| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 蓖麻矮化研究进展 | 第11页 |
| 1.1.1 国外蓖麻矮化研究进展 | 第11页 |
| 1.1.2 国内蓖麻矮化研究进展 | 第11页 |
| 1.2 赤霉素信号转导及DELLA蛋白 | 第11-13页 |
| 1.2.1 赤霉素信号转导 | 第11-12页 |
| 1.2.2 DELLA蛋白质：GA信号的关键调节因子 | 第12-13页 |
| 1.3 蛋白质纯化方法 | 第13-16页 |
| 1.3.1 亲和层析纯化 | 第14-15页 |
| 1.3.2 离子交换层析 | 第15页 |
| 1.3.3 分子筛层析 | 第15-16页 |
| 1.4 蛋白质谱技术 | 第16页 |
| 1.4.1 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)原理 | 第16页 |
| 1.5 蛋白晶体学 | 第16-18页 |
| 1.5.1 蛋白质晶体的生长原理 | 第17-18页 |
| 1.5.2 蛋白晶体生长的优化 | 第18页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 试验试剂与配方 | 第19页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.2.2 构建原核表达载体 | 第20-26页 |
| 2.2.3 目标蛋白的小量诱导表达 | 第26页 |
| 2.2.4 目标蛋白的大量诱导表达 | 第26-29页 |
| 2.2.5 蛋白质谱分析 | 第29-30页 |
| 2.2.6 蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| 2.2.7 蛋白结晶条件筛选 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| 3.1 RcDELLA(GAI)基因生物信息学分析 | 第32-36页 |
| 3.1.1 一级结构及理化性质分析 | 第32-33页 |
| 3.1.2 氨基酸保守结构域及信号肽分析 | 第33-34页 |
| 3.1.3 跨膜结构与分析 | 第34页 |
| 3.1.4 磷酸化位点分析 | 第34页 |
| 3.1.5 二级结构和三级结构预测分析 | 第34-35页 |
| 3.1.6 同源性分析及进化树分析 | 第35-36页 |
| 3.2 构建原核表达载体 | 第36-39页 |
| 3.2.1 目的基因的扩增 | 第36-37页 |
| 3.2.2 pETM-13,pETM-20,pETM-30,pETM-40,pETM-50,pETMBP-1a,pHAT-2质粒提取 | 第37页 |
| 3.2.3 质粒双酶切 | 第37-38页 |
| 3.2.4 单菌斑PCR检测 | 第38-39页 |
| 3.3 RcDELLA蛋白表达纯化 | 第39-43页 |
| 3.3.1 RcDELLA蛋白诱导表达 | 第39-40页 |
| 3.3.2 RcDELLA蛋白亲和层析 | 第40-41页 |
| 3.3.3 RcDELLA蛋白阴离子交换层析 | 第41-42页 |
| 3.3.4 RcDELLA蛋白的分子筛层析 | 第42-43页 |
| 3.4 蛋白质谱分析结果 | 第43-44页 |
| 3.5 蛋白晶体生长条件的筛选及生长 | 第44-46页 |
| 4 结论与讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 结论 | 第46页 |
| 4.2 讨论 | 第46-48页 |
| 4.2.1 DELLA蛋白 | 第46-47页 |
| 4.2.2 蛋白表达纯化 | 第47页 |
| 4.2.3 晶体生长的优化 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |