| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 转录因子Nupr1在造血干细胞中的功能和机制研究 | 第12-77页 |
| 1.1 引言 | 第12-29页 |
| 1.1.1 造血干细胞的研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.2 造血干细胞的稳态调控 | 第18-26页 |
| 1.1.3 转录因子Nupr1的研究进展 | 第26-29页 |
| 1.2 实验材料与方法 | 第29-49页 |
| 1.2.1 实验动物 | 第29页 |
| 1.2.2 小鼠基因组鉴定 | 第29-32页 |
| 1.2.3 造血干祖细胞的细胞周期分析 | 第32-34页 |
| 1.2.4 造血干细胞的BrdU掺入实验 | 第34-37页 |
| 1.2.5 竞争移植 | 第37-39页 |
| 1.2.6 移植后的受体鼠外周血检测 | 第39-40页 |
| 1.2.7 竞争移植的连续系列移植 | 第40-41页 |
| 1.2.8 造血干细胞的诱导凋亡分析 | 第41-43页 |
| 1.2.9 造血干细胞的活性氧分析(ROS分析) | 第43-44页 |
| 1.2.10 造血干细胞的RNA-seq测序 | 第44-48页 |
| 1.2.11 CFU | 第48-49页 |
| 1.3 实验结果 | 第49-73页 |
| 1.3.1 转录因子Nupr1在HSC和MPP细胞中差异表达 | 第49页 |
| 1.3.2 Nupr1~(-/-)小鼠的建立 | 第49-51页 |
| 1.3.3 Nupr1~(-/-)原代小鼠的造血系统发育正常 | 第51-55页 |
| 1.3.4 生理稳态下,更多的Nupr1~(-/-)HSC进入细胞周期,增殖速率更快 | 第55-59页 |
| 1.3.5 Nupr1~(-/-)HSC在竞争移植中具有明显优势 | 第59-64页 |
| 1.3.6 Nupr1的缺失通过多个信号通路促进细胞增殖 | 第64-66页 |
| 1.3.7 Nupr1~(-/-)HSCs在促进自我更新的同时未加速衰老 | 第66-67页 |
| 1.3.8 Nupr1~(-/-)HSCs在辐照压力诱导下能够更快恢复 | 第67-71页 |
| 1.3.9 过表达Nupr1未能促进HSC的自我更新 | 第71-73页 |
| 1.4 结果与讨论 | 第73-77页 |
| 第二章 转录因子Trim27在造血干细胞中的功能研究 | 第77-126页 |
| 2.1 引言 | 第77-82页 |
| 2.1.1 扩增造血干细胞的研究进展 | 第77-79页 |
| 2.1.2 造血干细胞的发育受到转录因子的调控 | 第79-80页 |
| 2.1.3 转录因子Trim27的研究进展 | 第80-82页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第82-107页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第82页 |
| 2.2.2 过表达载体的构建 | 第82-84页 |
| 2.2.3 脐带血CD34+干细胞的分离 | 第84-86页 |
| 2.2.4 慢病毒包装与浓缩 | 第86-88页 |
| 2.2.5 脐带血干细胞的病毒感染 | 第88-89页 |
| 2.2.6 脐带血干细胞的集落形成实验 | 第89-90页 |
| 2.2.7 脐血干细胞的小鼠髓腔移植实验 | 第90-91页 |
| 2.2.8 小鼠胎肝组织中造血干祖细胞的分离与病毒感染过表达 | 第91-93页 |
| 2.2.9 小鼠眼静脉移植实验 | 第93-94页 |
| 2.2.10 移植后的受体鼠外周血检测 | 第94-96页 |
| 2.2.11 NOG受体鼠骨髓细胞的流式检测 | 第96-97页 |
| 2.2.12 受体鼠骨髓细胞中小鼠干祖细胞的流式检测 | 第97-99页 |
| 2.2.13 qPCR检测基因表达水平 | 第99-100页 |
| 2.2.14 Western Blot | 第100-103页 |
| 2.2.15 髓系祖细胞的RNA-seq测序 | 第103-107页 |
| 2.3 实验结果 | 第107-123页 |
| 2.3.1 通过逆转录病毒在小鼠胎肝的造血干祖细胞中过表达Trim27 | 第107-108页 |
| 2.3.2 过表达小鼠Trim27在体内引起髓系分化偏好 | 第108-112页 |
| 2.3.3 Trim27的异位表达在体内引起GMP增多 | 第112-113页 |
| 2.3.4 过表达Trim27没有扩增体内HSCs | 第113-114页 |
| 2.3.5 过表达Trim27引起髓系祖细胞中重要因子的表达上调 | 第114-116页 |
| 2.3.6 通过慢病毒在脐血CD34~+造血干祖细胞中过表达TRIM27 | 第116-118页 |
| 2.3.7 TRIM27的过表达引起CFU-M克隆增多 | 第118-119页 |
| 2.3.8 TRIM27在体内引起髓系分化偏好 | 第119-123页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第123-126页 |
| 参考文献 | 第126-140页 |
| 附录 | 第140-142页 |
| 致谢 | 第142-144页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第144页 |
