摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 光敏色素概况 | 第11-15页 |
1.1.1 化学结构 | 第11-12页 |
1.1.2 存在形式 | 第12页 |
1.1.3 分布 | 第12页 |
1.1.4 光敏色素的作用机理 | 第12-14页 |
1.1.5 光敏色素的生理功能 | 第14-15页 |
1.2 玉米光敏色素研究进展 | 第15页 |
1.3 玉米转基因技术 | 第15-20页 |
1.3.1 玉米转化的受体选择 | 第15-16页 |
1.3.2 表达载体构建中启动子和标记基因的选择 | 第16页 |
1.3.3 玉米转化的方法 | 第16-20页 |
1.4 光敏色素在植物转基因中的应用研究 | 第20页 |
1.5 本研究的目的意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-36页 |
2.1 材料和试剂 | 第22-25页 |
2.1.1 实验植物材料 | 第22页 |
2.1.2 农杆菌菌株、质粒和引物 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 培养基 | 第22-24页 |
2.1.5 电泳缓冲液 | 第24页 |
2.1.6 抗生素和激素 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 植物表达载体的构建 | 第25-29页 |
2.2.2 制备含载体pCUbi1390的农杆菌 | 第29-31页 |
2.2.3 玉米材料的准备、愈伤组织的诱导和继代培养 | 第31页 |
2.2.4 玉米愈伤组织的转化 | 第31-32页 |
2.2.5 抗性愈伤组织的筛选、分化与生根壮苗、炼苗与培育幼苗 | 第32-33页 |
2.2.6 再生植株的田间管理 | 第33页 |
2.2.7 再生植株的PCR检测 | 第33-36页 |
3 结果与分析 | 第36-46页 |
3.1 含BamHI和SpeI酶切位点的玉米光敏色素基因序列扩增结果 | 第36页 |
3.2 植物表达载体pCUbi1390-A1、pCUbi1390-B1、pCUbi1390-A2的构建结果 | 第36-38页 |
3.3 再生植株的PCR检测 | 第38-43页 |
3.3.1 潮霉素磷酸转移酶标记基因PCR扩增检测 | 第39-41页 |
3.3.2 CaMV35S启动子的PCR扩增检测 | 第41-42页 |
3.3.3 目的基因phyB1的PCR扩增检测 | 第42-43页 |
3.4 潮霉素和35S序列检测呈阳性植株样分析 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
4.1 转基因玉米植株检测存在的问题 | 第46页 |
4.2 玉米转自身同源基因存在的问题 | 第46-47页 |
4.3 对后续实验的建议 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录 | 第53-57页 |