| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第9-10页 |
| 1.2 植物启动子概述 | 第10-12页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第10-11页 |
| 1.2.2 诱导型启动子 | 第11页 |
| 1.2.3 组织特异型启动子 | 第11-12页 |
| 1.3 组织特异型启动子研究进展 | 第12-17页 |
| 1.3.1 植物启动子特异表达相关元件 | 第12-14页 |
| 1.3.2 根特异表达启动子 | 第14页 |
| 1.3.3 叶特异表达启动子 | 第14-16页 |
| 1.3.4 花特异表达启动子 | 第16页 |
| 1.3.5 种子特异表达启动子 | 第16-17页 |
| 1.4 启动子研究的方法 | 第17-18页 |
| 1.4.1 启动子的分离克隆方法 | 第17-18页 |
| 1.4.2 启动子的生物信息学分析 | 第18页 |
| 1.4.3 启动子表达模式的验证 | 第18页 |
| 1.5 发根农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第18-19页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 实验试剂及培养基 | 第20-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-41页 |
| 2.2.1 大豆基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 大豆组织特异表达基因的筛选 | 第23-24页 |
| 2.2.3 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式 | 第24-27页 |
| 2.2.4 组织特异启动子的克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.5 启动子GUS表达载体的构建 | 第28-34页 |
| 2.2.6 农杆菌侵染法转化拟南芥 | 第34-35页 |
| 2.2.7 拟南芥培养及转基因植株筛选 | 第35-36页 |
| 2.2.8 阳性植株的组织化学分析 | 第36-37页 |
| 2.2.9 GUS表达量RT-PCR检测 | 第37-38页 |
| 2.2.10 发根农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第38-40页 |
| 2.2.11 大豆毛状根的组织化学染色 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-63页 |
| 3.1 大豆组织特异表达基因的筛选 | 第41-42页 |
| 3.2 RT-PCR验证大豆组织特异表达基因的表达模式 | 第42页 |
| 3.3 组织特异启动子的克隆与载体构建 | 第42-46页 |
| 3.3.1 组织特异启动子的克隆 | 第42-43页 |
| 3.3.2 启动子GUS表达载体的构建 | 第43-46页 |
| 3.4 拟南芥转基因阳性植株的筛选 | 第46-48页 |
| 3.4.1 Basta筛选抗性植株 | 第46-47页 |
| 3.4.2 转基因阳性植株Bar试纸条检验 | 第47页 |
| 3.4.3 转基因T1代植株目的基因的检测 | 第47页 |
| 3.4.4 已获得的转基因阳性植株 | 第47-48页 |
| 3.5 拟南芥阳性植株组织化学分析(GUS染色) | 第48-53页 |
| 3.5.1 叶特异启动子GUS染色结果 | 第48-49页 |
| 3.5.2 根特异启动子GUS染色结果 | 第49-52页 |
| 3.5.3 组成型启动子及野生型拟南芥GUS染色结果 | 第52-53页 |
| 3.6 拟南芥阳性植株GUS表达情况检测 | 第53-54页 |
| 3.6.1 拟南芥各组织RNA提取结果 | 第53页 |
| 3.6.2 叶特异启动子GUS表达情况检测 | 第53页 |
| 3.6.3 根特异启动子GUS表达情况检测 | 第53-54页 |
| 3.6.4 组成型启动子GUS表达情况检测 | 第54页 |
| 3.7 发根农杆菌侵染大豆及GUS染色鉴定 | 第54-60页 |
| 3.7.1 大豆毛状根的获得 | 第54-56页 |
| 3.7.2 发根诱导率及发根数 | 第56页 |
| 3.7.3 组织特异启动子GUS染色结果 | 第56-60页 |
| 3.7.4 GUS基因转化效率 | 第60页 |
| 3.8 组织特异启动子的生物信息学分析 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
