RT-LAMP 检测技术 | 第25页 |
1.7 坦布苏病毒的防控 | 第25-26页 |
1.8 研究目的及意义 | 第26-27页 |
2 材料和方法 | 第27-38页 |
2.1 材料 | 第27-29页 |
2.1.1 病料与鸭胚 | 第27页 |
2.1.2 试验动物 | 第27页 |
2.1.3 仪器和试剂 | 第27-28页 |
2.1.4 主要试剂和溶液的配置 | 第28-29页 |
2.2 方法 | 第29-38页 |
2.2.1 坦布苏病毒的分离和鉴定 | 第29-34页 |
2.2.1.1 病料处理与病毒的传代 | 第29页 |
2.2.1.2 引物 | 第29-30页 |
2.2.1.3 病毒 RNA 的提取和 RT-PCR 鉴定 | 第30-32页 |
2.2.1.3.1 Trizol 法提取病毒 RNA | 第30-31页 |
2.2.1.3.2 目的片段的琼脂糖凝胶回收纯化 | 第31页 |
2.2.1.3.3 连接及转化 | 第31-32页 |
2.2.1.3.4 阳性克隆鉴定与测序 | 第32页 |
2.2.1.4 病毒 ELD50的测定 | 第32页 |
2.2.1.5 动物回归试验 | 第32页 |
2.2.1.6 鸭胚的致死性 | 第32-33页 |
2.2.1.7 病毒分离株理化特性的研究 | 第33-34页 |
2.2.1.7.1 脂溶剂敏感试验 | 第33页 |
2.2.1.7.2 耐热性试验 | 第33页 |
2.2.1.7.3 阳离子稳定试验 | 第33页 |
2.2.1.7.4 耐酸性试验 | 第33页 |
2.2.1.7.5 胰蛋白酶敏感试验 | 第33页 |
2.2.1.7.6 血凝特性试验 | 第33-34页 |
2.2.2 坦布苏病毒对雏鸭的致病性研究 | 第34-38页 |
2.2.2.1 病毒增殖 | 第34页 |
2.2.2.2 动物分组与人工感染 | 第34页 |
2.2.2.3 免疫器官指数的测定 | 第34页 |
2.2.2.4 病理组织的固定及观察 | 第34-35页 |
2.2.2.5 血清中白介素-6 、干扰素-γ含量的测定 | 第35-36页 |
2.2.2.6 TMUV 抗体水平的测定 | 第36-37页 |
2.2.2.7 外周血 T 淋巴细胞亚群 CD4+/CD8+的测定 | 第37页 |
2.2.2.8 血清中生化指标的测定 | 第37页 |
2.2.2.9 数据分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-54页 |
3.1 病毒的分离与鉴定 | 第38-41页 |
3.1.1 病毒 RT-PCR 扩增结果及序列分析 | 第38-39页 |
3.1.2 病毒分离株 ELD50的测定 | 第39页 |
3.1.3 动物回归试验 | 第39-40页 |
3.1.4 鸭胚的致死性 | 第40页 |
3.1.5 脂溶剂敏感试验 | 第40页 |
3.1.6 耐热性试验 | 第40-41页 |
3.1.7 阳离子稳定试验 | 第41页 |
3.1.8 耐酸性试验 | 第41页 |
3.1.9 胰蛋白酶敏感试验 | 第41页 |
3.1.10 血凝特性试验 | 第41页 |
3.2 TMUV 对雏鸭的致病性研究 | 第41-54页 |
3.2.1 人工感染雏鸭后临床症状 | 第41页 |
3.2.2 人工感染雏鸭后剖检变化 | 第41-42页 |
3.2.3 人工感染雏鸭后病理组织学变化 | 第42-48页 |
3.2.4 人工感染后雏鸭体重变化情况 | 第48页 |
3.2.5 人工感染后雏鸭免疫器官指数变化情况 | 第48-50页 |
3.2.6 人工感染后雏鸭血清中 IL-6、IFN-γ的变化情况 | 第50页 |
3.2.7 人工感染后雏鸭血清中 TMUV 抗体水平的测定 | 第50-51页 |
3.2.8 外周血 T 淋巴细胞亚群 CD4+/CD8+测定结果 | 第51页 |
3.2.9 人工感染后雏鸭血液生化指标测定结果 | 第51-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
4.1 坦布苏病毒的分离鉴定及特性研究分析 | 第54页 |
4.2 坦布苏病毒的致病性研究分析 | 第54-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第71页 |