| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 缩略词对应表 | 第7-10页 |
| 第一章 综述 | 第10-22页 |
| 1.1 链霉菌调控网络进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 途径特异性调控 | 第10页 |
| 1.1.2 全局多效调控 | 第10-13页 |
| 1.1.2.1 丁内酉旨一受体系统 | 第11页 |
| 1.1.2.2 严谨因子ppGpp | 第11-12页 |
| 1.1.2.3 双组份系统 | 第12-13页 |
| 1.2 磷酸双组份系统研究进展 | 第13-19页 |
| 1.2.1 磷酸双组份系统与磷酸转运 | 第14-15页 |
| 1.2.2 PHO boxes | 第15-16页 |
| 1.2.3 磷酸双组份系统对氮、碳代谢的调控 | 第16-17页 |
| 1.2.4 磷酸双组份系统与AfsR的交叉调控 | 第17-18页 |
| 1.2.5 磷酸双组份对次级代谢产物的调控 | 第18-19页 |
| 1.3 达托霉素研究概述 | 第19-21页 |
| 1.4 本文的研究内容和意义 | 第21-22页 |
| 1.4.1 本文的研究内容 | 第21页 |
| 1.4.2 本课题的意义 | 第21-22页 |
| 第二章 磷酸双组分系统对达托霉素调控功能研究 | 第22-42页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.2.1 菌株,质粒以及引物 | 第22-24页 |
| 2.2.2 主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 培养基和培养条件 | 第25页 |
| 2.2.4 常用试剂 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-34页 |
| 2.3.1 分子克隆实验方法 | 第26-27页 |
| 2.3.2 质粒构建 | 第27-28页 |
| 2.3.3 玫瑰孢链霉菌摇瓶发酵以及达托霉素产量检测 | 第28-29页 |
| 2.3.4 链霉菌总蛋白提取以及SDS-PAGE和Western Blot检测 | 第29页 |
| 2.3.5 His标签蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| 2.3.6 链霉菌接合转导 | 第30页 |
| 2.3.7 链霉菌基因组DNA的抽提 | 第30-31页 |
| 2.3.8 phoRP基因敲除与回补菌株构建: | 第31页 |
| 2.3.9 EMSA | 第31-32页 |
| 2.3.10 DNase Ⅰ Footprinting | 第32页 |
| 2.3.11 RNA抽提,反转录以及qRT-PCR | 第32-34页 |
| 2.4 实验结果以及讨论 | 第34-42页 |
| 2.4.1 PhoP与atrA启动子区结合 | 第34-36页 |
| 2.4.2 PhoP正调控atrA的表达 | 第36-37页 |
| 2.4.3 磷酸双組份正调控达托霉素生物合成 | 第37-39页 |
| 2.4.4 PhoP对自身的调控作用 | 第39-41页 |
| 2.4.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第三章 磷酸双组分系统与A-因子信号通路间的交叉调控 | 第42-51页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料 | 第42-44页 |
| 3.2.1 菌株,质粒以及引物 | 第42-43页 |
| 3.2.2 主要仪器和设备 | 第43页 |
| 3.2.3 培养基和培养条件 | 第43-44页 |
| 3.2.4 常用试剂 | 第44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-45页 |
| 3.3.1 分子克隆实验方法 | 第44页 |
| 3.3.2 质粒构建 | 第44页 |
| 3.3.3 链霉菌总蛋白提取以及SDS-PAGE和Western Blot检测 | 第44页 |
| 3.3.4 His标签蛋白的纯化 | 第44页 |
| 3.3.5 链霉菌接合转导 | 第44-45页 |
| 3.3.6 链霉菌基因组DNA的抽提 | 第45页 |
| 3.3.7 EMSA | 第45页 |
| 3.3.8 DNase Ⅰ Footprinting | 第45页 |
| 3.4 实验结果以及讨论 | 第45-51页 |
| 3.4.1 PhoP与AdpA在atrA启动子区的竞争性结合 | 第45-46页 |
| 3.4.2 AdpA在atrA启动子区结合位点的确定 | 第46-47页 |
| 3.4.3 PhoP与AdpA在atrAp~*的竞争性结合 | 第47-48页 |
| 3.4.4 PhoP负调控adpA基因的表达 | 第48-49页 |
| 3.4.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 结论与展望 | 第51-52页 |
| 4.1 本文的研究成果 | 第51页 |
| 4.2 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
