摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 近视概论 | 第12-13页 |
1.2 高度近视的分子遗传学研究 | 第13-15页 |
1.2.1 连锁分析 | 第13-14页 |
1.2.2 关联分析 | 第14-15页 |
1.3 高度近视疾病基因国内外研究进展 | 第15-17页 |
1.4 近视的遗传因素和环境因素 | 第17页 |
1.5 单核苷酸多态性简介 | 第17-19页 |
1.5.1 单核苷酸多态性概念 | 第17-18页 |
1.5.2 常见的的SNPs分析方法 | 第18页 |
1.5.3 遗传标记的演化 | 第18-19页 |
1.6 COL1A1和COL18A1基因以及SNTB1基因的前期研究 | 第19-22页 |
1.6.1 COL1A1和COL18A1基因在近视中的前期研究 | 第19页 |
1.6.2 SNTB1基因在近视中的前期研究 | 第19-22页 |
1.7 本论文的主要内容 | 第22页 |
1.7.1 COL11A1和COL18A1基因多态位点与近视相关性分析 | 第22页 |
1.7.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究 | 第22页 |
1.8 以期完成的实验目的 | 第22页 |
1.9 本实验的结构安排 | 第22-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-44页 |
2.1 实验试剂和仪器 | 第24-27页 |
2.1.1 实验试剂 | 第24-25页 |
2.1.2 实验仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 实验试剂的配制 | 第26-27页 |
2.2 实验对象和主要生物材料 | 第27-29页 |
2.2.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验对象 | 第27-28页 |
2.2.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究的主要生物材料 | 第28-29页 |
2.3 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析的实验方法 | 第29-38页 |
2.3.1 实验对象的眼科检查 | 第29页 |
2.3.2 全血DNA样本提取 | 第29-31页 |
2.3.3 SNP位点的筛选和引物设计 | 第31-34页 |
2.3.4 基因分型 | 第34-37页 |
2.3.5 统计学分析方法 | 第37-38页 |
2.4 SNTB1基因功能研究中质粒的扩增 | 第38-40页 |
2.4.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化 | 第38-39页 |
2.4.2 质粒提取 | 第39-40页 |
2.5 SNTB1基因功能研究中293T细胞和3T3细胞的培养 | 第40页 |
2.6 CCK8法分析SNTB1基因对3T3细胞和293T细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
2.6.1 制作标准曲线 | 第40-41页 |
2.6.2 细胞增殖实验 | 第41-42页 |
2.7 SNTB1基因功能研究中细胞迁移实验 | 第42-43页 |
2.7.1 实验用鼠尾胶原制备 | 第42页 |
2.7.2 Transwell检测细胞迁移 | 第42-43页 |
2.8 SNTB1基因功能研究中细胞粘附实验 | 第43-44页 |
2.8.1 Matrigel检测细胞粘附 | 第43-44页 |
第三章 结果 | 第44-55页 |
3.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果 | 第44-50页 |
3.1.1 研究对象临床资料 | 第44页 |
3.1.2 GeneticAnalyzer软件基因分型结果 | 第44-45页 |
3.1.3 Sanger直接测序法验证基因分型 | 第45页 |
3.1.4 统计学分析 | 第45-49页 |
3.1.5 连锁不平衡和单体型分析 | 第49-50页 |
3.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果 | 第50-55页 |
3.2.1 CCK8法分析SNTB1基因对细胞增殖的影响 | 第50-52页 |
3.2.2 SNTB1基因对3T3细胞和293T细胞迁移粘附的影响 | 第52-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
4.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果分析 | 第55-56页 |
4.1.1 COL11A1和COL18A1基因实验结果分析 | 第55-56页 |
4.1.2 易感基因分析 | 第56页 |
4.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果分析 | 第56-58页 |
4.2.1 SNTB1基因实验结果分析 | 第56-57页 |
4.2.2 SNTB1基因编码的蛋白相关功能分析 | 第57-58页 |
第五章 全文总结与展望 | 第58-60页 |
5.1 本研究结果总结 | 第58页 |
5.1.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果总结 | 第58页 |
5.1.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果总结 | 第58页 |
5.2 下一步工作展望 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
攻读硕士学位期间取得的成果 | 第68页 |