| 中文摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 植物开花调控 | 第10-12页 |
| 1.1.1 开花时间关键决定因子FLC基因的表达调控 | 第10-12页 |
| 1.2 植物激素ABA参与植物开花调控 | 第12-14页 |
| 1.2.1 ABA参与植物开花转变 | 第12-13页 |
| 1.2.2 pre-mRNA的剪接调控参与植物对ABA信号的响应 | 第13-14页 |
| 1.3 U2AF65参与pre-mRNA的剪接 | 第14-15页 |
| 1.4 拟南芥中存在U2AF同源基因并可能参与ABA介导的生长发育调控 | 第15-16页 |
| 1.5 本实验研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 载体 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要工具酶与试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 引物 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-36页 |
| 2.2.1 突变体和转基因植株的基因型鉴定 | 第19-21页 |
| 2.2.1.1 植物基因组DNA的粗提 | 第20页 |
| 2.2.1.2 PCR扩增鉴定材料的基因型 | 第20-21页 |
| 2.2.2 35S::FLC-GFP和35S::ABI5转基因植株的获得 | 第21-29页 |
| 2.2.2.1 克隆载体的构建 | 第21-23页 |
| 2.2.2.2 表达载体的构建 | 第23-26页 |
| 2.2.2.3 农杆菌的转化 | 第26-28页 |
| 2.2.2.4 拟南芥atu2af65b突变体的遗传转化与阳性植株的筛选鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.3 GUS组织化学染色法步骤 | 第29页 |
| 2.2.4 拟南芥杂交实验 | 第29-30页 |
| 2.2.5 拟南芥幼苗茎尖的取材方法 | 第30页 |
| 2.2.6 土壤外施ABA处理 | 第30-31页 |
| 2.2.7 突变体和转基因植株中基因表达量和pre-mRNA剪接分析 | 第31-36页 |
| 2.2.7.1 植物总RNA的提取及纯化 | 第31-33页 |
| 2.2.7.2 RNA反转录为cDNA | 第33页 |
| 2.2.7.3 qRT-PCR检测基因表达差异 | 第33-34页 |
| 2.2.7.4 FLC和ABI5内含子剪接效率的检测 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-52页 |
| 3.1 AtU2AF65b调节FLCpre-mRNA的剪接 | 第36-41页 |
| 3.1.1 AtU2AF65b调节FLC的mRNA水平 | 第36-37页 |
| 3.1.2 AtU2AF65b调节FLCpre-mRNA的剪接 | 第37-38页 |
| 3.1.3 AtU2AF65b通过FLC参与开花时间调控 | 第38-40页 |
| 3.1.4 AtU2AF65b调控FLC的转录激活 | 第40-41页 |
| 3.2 AtU2AF65b通过ABI5调控FLC的转录 | 第41-45页 |
| 3.2.1 atu2af65b突变体中ABI5的mRNA水平下调 | 第41-42页 |
| 3.2.2 AtU2AF65b调控ABI5的pre-mRNA剪接 | 第42-43页 |
| 3.2.3 AtU2AF65b通过ABI5参与开花时间调控 | 第43-45页 |
| 3.3 AtU2AF65b参与ABA介导的开花时间调控 | 第45-52页 |
| 3.3.1 AtU2AF65b的表达受内源和外源ABA调控 | 第45-47页 |
| 3.3.2 AtU2AF65b在ABA调控开花过程中起作用 | 第47-48页 |
| 3.3.3 AtU2AF65b通过FLC和ABI5pre-mRNA的剪接参与ABA介导的开花时间调控 | 第48-52页 |
| 3.3.3.1 AtU2AF65b参与ABA调控的FLCpre-mRNA的剪接 | 第48-50页 |
| 3.3.3.2 AtU2AF65b参与ABA调控的ABI5pre-mRNA的剪接 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 4.1 AtU2AF65b参与FLC转录水平和转录后水平的调控 | 第52-53页 |
| 4.2 AtU2AF65b参与ABA介导的开花时间调控过程 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第63页 |
